| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因启动子的研究概述 | 第11-12页 |
| 1.2 启动子的结构和功能概述 | 第12-18页 |
| 1.2.1 启动子的结构和功能 | 第12页 |
| 1.2.2 转录起始位点 | 第12-13页 |
| 1.2.3 核心启动子 | 第13页 |
| 1.2.4 启动子的分类 | 第13-15页 |
| 1.2.4.1 组成型启动子 | 第13-14页 |
| 1.2.4.2 组织特异性启动子 | 第14页 |
| 1.2.4.3 诱导型启动子 | 第14页 |
| 1.2.4.4 双向启动子 | 第14-15页 |
| 1.2.4.5 可变启动子 | 第15页 |
| 1.2.5 启动子的研究技术和方法 | 第15-16页 |
| 1.2.6 瞬时表达的研究方法和进展 | 第16-18页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 ‘富平楸子’S6PDHp克隆及其在烟草叶片中的瞬时表达 | 第19-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌种及质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 酶及化学试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 引物 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 核酸的提取 | 第20页 |
| 2.2.2 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因启动子（S6.PDHp）及其缺失体的克隆 | 第20-21页 |
| 2.2.2.1 S6PDHp基因全序列的克隆与分析 | 第20页 |
| 2.2.2.2 克隆S6PDH基因启动子 5’端各个缺失体 | 第20-21页 |
| 2.2.3 缺失体与GUS.基因融合瞬时表达载体的构建 | 第21页 |
| 2.2.4 农杆菌介导的启动子缺失体与GUS基因融合载体在烟草中的瞬时表达 | 第21-22页 |
| 2.2.5 生物与非生物胁迫 | 第22页 |
| 2.2.6 GUS活性检测 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-29页 |
| 2.3.1‘富平楸子’DNA的提取以及‘富平楸子’S6PDH基因启动子序列克隆与分析 | 第22-25页 |
| 2.3.2‘富平楸子’S6PDHp各个缺失体的克隆以及瞬时表达载体的构建与鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3.3 S6PDHp各个缺失体的活性分析 | 第27-28页 |
| 2.3.4 逆境条件下S6PDHp各个缺失体的活性分析 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-32页 |
| 2.4.1 S6PDH基因启.动子 5’端缺失体的克隆 | 第29-30页 |
| 2.4.2 S6PDHp启动子缺失体的GUS融合瞬时表达载体的构建 | 第30页 |
| 2.4.3 逆境处理下S6PDHp缺失体活性分析 | 第30-32页 |
| 第三章 S6PDH基因启动子转化拟南芥研究 | 第32-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 3.1.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.2 利用Gateway技术构建S6PDHp-GUS融合表达载体 | 第33页 |
| 3.1.2.1 目的基因的获得 | 第33页 |
| 3.1.2.2 Entry载体的构建 | 第33页 |
| 3.1.2.3 表达载体的构建 | 第33页 |
| 3.1.3 拟南芥的培养 | 第33-34页 |
| 3.1.4 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第34页 |
| 3.1.5 转基因阳性植株的筛选鉴定和纯化 | 第34页 |
| 3.1.6 抗性植株的生物逆境处理 | 第34-35页 |
| 3.1.7 抗性植株逆境处理后GUS化学染色及活性分析 | 第35页 |
| 3.2 结果与分析 | 第35-41页 |
| 3.2.1 S6PDH基因启动子缺失体的克隆 | 第35-36页 |
| 3.2.2 S6PDHp N-GUS融合表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.3 拟南芥转基因阳性植株的检测与筛选 | 第37-39页 |
| 3.2.4 转基因拟南芥逆境处理后GUS化学染色及活性分析 | 第39-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-43页 |
| 3.3.1S6PDH基因启动子 5’ 端缺失体的克隆及其与GUS基因融合表达载体的构建 | 第41页 |
| 3.3.2 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第41页 |
| 3.3.3 纯合的转基因拟南芥逆境处理下启动子活性分析 | 第41-43页 |
| 第四章 苹果S6PDH基因启动子转化番茄的研究 | 第43-50页 |
| 4.1 材料和方法 | 第43页 |
| 4.1.1 材料 | 第43页 |
| 4.1.2 番茄的遗传转化及植株再生 | 第43页 |
| 4.1.3 抗性植株的PCR检测 | 第43页 |
| 4.1.4 抗性植株各组织GUS化学染色及活性分析 | 第43页 |
| 4.1.4.1 组织化学染色 | 第43页 |
| 4.1.4.2 GUS活性测定 | 第43页 |
| 4.2 结果与分析 | 第43-48页 |
| 4.2.1 农杆菌转化番茄及转基因植株的PCR检测 | 第43-46页 |
| 4.2.2 转基因植株的GUS化学染色及活性分析 | 第46-48页 |
| 4.2.2.1 GUS化学染色图 | 第46-47页 |
| 4.2.2.2 转基因番茄各组织GUS活性分析 | 第47-48页 |
| 4.3 讨论 | 第48-50页 |
| 4.3.1 启动子GUS融合表达载体转化番茄 | 第48页 |
| 4.3.2 转基因番茄各个组织GUS化学染色及其活性分析 | 第48-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 一 | 第57-58页 |
| 附录 二 | 第58-59页 |
| 附录 三 | 第59-60页 |
| 附录 四 | 第60-61页 |
| 缩略词 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
