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一株降解荧蒽的铜绿假单胞菌的分离筛选及其降解特性研究

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第11-23页
    1.1 多环芳烃概述第11-14页
        1.1.1 多环芳烃的产生第11页
        1.1.2 多环芳烃的危害与污染现状第11-13页
        1.1.3 环境中多环芳烃污染的修复方法第13-14页
    1.2 微生物修复高分子量多环芳烃污染的研究第14-20页
        1.2.1 高分子量多环芳烃降解菌的筛选第14-15页
        1.2.2 高分子量多环芳烃的代谢机制研究进展第15-18页
        1.2.3 微生物降解高分子量多环芳烃的关键酶研究进展第18-19页
        1.2.4 表面活性剂对高分子量多环芳烃降解的影响第19-20页
    1.3 本研究的主要内容及其意义第20-23页
第二章 材料与方法第23-37页
    2.1 实验材料第23-27页
        2.1.1 菌株和质粒第23页
        2.1.2 引物第23-24页
        2.1.3 试剂第24-25页
        2.1.4 仪器与设备第25页
        2.1.5 培养基配制方法第25-27页
    2.2 实验操作方法第27-37页
        2.2.1 细菌基因组DNA的提取第27页
        2.2.2 DNA的琼脂糖凝胶电泳检测第27-28页
        2.2.3 DNA片段的回收纯化第28页
        2.2.4 DNA浓度和纯度紫外检测第28页
        2.2.5 聚合酶链式反应(PCR)体系第28-29页
        2.2.6 荧蒽降解菌株的分离纯化第29页
        2.2.7 细菌形态特征观察第29页
        2.2.8 细菌生理生化特征鉴定第29页
        2.2.9 菌株产表面活性剂的检测第29页
        2.2.10 抗生素敏感性的测定第29-30页
        2.2.11 温度对降解菌株生长影响的测定第30页
        2.2.12 pH对降解菌株生长影响的测定第30页
        2.2.13 16S rRNA基因扩增和系统发育分析第30-31页
        2.2.14 菌株在荧蒽条件下生长曲线的测定第31页
        2.2.15 荧蒽降解率的测定第31-32页
        2.2.16 硫酸蒽酮法测定鼠李糖脂的含量第32页
        2.2.17 降解关键酶基因的扩增第32页
        2.2.18 降解关键酶活性测定第32-33页
        2.2.19 随机转座突变体库的构建第33-34页
        2.2.20 与荧蒽降解相关的转座突变体的筛选第34-35页
        2.2.21 随机PCR第35-36页
        2.2.22 转座子插入位点的确定第36-37页
第三章 实验结果第37-51页
    3.1 荧蒽降解菌株的分离筛选第37-39页
        3.1.1 菌株形态特征及生理生化特性第37-38页
        3.1.2 菌株的16sr RNA基因序列鉴定与系统发育分析第38-39页
    3.2 菌株的生长特性第39-40页
        3.2.1 菌株最适生长温度的测定第39-40页
        3.2.2 菌株最适生长pH的测定第40页
    3.3 菌株产鼠李糖脂的能力测定第40-42页
    3.4 菌株降解荧蒽的特性第42-45页
        3.4.1 菌株在荧蒽无机盐液体培养基中的生长曲线第42页
        3.4.2 菌株DN1对荧蒽的降解能力测定第42-44页
        3.4.3 降解中邻苯二酚1,2-双加氧酶和邻苯二酚2,3-双加氧酶活性测定第44-45页
    3.5 荧蒽降解缺陷型转座突变体库的构建及筛选第45-47页
        3.5.1 转座突变体库的构建第45-46页
        3.5.2 与荧蒽降解相关的突变株的筛选第46-47页
    3.6 突变株插入基因的确定第47-51页
结论与讨论第51-53页
参考文献第53-65页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第65-67页
致谢第67页

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