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自噬相关蛋白4B(Atg4B)在棉铃虫生长发育中的功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
符号说明第9-11页
第一章 前言第11-19页
    一. 自噬概述第11-14页
        1. 自噬分类及特征第11-12页
        2. 自噬相关基因第12-13页
        3. 自噬发生过程和检测方法第13-14页
    二.自噬在昆虫变态发育过程中的作用第14-17页
        1. 自噬在昆虫中的研究进展第14-15页
        2. 蜕皮激素与细胞自噬第15-16页
        3. 自噬与凋亡的关系第16-17页
    三. 论文科学问题和方案第17-19页
第二章 Atg4B基因在棉铃虫蜕皮变态中的功能研究第19-47页
    一. 引言第19页
    二. 实验材料与方法第19-30页
        1. 实验材料第19-20页
        2. 实验方法第20-30页
            2.1 总RNA的提取和cDNA第一链的合成第20-21页
            2.2 基因克隆与分析第21-24页
            2.3 反转录RT-PCR和实时荧光定量qRT-PCR第24页
            2.4 原核重组表达与蛋白纯化第24-27页
            2.5 Western blot第27-28页
            2.6 蜕皮激素处理方法第28页
            2.7 干扰实验第28-29页
            2.8 NucView 488 Casepase-3活性检测第29页
            2.9 RFP-TAT-LC3穿膜蛋白的构建第29-30页
    三.实验结果第30-43页
        1. Atg4B基因克隆及生物信息学序列分析第30-34页
        2. Atg4B Peptidase_C54结构域原核重组表达与抗体制备第34页
        3. 蜕皮激素20E诱导Atg4B在棉铃虫蜕皮和变态期高表达第34-37页
        4. 干扰Atg4B延迟棉铃虫的变态发育第37-38页
        5. 干扰Atg4B延缓棉铃虫中肠降解第38-40页
        6. 干扰Atg4B抑制Atg8前体切割第40-41页
        7. 干扰Atg4B抑制自噬体的形成和凋亡发生第41-43页
    四. 讨论第43-47页
        4.1 自噬在细胞死亡中的功能第43-44页
        4.2 自噬先于凋亡发生第44页
        4.3 蜕皮激素滴度与自噬第44-47页
参考文献第47-53页
创新点总结及意义第53-55页
致谢第55-56页
附件第56页

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