摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-26页 |
1.1 启动子的定义 | 第12页 |
1.2 高等植物启动子的结构 | 第12-14页 |
1.2.1 TATA框 | 第12-13页 |
1.2.2 起始子 | 第13页 |
1.2.3 上游元件 | 第13-14页 |
1.2.4 应答元件 | 第14页 |
1.3 高等植物启动子的分类 | 第14-16页 |
1.3.1 组成型启动子 | 第14-15页 |
1.3.2 组织特异性启动子 | 第15页 |
1.3.3 诱导型启动子 | 第15页 |
1.3.4 双向启动子 | 第15页 |
1.3.5 可变启动子 | 第15-16页 |
1.4 启动子的克隆 | 第16-19页 |
1.4.1 基因组文库筛选法 | 第16页 |
1.4.2 启动子探针筛选法 | 第16-17页 |
1.4.3 PCR技术克隆法 | 第17-19页 |
1.5 启动子功能分析方法 | 第19-21页 |
1.5.1 生物信息学分析法 | 第19-20页 |
1.5.2 实验分析法 | 第20-21页 |
1.6 启动子在植物基因工程中的应用 | 第21-24页 |
1.6.1 组成型启动子的应用 | 第21页 |
1.6.2 组织特异性启动子的应用 | 第21-23页 |
1.6.3 诱导型启动子的应用 | 第23页 |
1.6.4 人工启动子的应用 | 第23-24页 |
1.7 立题依据 | 第24-26页 |
第二章 实验材料和方法 | 第26-34页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 植物材料、菌株和载体 | 第26页 |
2.1.2 引物设计及合成 | 第26-27页 |
2.1.3 实验试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第28页 |
2.1.5 常用溶液及培养基配方(见附录) | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-34页 |
2.2.1 转基因拟南芥的构建 | 第28-30页 |
2.2.2 转基因拟南芥的GUS组织化学染色 | 第30页 |
2.2.3 转基因拟南芥幼苗期(10d)的GUS酶活测定 | 第30页 |
2.2.4 转基因拟南芥的激素及非生物胁迫处理 | 第30-31页 |
2.2.5 OsRhoGAP2过表达转基因水稻T_2代的筛选 | 第31页 |
2.2.6 OE-OsRhoGAP2转基因水稻T_2代的鉴定 | 第31-33页 |
2.2.7 农艺学性状统计 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-46页 |
3.1 转基因拟南芥的筛选 | 第34-36页 |
3.1.1 转基因拟南芥阳性植株的初步筛选 | 第34页 |
3.1.2 转基因拟南芥的分子水平检测 | 第34-35页 |
3.1.3 转基因拟南芥纯合体的筛选 | 第35-36页 |
3.2 OsRhoGAP2启动子功能分析 | 第36-42页 |
3.2.1 OsRhoGAP2启动子的时空表达特性分析 | 第36-40页 |
3.2.2 OsRhoGAP2启动子对植物激素和非生物胁迫的响应分析 | 第40-42页 |
3.3 OsRhoGAP2过表达转基因水稻T_2代的筛选和鉴定 | 第42-43页 |
3.4 OsRhoGAP2过表达转基因水稻T_2代农艺学性状统计 | 第43-46页 |
第四章 讨论 | 第46-52页 |
4.1 长度为 1912bp的OsRhoGAP2启动子可以驱动GUS报告基因在花药中表达 | 第46页 |
4.2 OsRhoGAP2启动子上的花药特异性元件可能位于-703bp~-289 bp区域内 | 第46-47页 |
4.3 OsRhoGAP2基因的表达受IAA及高温、干旱、高盐的诱导 | 第47-48页 |
4.4 OsRhoGAP2启动子上存在着一个重要的MeJA响应元件 | 第48-49页 |
4.5 OsRhoGAP2基因的过量表达提高了水稻的有效分蘖数 | 第49-52页 |
第五章 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-64页 |
附录 | 第64-68页 |
附录A 常用溶液及培养基配方 | 第64-66页 |
附录B 常用实验操作方法 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第70-71页 |