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奶山羊PPARG及其靶基因在乳腺脂肪酸代谢中的功能研究

摘要第6-8页
英文摘要第8-10页
第一章 文献综述第14-24页
    1.1 乳脂的特点第14页
    1.2 山羊乳脂和奶牛的区别第14-15页
    1.3 山羊乳脂肪酸组成第15-16页
    1.4 长链脂肪酸的研究进展第16-18页
        1.4.1 饱和脂肪酸的研究进展第16-18页
        1.4.2 不饱和脂肪酸的研究进展第18页
    1.5 PPARG的研究进展第18-20页
        1.5.1 PPARG能够控制脂肪生成和脂代谢第18-20页
        1.5.2 PPARG能够调控脂代谢基因的网络通路第20页
    1.6 其它转录因子的研究进展第20-22页
        1.6.1 LXRA在脂质代谢中的作用第20-21页
        1.6.2 SREBF1在脂质代谢中的作用第21-22页
    1.7 ADIPOR1和LPL基因的研究进展第22-23页
    1.8 本研究的目的与意义第23-24页
第二章 长链脂肪酸通过PPARG对脂代谢相关基因表达的影响第24-41页
    2.1 材料与方法第24-31页
        2.1.1 主要试剂第24-25页
        2.1.2 主要仪器第25页
        2.1.3 长链脂肪酸、ROSI和GW9662以及GG和T09的制备第25页
        2.1.4 细胞培养与处理第25-26页
        2.1.5 RNA提取和质量检测第26-29页
        2.1.6 cDNA第一链的合成第29-30页
        2.1.7 引物设计和RT-qPCR第30页
        2.1.8 数据处理第30-31页
    2.2 结果第31-38页
        2.2.1 长链脂肪酸通过PPARG对脂肪酸代谢相关基因的mRNA表达影响第31-35页
        2.2.2 LXRA对脂肪酸代谢相关基因的影响第35-38页
    2.3 讨论第38-40页
        2.3.1 PPARG调控乳腺脂肪生成相关基因网络第38-39页
        2.3.2 长链脂肪酸通过PPARG调控乳腺脂肪生成相关基因第39-40页
    2.4 本章小结第40-41页
第三章 PPARG在山羊乳腺上皮细胞中的过表达研究及其靶基因的筛选第41-51页
    3.1 材料与方法第41-43页
        3.1.1 主要试剂第41页
        3.1.2 主要仪器第41-42页
        3.1.3 重组腺病毒载体构建第42页
        3.1.4 超表达病毒Ad-PPARG包装、扩增第42页
        3.1.5 细胞培养与处理第42页
        3.1.6 RNA提取和质量检测第42页
        3.1.7 cDNA第一链的合成第42页
        3.1.8 引物设计和RT-qPCR第42-43页
        3.1.9 数据处理第43页
    3.2 结果第43-48页
        3.2.1 超表达PPARG影响了脂肪酸合成,去饱和化,三酰甘油合成以及脂滴形成相关基因的mRNA表达第43-46页
        3.2.2 超表达PPARG影响了生物钟相关基因的mRNA表达第46-47页
        3.2.3 超表达PPARG影响了转录调控相关基因的mRNA表达第47-48页
    3.3 讨论第48-50页
        3.3.1 超表达PPARG影响了脂肪酸合成,去饱和化,三酰甘油合成以及脂滴形成相关基因的mRNA表达第48页
        3.3.2 超表达PPARG对生物钟相关基因mRNA表达的影响第48-49页
        3.3.3 超表达PPARG对转录调控相关基因mRNA表达的影响第49页
        3.3.4 PPARG的下游靶基因AdipoR1和LPL的确定第49-50页
    3.4 本章小结第50-51页
第四章 ADIPOR1在乳腺上皮细胞上的表达调控研究第51-61页
    4.1 材料和方法第51-54页
        4.1.1 实验样品第51页
        4.1.2 主要试剂第51-52页
        4.1.3 引物设计第52页
        4.1.4 总RNA提取,cDNA合成以及实时定量第52页
        4.1.5 AdipoR1基因cDNA全长的克隆第52页
        4.1.6 AdipoR1的生物信息学分析第52-53页
        4.1.7 细胞的处理及siRNA的设计第53页
        4.1.8 AdipoR1在各组织中的表达量第53-54页
        4.1.9 数据处理与分析第54页
    4.2 结果第54-58页
        4.2.1 山羊AdipoR1基因序列全长的克隆第54-55页
        4.2.2 山羊AdipoR1的同源性分析第55页
        4.2.3 山羊AdipoR1的结构分析第55-56页
        4.2.4 AdipoR1在不同组织和泌乳时期的表达分析第56页
        4.2.5 奶山羊乳腺上皮细胞中添加胰岛素和催乳素对AdipoR1表达的影响第56-57页
        4.2.6 AdipoR1干扰后对奶山羊乳腺上皮细胞脂肪酸代谢基因的影响第57-58页
    4.3 讨论第58-60页
        4.3.1 AdipoR1基因在不同组织和泌乳时期的表达第58-59页
        4.3.2 胰岛素和催乳素对AdipoR1基因的调控第59页
        4.3.3 AdipoR1干扰对脂肪酸代谢相关基因表达的影响第59-60页
    4.4 本章小结第60-61页
第五章 LPL的组织表达及在山羊乳腺上皮细胞中对脂肪酸合成相关基因的影响第61-70页
    5.1 材料和方法第61-64页
        5.1.1 实验动物和样品采集第61页
        5.1.2 主要试剂第61-62页
        5.1.3 LPL基因的克隆,序列分析和组织表达第62-63页
        5.1.4 表达和统计分析第63页
        5.1.5 Orlistat和LPL干扰在山羊乳腺上皮细胞中对乳脂合成相关基因的影响第63-64页
    5.2 结果第64-68页
        5.2.1 LPL的克隆和序列分析第64-65页
        5.2.2 LPL蛋白系统进化树的构建第65页
        5.2.3 LPL基因在10个组织和两个泌乳阶段的mRNA表达第65-67页
        5.2.4 LPL干扰和Orlistat处理在山羊乳腺上皮细胞中影响了乳脂合成相关基因的表达第67-68页
    5.3 讨论第68-69页
        5.3.1 LPL基因在10个不同组织和两个不同泌乳时期的表达第68页
        5.3.2 在山羊乳腺上皮细胞中干扰LPL基因和添加Orlistat对乳脂合成相关基因的影响第68-69页
    5.4 本章小结第69-70页
结论第70-71页
本研究的创新点第71-72页
存在问题及展望第72-73页
参考文献第73-82页
附录第82-90页
缩略词表第90-94页
致谢第94-96页
作者简介第96页

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