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TGF-β1促进肺鳞癌及肺肉瘤样癌EMT、VM形成的研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语第14-15页
前言第15-18页
    研究现状、成果第15-17页
    研究目的、方法第17-18页
一、人肺肉瘤样癌呈现EMT表型、TGF-β1 阳性表达及VM的形成第18-30页
    1.1 对象和方法第18-21页
        1.1.1 病例来源及特征第18页
        1.1.2 临床病理资料第18页
        1.1.3 主要仪器第18-19页
        1.1.4 主要试剂第19页
            1.1.4.1 免疫组化染色一抗、二抗试剂第19页
            1.1.4.2 其他试剂第19页
        1.1.5 实验方法第19-21页
            1.1.5.1 免疫组织化学染色第19-20页
            1.1.5.2 CD31和PAS双重染色方法第20-21页
        1.1.6 计数方法第21页
            1.1.6.1 VM的定义第21页
            1.1.6.2 肿瘤细胞的染色指数第21页
        1.1.7 统计学方法第21页
    1.2 结果第21-28页
        1.2.1 肺肉瘤样癌、肺鳞癌的EMT相关蛋白的表达情况第21-22页
        1.2.2 肺肉瘤样癌、肺鳞癌中TGF-β1 的表达及与Twist1的关系第22-26页
        1.2.3 TGF-β1 与41例肺肉瘤样癌患者预后之间的关系第26-27页
        1.2.4 在肺肉瘤样癌中,与VM形成密切相关的蛋白VE-cadherin、基质金属蛋白酶MMP-2 的表达第27-28页
    1.3 讨论第28-29页
        1.3.1 肺肉瘤样癌、肺鳞癌中发生了EMT及TGF-β1 与转录因子Twist1的关系第28页
        1.3.2 肺肉瘤样癌中血管生成拟态存在的意义第28-29页
        1.3.3 TGF-β1 诱导肺肉瘤样癌发生EMT可能是促进血管生成拟态形成的关键环节之一第29页
    1.4 小结第29-30页
二、TGF-β1 诱导肺鳞癌细胞促进VM的形成及对肺鳞癌细胞运动能力的影响第30-41页
    2.1 对象和方法第30-34页
        2.1.1 细胞系和培养方法第30-31页
            2.1.1.1 细胞系第30页
            2.1.1.2 肺鳞癌细胞的培养方法TGF-β1 诱导培养及细胞分组第30-31页
        2.1.2 主要试剂第31-32页
        2.1.3 主要仪器第32页
        2.1.4 TGF-β1 诱导肺鳞癌细胞SK-MES-1,构建EMT发生微环境第32-33页
            2.1.4.1 TGF-β1 诱导EMT发生环境的机制第32页
            2.1.4.2 TGF-β1 诱导EMT发生环境的构建第32-33页
        2.1.5 Transwell小室体外侵袭实验第33页
            2.1.5.1 侵袭实验原理第33页
            2.1.5.2 侵袭实验方法第33页
        2.1.6 体外划痕实验第33页
        2.1.7 胶上培养(On-Gel Culture)构建体外Matrigel三维培养模型第33-34页
    2.2 结果第34-39页
        2.2.1 TGF-β1 诱导对肺鳞癌细胞侵袭能力的影响第34-36页
        2.2.2 TGF-β1 诱导对肺鳞癌细胞的迁移能力的影响第36-38页
        2.2.3 胶上培养第38-39页
    2.3 讨论第39-40页
        2.3.1 TGF-β1 诱导促进了肺鳞癌细胞的迁移性和侵袭性第39-40页
        2.3.2 TGF-β1 诱导与体外肿瘤细胞血管生成拟态的形成第40页
    2.4 小结第40-41页
三、TGF-β1 诱导肺鳞癌细胞EMT发生、促进VM形成第41-53页
    3.1 对象和方法第41-49页
        3.1.1 细胞系和培养条件第41页
        3.1.2 主要试剂及抗体第41-42页
        3.1.3 主要仪器第42-43页
        3.1.4 主要溶液的配置第43-44页
        3.1.5 细胞免疫荧光分析第44-45页
        3.1.6 Western Blotting第45-46页
        3.1.7 RT-PCR第46-48页
        3.1.8 明胶酶谱第48-49页
    3.2 结果第49-51页
        3.2.1 TGF-β1 的诱导使肺鳞癌细胞在蛋白质和mRNA水平上发生了EMT样表型的转变第49-50页
        3.2.2 TGF-β1 的诱导对肺鳞癌细胞中MMP-2 活性的影响第50页
        3.2.3 细胞免疫荧光结果证实经过TGF-β1 诱导后的肺鳞癌细胞出现了E-cadherin低表达、Vimentin高表达第50-51页
    3.3 讨论第51-52页
        3.3.1 TGF-β1 诱导后的肺鳞癌细胞,VE-cadherin高表达,说明TGF-β1 促进了VM在肺鳞癌细胞中的形成第51-52页
        3.3.2 TGF-β1 能够使肺鳞癌细胞中MMP-2 的表达和活性提高第52页
        3.3.3 诱导后的肺鳞癌细胞形态发生改变的同时,也发生EMT的变化第52页
    3.4 小结第52-53页
结论第53-55页
参考文献第55-60页
发表论文和参加科研情况说明第60-61页
综述第61-68页
    综述参考文献第65-68页
致谢第68-69页

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