摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1 鲤春病毒血症病毒研究进展 | 第14-15页 |
2 水霉菌及水霉病研究进展 | 第15-16页 |
3 氧化应激及其研究进展 | 第16-19页 |
4 氧化应激与病毒感染 | 第19-21页 |
5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 鲤春病毒血症病毒诱导氧化应激发生的研究 | 第22-57页 |
1 材料与方法 | 第22-42页 |
1.1 实验材料 | 第22-24页 |
1.1.1 细胞与病毒 | 第22页 |
1.1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
1.1.3 实验仪器设备 | 第23-24页 |
1.2 实验方法 | 第24-41页 |
1.2.1 MTT法测定H2O2毒性 | 第24页 |
1.2.2 病毒感染 | 第24-25页 |
1.2.3 细胞裂解样品收集 | 第25页 |
1.2.4 细胞裂解样品蛋白浓度测定 | 第25页 |
1.2.5 化学荧光法测定活性氧ROS水平 | 第25-26页 |
1.2.6 DNPH比色法测定蛋白质羰基含量 | 第26-27页 |
1.2.7 双抗体夹心ELISA法测定8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平 | 第27-29页 |
1.2.8 TBA法测定脂质过氧化物-丙二醛含量 | 第29-30页 |
1.2.9 FRAP法测定T-AOC | 第30-32页 |
1.2.10 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第32-34页 |
1.2.11 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第34-35页 |
1.2.12 谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)活性测定 | 第35-37页 |
1.2.13 还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定 | 第37-38页 |
1.2.14 实时荧光定量分析 | 第38-41页 |
1.2.14.1 细胞总RNA的提取 | 第39页 |
1.2.14.2 反转录 | 第39-40页 |
1.2.14.3 Real-time PCR | 第40-41页 |
1.2.15 H2O2预处理EPC细胞后的病毒感染及SVCV病毒G基因的定量检测 | 第41页 |
1.3 统计分析 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-53页 |
2.1 MTT法测定H2O2毒性 | 第42页 |
2.2 H2O2刺激后EPC细胞氧化应激指标的测定 | 第42-43页 |
2.3 SVCV感染EPC细胞后氧化水平指标测定 | 第43-46页 |
2.4 SVCV感染EPC细胞后抗氧化水平指标测定 | 第46-49页 |
2.5 SVCV感染后EPC细胞的抗氧化酶基因的转录分析 | 第49-51页 |
2.6 SVCV感染EPC细胞后ROS/T-AOC分析 | 第51-52页 |
2.7 500μM H2O2刺激EPC细胞 2h后活性氧自由基水平测定 | 第52页 |
2.8 H2O2预处理后SVCV感染G基因的定量检测 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-57页 |
第三章 水霉菌感染鲤诱导氧化应激发生的研究 | 第57-64页 |
1 材料与方法 | 第57-59页 |
1.1 实验材料 | 第57-58页 |
1.1.1 实验动物 | 第57页 |
1.1.2 实验主要试剂 | 第57-58页 |
1.1.3 实验仪器设备 | 第58页 |
1.2 实验方法 | 第58-59页 |
1.2.1 患病鲤体表水霉菌丝的显微观察 | 第58页 |
1.2.2 患水霉病鲤和健康鲤血浆氧化应激指标的测定 | 第58页 |
1.2.3 患病鲤的组织病理学分析 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-61页 |
2.1 患病鲤体表水霉菌丝体的形态观察 | 第59页 |
2.2 患水霉病鲤和健康鲤血浆氧化应激指标的测定 | 第59-60页 |
2.3 组织病理学观察 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-75页 |
附表:硕士期间发表的论文 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |