中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语 | 第14-15页 |
前言 | 第15-18页 |
研究现状、成果 | 第15-17页 |
研究目的、方法 | 第17-18页 |
一、人肺肉瘤样癌呈现EMT表型、TGF-β1 阳性表达及VM的形成 | 第18-30页 |
1.1 对象和方法 | 第18-21页 |
1.1.1 病例来源及特征 | 第18页 |
1.1.2 临床病理资料 | 第18页 |
1.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
1.1.4 主要试剂 | 第19页 |
1.1.4.1 免疫组化染色一抗、二抗试剂 | 第19页 |
1.1.4.2 其他试剂 | 第19页 |
1.1.5 实验方法 | 第19-21页 |
1.1.5.1 免疫组织化学染色 | 第19-20页 |
1.1.5.2 CD31和PAS双重染色方法 | 第20-21页 |
1.1.6 计数方法 | 第21页 |
1.1.6.1 VM的定义 | 第21页 |
1.1.6.2 肿瘤细胞的染色指数 | 第21页 |
1.1.7 统计学方法 | 第21页 |
1.2 结果 | 第21-28页 |
1.2.1 肺肉瘤样癌、肺鳞癌的EMT相关蛋白的表达情况 | 第21-22页 |
1.2.2 肺肉瘤样癌、肺鳞癌中TGF-β1 的表达及与Twist1的关系 | 第22-26页 |
1.2.3 TGF-β1 与41例肺肉瘤样癌患者预后之间的关系 | 第26-27页 |
1.2.4 在肺肉瘤样癌中,与VM形成密切相关的蛋白VE-cadherin、基质金属蛋白酶MMP-2 的表达 | 第27-28页 |
1.3 讨论 | 第28-29页 |
1.3.1 肺肉瘤样癌、肺鳞癌中发生了EMT及TGF-β1 与转录因子Twist1的关系 | 第28页 |
1.3.2 肺肉瘤样癌中血管生成拟态存在的意义 | 第28-29页 |
1.3.3 TGF-β1 诱导肺肉瘤样癌发生EMT可能是促进血管生成拟态形成的关键环节之一 | 第29页 |
1.4 小结 | 第29-30页 |
二、TGF-β1 诱导肺鳞癌细胞促进VM的形成及对肺鳞癌细胞运动能力的影响 | 第30-41页 |
2.1 对象和方法 | 第30-34页 |
2.1.1 细胞系和培养方法 | 第30-31页 |
2.1.1.1 细胞系 | 第30页 |
2.1.1.2 肺鳞癌细胞的培养方法TGF-β1 诱导培养及细胞分组 | 第30-31页 |
2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
2.1.4 TGF-β1 诱导肺鳞癌细胞SK-MES-1,构建EMT发生微环境 | 第32-33页 |
2.1.4.1 TGF-β1 诱导EMT发生环境的机制 | 第32页 |
2.1.4.2 TGF-β1 诱导EMT发生环境的构建 | 第32-33页 |
2.1.5 Transwell小室体外侵袭实验 | 第33页 |
2.1.5.1 侵袭实验原理 | 第33页 |
2.1.5.2 侵袭实验方法 | 第33页 |
2.1.6 体外划痕实验 | 第33页 |
2.1.7 胶上培养(On-Gel Culture)构建体外Matrigel三维培养模型 | 第33-34页 |
2.2 结果 | 第34-39页 |
2.2.1 TGF-β1 诱导对肺鳞癌细胞侵袭能力的影响 | 第34-36页 |
2.2.2 TGF-β1 诱导对肺鳞癌细胞的迁移能力的影响 | 第36-38页 |
2.2.3 胶上培养 | 第38-39页 |
2.3 讨论 | 第39-40页 |
2.3.1 TGF-β1 诱导促进了肺鳞癌细胞的迁移性和侵袭性 | 第39-40页 |
2.3.2 TGF-β1 诱导与体外肿瘤细胞血管生成拟态的形成 | 第40页 |
2.4 小结 | 第40-41页 |
三、TGF-β1 诱导肺鳞癌细胞EMT发生、促进VM形成 | 第41-53页 |
3.1 对象和方法 | 第41-49页 |
3.1.1 细胞系和培养条件 | 第41页 |
3.1.2 主要试剂及抗体 | 第41-42页 |
3.1.3 主要仪器 | 第42-43页 |
3.1.4 主要溶液的配置 | 第43-44页 |
3.1.5 细胞免疫荧光分析 | 第44-45页 |
3.1.6 Western Blotting | 第45-46页 |
3.1.7 RT-PCR | 第46-48页 |
3.1.8 明胶酶谱 | 第48-49页 |
3.2 结果 | 第49-51页 |
3.2.1 TGF-β1 的诱导使肺鳞癌细胞在蛋白质和mRNA水平上发生了EMT样表型的转变 | 第49-50页 |
3.2.2 TGF-β1 的诱导对肺鳞癌细胞中MMP-2 活性的影响 | 第50页 |
3.2.3 细胞免疫荧光结果证实经过TGF-β1 诱导后的肺鳞癌细胞出现了E-cadherin低表达、Vimentin高表达 | 第50-51页 |
3.3 讨论 | 第51-52页 |
3.3.1 TGF-β1 诱导后的肺鳞癌细胞,VE-cadherin高表达,说明TGF-β1 促进了VM在肺鳞癌细胞中的形成 | 第51-52页 |
3.3.2 TGF-β1 能够使肺鳞癌细胞中MMP-2 的表达和活性提高 | 第52页 |
3.3.3 诱导后的肺鳞癌细胞形态发生改变的同时,也发生EMT的变化 | 第52页 |
3.4 小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第60-61页 |
综述 | 第61-68页 |
综述参考文献 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-69页 |