摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-14页 |
1 研究背景 | 第11-12页 |
2 选题意义和研究内容 | 第12-14页 |
2.1 选题意义 | 第12-13页 |
2.2 研究内容 | 第13-14页 |
第二章 CMKLR1稳定转染细胞株的构建 | 第14-31页 |
1 材料和仪器 | 第14-16页 |
1.1 原料与试剂 | 第14-15页 |
1.2 仪器和设备 | 第15页 |
1.3 溶液配制 | 第15-16页 |
1.4 质粒 | 第16页 |
2 实验方法 | 第16-27页 |
2.1 质粒构建 | 第16-21页 |
2.2 感受态细菌制备 | 第21-22页 |
2.3 质粒的转化、扩增与鉴定 | 第22-23页 |
2.4 质粒抽提 | 第23-25页 |
2.5 稳定转染细胞株的构建 | 第25-26页 |
2.6 免疫荧光 | 第26-27页 |
3 实验结果 | 第27-29页 |
3.1 质粒CMKLR1- pcDNA3.1+表达的检验 | 第27-28页 |
3.2 293细胞分别稳转质粒CMKLR1-EGFP-pcDNA3.1+和FPR2-EGFP- pcDNA3.1+ | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29页 |
5 小结 | 第29-31页 |
第三章 Chemerin C9和Aβ_(42)分别诱导CMKLR1内吞 | 第31-62页 |
1 材料和仪器 | 第31-34页 |
1.1 原料与试剂 | 第31-32页 |
1.2 仪器和设备 | 第32-33页 |
1.3 溶液配置 | 第33-34页 |
1.4 质粒 | 第34页 |
1.5 细胞 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-44页 |
2.1 细胞培养与传代 | 第34-35页 |
2.2 细胞复苏与冻存-慢冻快融 | 第35-36页 |
2.3 瞬时转染 | 第36-37页 |
2.4 细胞计数 | 第37-38页 |
2.5 流式细胞术 | 第38-41页 |
2.6 免疫荧光 | 第41-42页 |
2.7 细胞迁移 | 第42-44页 |
3 实验结果 | 第44-60页 |
3.1 C9诱导CMKLR1内吞 | 第44-54页 |
3.2 Aβ_(42)诱导CMKLR1受体内吞 | 第54-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
5 小结 | 第62页 |
第四章 配体之间的相互调控作用 | 第62-83页 |
1 材料和仪器 | 第63-65页 |
1.1 原料与试剂 | 第63-64页 |
1.2 仪器和设备 | 第64页 |
1.3 溶液配置 | 第64-65页 |
1.4 质粒 | 第65页 |
1.5 细胞 | 第65页 |
2 实验方法 | 第65-69页 |
2.1 钙流 | 第65-67页 |
2.2 蛋白免疫印迹法 | 第67-69页 |
3 实验结果 | 第69-81页 |
3.1 Aβ_(42)对C9刺激CMKLR1所产生钙流的调控作用 | 第69-73页 |
3.2 C15对C9刺激CMKLR1所产生钙流的调控作用 | 第73-75页 |
3.3 Aβ_(42)对WKYMVm刺激FPR2所产生钙流的调控作用 | 第75-78页 |
3.4 Aβ_(42)对C9刺激CMKLR1所引起ERK磷酸化的调控作用 | 第78-79页 |
3.5 Aβ_(42)调控钙流与ERK磷酸化变化趋势的对比 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-82页 |
5 小结 | 第82-83页 |
第五章 总结与展望 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读硕士期间的主要研究成果 | 第90页 |
基金资助项目 | 第90-92页 |