| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-19页 |
| 1.1 本课题的研究目的及意义 | 第13页 |
| 1.2 家蚕基因启动子研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 启动子研究方法的概况 | 第15-16页 |
| 1.4 动物孵化酶基因研究进展 | 第16页 |
| 1.4.1 虾红素家族动物蛋白酶 | 第16页 |
| 1.4.2 孵化酶基因的时间和空间表达 | 第16页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第16-19页 |
| 第2章 家蚕BmHEⅠp和BmHEⅡp的克隆及生物信息学分析 | 第19-37页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料与实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 实验材料与实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.2 常用试剂和缓冲液的配制 | 第20-22页 |
| 2.2.3 主要的实验仪器 | 第22页 |
| 2.2.4 生物信息学分析软件 | 第22-23页 |
| 2.2.5 基因组DNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.6 引物设计 | 第23页 |
| 2.2.7 启动子BmHEⅠp与BmHEⅡp的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.8 PCR验证 | 第24页 |
| 2.2.9 琼脂糖凝胶的制备与电泳 | 第24-26页 |
| 2.2.10 利用玻璃奶对DNA进行回收 | 第26页 |
| 2.2.11 连接反应 | 第26页 |
| 2.2.12 质粒DNA的转化 | 第26-27页 |
| 2.2.13 碱裂解法少量提取质粒DNA | 第27-28页 |
| 2.2.14 重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第28页 |
| 2.2.15 甘油菌的制备及序列测定 | 第28页 |
| 2.2.16 BmHEⅠp与BmHEⅡp的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 2.3.1 家蚕基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.3.2 启动子BmHEⅠp与BmHEⅡp的克隆与鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 启动子BmHEⅠp与BmHEⅡp的生物信息学分析 | 第30-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 BmHEⅠp和BmHEⅡp四个候选转录因子结合位点的EMSA分析 | 第37-51页 |
| 3.1 引言 | 第37-38页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.2.2 核蛋白抽提 | 第38页 |
| 3.2.3 SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第38-39页 |
| 3.2.4 核蛋白浓度的测定 | 第39页 |
| 3.2.5 探针的制备 | 第39页 |
| 3.2.6 核蛋白与探针的结合反应 | 第39-40页 |
| 3.2.7 电泳和荧光显色 | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-50页 |
| 3.3.1 核蛋白的抽提 | 第40页 |
| 3.3.2 探针标记 | 第40页 |
| 3.3.3 家蚕中肠核蛋白与BmHEⅠp的凝胶迁移阻滞分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 家蚕精巢核蛋白与BmHEⅡp的凝胶迁移阻滞分析 | 第41页 |
| 3.3.5 家蚕蚕卵胚胎核蛋白与BmHEⅠp与BmHEⅡp的凝胶迁移阻滞分析 | 第41-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第4章 BmHEⅠp与BmHEⅡp上特异性结合转录因子的鉴定 | 第51-59页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 材料与方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 实验样品 | 第51-52页 |
| 4.2.2 仪器 | 第52页 |
| 4.2.3 胶内酶解 | 第52页 |
| 4.2.4 毛细管高效液相色谱方法 | 第52页 |
| 4.2.5 质谱数据采集 | 第52页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第52-53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57页 |
| 4.5 本章总结 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的论文 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 详细摘要 | 第68-72页 |
