摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
符号说明 | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
一. 自噬概述 | 第11-14页 |
1. 自噬分类及特征 | 第11-12页 |
2. 自噬相关基因 | 第12-13页 |
3. 自噬发生过程和检测方法 | 第13-14页 |
二.自噬在昆虫变态发育过程中的作用 | 第14-17页 |
1. 自噬在昆虫中的研究进展 | 第14-15页 |
2. 蜕皮激素与细胞自噬 | 第15-16页 |
3. 自噬与凋亡的关系 | 第16-17页 |
三. 论文科学问题和方案 | 第17-19页 |
第二章 Atg4B基因在棉铃虫蜕皮变态中的功能研究 | 第19-47页 |
一. 引言 | 第19页 |
二. 实验材料与方法 | 第19-30页 |
1. 实验材料 | 第19-20页 |
2. 实验方法 | 第20-30页 |
2.1 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
2.2 基因克隆与分析 | 第21-24页 |
2.3 反转录RT-PCR和实时荧光定量qRT-PCR | 第24页 |
2.4 原核重组表达与蛋白纯化 | 第24-27页 |
2.5 Western blot | 第27-28页 |
2.6 蜕皮激素处理方法 | 第28页 |
2.7 干扰实验 | 第28-29页 |
2.8 NucView 488 Casepase-3活性检测 | 第29页 |
2.9 RFP-TAT-LC3穿膜蛋白的构建 | 第29-30页 |
三.实验结果 | 第30-43页 |
1. Atg4B基因克隆及生物信息学序列分析 | 第30-34页 |
2. Atg4B Peptidase_C54结构域原核重组表达与抗体制备 | 第34页 |
3. 蜕皮激素20E诱导Atg4B在棉铃虫蜕皮和变态期高表达 | 第34-37页 |
4. 干扰Atg4B延迟棉铃虫的变态发育 | 第37-38页 |
5. 干扰Atg4B延缓棉铃虫中肠降解 | 第38-40页 |
6. 干扰Atg4B抑制Atg8前体切割 | 第40-41页 |
7. 干扰Atg4B抑制自噬体的形成和凋亡发生 | 第41-43页 |
四. 讨论 | 第43-47页 |
4.1 自噬在细胞死亡中的功能 | 第43-44页 |
4.2 自噬先于凋亡发生 | 第44页 |
4.3 蜕皮激素滴度与自噬 | 第44-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
创新点总结及意义 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
附件 | 第56页 |