中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
1.1 多环芳烃概述 | 第11-14页 |
1.1.1 多环芳烃的产生 | 第11页 |
1.1.2 多环芳烃的危害与污染现状 | 第11-13页 |
1.1.3 环境中多环芳烃污染的修复方法 | 第13-14页 |
1.2 微生物修复高分子量多环芳烃污染的研究 | 第14-20页 |
1.2.1 高分子量多环芳烃降解菌的筛选 | 第14-15页 |
1.2.2 高分子量多环芳烃的代谢机制研究进展 | 第15-18页 |
1.2.3 微生物降解高分子量多环芳烃的关键酶研究进展 | 第18-19页 |
1.2.4 表面活性剂对高分子量多环芳烃降解的影响 | 第19-20页 |
1.3 本研究的主要内容及其意义 | 第20-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验材料 | 第23-27页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
2.1.2 引物 | 第23-24页 |
2.1.3 试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 仪器与设备 | 第25页 |
2.1.5 培养基配制方法 | 第25-27页 |
2.2 实验操作方法 | 第27-37页 |
2.2.1 细菌基因组DNA的提取 | 第27页 |
2.2.2 DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第27-28页 |
2.2.3 DNA片段的回收纯化 | 第28页 |
2.2.4 DNA浓度和纯度紫外检测 | 第28页 |
2.2.5 聚合酶链式反应(PCR)体系 | 第28-29页 |
2.2.6 荧蒽降解菌株的分离纯化 | 第29页 |
2.2.7 细菌形态特征观察 | 第29页 |
2.2.8 细菌生理生化特征鉴定 | 第29页 |
2.2.9 菌株产表面活性剂的检测 | 第29页 |
2.2.10 抗生素敏感性的测定 | 第29-30页 |
2.2.11 温度对降解菌株生长影响的测定 | 第30页 |
2.2.12 pH对降解菌株生长影响的测定 | 第30页 |
2.2.13 16S rRNA基因扩增和系统发育分析 | 第30-31页 |
2.2.14 菌株在荧蒽条件下生长曲线的测定 | 第31页 |
2.2.15 荧蒽降解率的测定 | 第31-32页 |
2.2.16 硫酸蒽酮法测定鼠李糖脂的含量 | 第32页 |
2.2.17 降解关键酶基因的扩增 | 第32页 |
2.2.18 降解关键酶活性测定 | 第32-33页 |
2.2.19 随机转座突变体库的构建 | 第33-34页 |
2.2.20 与荧蒽降解相关的转座突变体的筛选 | 第34-35页 |
2.2.21 随机PCR | 第35-36页 |
2.2.22 转座子插入位点的确定 | 第36-37页 |
第三章 实验结果 | 第37-51页 |
3.1 荧蒽降解菌株的分离筛选 | 第37-39页 |
3.1.1 菌株形态特征及生理生化特性 | 第37-38页 |
3.1.2 菌株的16sr RNA基因序列鉴定与系统发育分析 | 第38-39页 |
3.2 菌株的生长特性 | 第39-40页 |
3.2.1 菌株最适生长温度的测定 | 第39-40页 |
3.2.2 菌株最适生长pH的测定 | 第40页 |
3.3 菌株产鼠李糖脂的能力测定 | 第40-42页 |
3.4 菌株降解荧蒽的特性 | 第42-45页 |
3.4.1 菌株在荧蒽无机盐液体培养基中的生长曲线 | 第42页 |
3.4.2 菌株DN1对荧蒽的降解能力测定 | 第42-44页 |
3.4.3 降解中邻苯二酚1,2-双加氧酶和邻苯二酚2,3-双加氧酶活性测定 | 第44-45页 |
3.5 荧蒽降解缺陷型转座突变体库的构建及筛选 | 第45-47页 |
3.5.1 转座突变体库的构建 | 第45-46页 |
3.5.2 与荧蒽降解相关的突变株的筛选 | 第46-47页 |
3.6 突变株插入基因的确定 | 第47-51页 |
结论与讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-65页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |