低温促进裂壶藻DHA积累的分子机制研究
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
1.1 多不饱和脂肪酸研究进展 | 第13-18页 |
1.1.1 多不饱和脂肪酸概述 | 第13-14页 |
1.1.2 DHA概述 | 第14-15页 |
1.1.3 DHA的生理功能 | 第15-17页 |
1.1.4 DHA的生物来源 | 第17-18页 |
1.2 裂壶藻 | 第18-24页 |
1.2.1 裂壶藻概述 | 第18-19页 |
1.2.2 裂壶藻中DHA的合成途径 | 第19-22页 |
1.2.3 温度对裂壶藻DHA积累的影响 | 第22-23页 |
1.2.4 裂壶藻基因工程的研究 | 第23-24页 |
1.3 高通量测序概述 | 第24-25页 |
1.3.1 转录组测序技术 | 第24页 |
1.3.2 转录组学的研究 | 第24-25页 |
1.4 本研究的目的和内容 | 第25-27页 |
1.4.1 研究目的 | 第25-26页 |
1.4.2 研究内容 | 第26-27页 |
第二章 裂壶藻低温积累DHA的研究 | 第27-42页 |
2.1 材料 | 第27-28页 |
2.1.1 菌种 | 第27页 |
2.1.2 菌种保藏 | 第27页 |
2.1.3 培养基和方法 | 第27页 |
2.1.4 主要实验试剂及其配制 | 第27-28页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第28页 |
2.2 裂壶藻的生长曲线绘制 | 第28-29页 |
2.2.1 实验方法 | 第28页 |
2.2.2 结果与分析 | 第28-29页 |
2.3 裂壶藻的抗性研究 | 第29-34页 |
2.3.1 实验方法 | 第29-30页 |
2.3.2 结果与分析 | 第30-34页 |
2.4 裂壶藻生长过程葡萄糖的消耗 | 第34-36页 |
2.4.1 试剂盒原理 | 第34页 |
2.4.2 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第34页 |
2.4.3 培养基中葡萄糖浓度的测定 | 第34页 |
2.4.4 结果与分析 | 第34-36页 |
2.5 不同温度下裂壶藻DHA含量检测 | 第36-40页 |
2.5.1 裂壶藻生物量测定 | 第36页 |
2.5.2 裂壶藻总脂含量测定 | 第36页 |
2.5.3 脂肪酸甲酯化 | 第36页 |
2.5.4 气相色谱检测DHA含量 | 第36-37页 |
2.5.5 结果与分析 | 第37-40页 |
2.6 本章小结 | 第40-42页 |
第三章 温度对裂壶藻基因转录的影响 | 第42-77页 |
3.1 裂壶藻转录组测序分析 | 第42-66页 |
3.1.1 材料与方法 | 第42-49页 |
3.1.2 结果与分析 | 第49-66页 |
3.2 Q-PCR验证差异基因表达 | 第66-74页 |
3.2.1 材料与方法 | 第66-69页 |
3.2.2 结果与分析 | 第69-74页 |
3.3 本章小结 | 第74-77页 |
第四章 钙调素在裂壶藻DHA积累的功能验证 | 第77-84页 |
4.1 材料与方法 | 第77-82页 |
4.1.1 菌株和载体 | 第77页 |
4.1.2 主要试剂及其配制 | 第77页 |
4.1.3 主要仪器 | 第77页 |
4.1.4 提取裂壶藻基因组 | 第77-78页 |
4.1.5 扩增同源片段 | 第78-81页 |
4.1.6 质粒pGAPZ提取 | 第81页 |
4.1.7 片段Ble-cassette扩增 | 第81-82页 |
4.1.8 裂壶藻电转感受态细胞制备 | 第82页 |
4.2 结果与分析 | 第82-83页 |
4.2.1 片段4632HR扩增 | 第82-83页 |
4.2.2 片段Ble-cassette扩增 | 第83页 |
4.3 本章小结 | 第83-84页 |
第五章 展望 | 第84-85页 |
附录 | 第85-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
致谢 | 第98-99页 |