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表达LX4型IBV流行毒株S1蛋白的重组新城疫病毒LaSota株的构建及免疫效力评价

摘要第3-5页
Summary第5-7页
主要缩略词英汉对照表第10-12页
第一章 前言第12-20页
    1.1 鸡传染性支气管炎病毒概述第12-16页
        1.1.1 鸡传染性支气管炎病毒分类和形态结构第12-13页
        1.1.2 鸡传染性支气管炎的发生概况第13页
        1.1.3 鸡传染性支气管炎病毒主要结构蛋白第13-14页
        1.1.4 鸡传染性支气管炎病毒疫苗研究进展第14-16页
    1.2 新城疫病毒概述第16-19页
        1.2.1 新城疫病原学特性第16-17页
        1.2.2 新城疫病毒基因组结构第17页
        1.2.3 新城疫的发生概况第17-18页
        1.2.4 新城疫疫苗的概述第18页
        1.2.5 新城疫病毒反向遗传操作系统的建立第18-19页
        1.2.6 新城疫病毒作为活病毒载体的应用前景第19页
    1.3 本试验研究的目的和意义第19-20页
第二章 重组病毒rLaSota-S1的构建及鉴定第20-36页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 细胞和病毒第20-21页
        2.1.2 质粒和菌株第21页
        2.1.3 SPF鸡胚和SPF鸡第21页
        2.1.4 主要试剂第21-22页
        2.1.5 主要仪器第22页
    2.2 方法第22-29页
        2.2.1 表达IBV S1蛋白全长cDNA克隆质粒的构建第22-25页
            2.2.1.1 引物合成与设计第22-23页
            2.2.1.2 辅助质粒的构建第23-24页
            2.2.1.3 重组质粒pNDV-S1的克隆与鉴定第24-25页
        2.2.2 病毒的拯救第25页
        2.2.3 病毒的纯化第25-26页
        2.2.4 重组病毒rLaSota-S1的生物学特性第26页
        2.2.5 遗传稳定性检测第26-27页
        2.2.6 间接免疫荧光观察第27页
        2.2.7 Western blot检测第27-29页
    2.3 结果第29-33页
        2.3.1 重组质粒酶切鉴定第29-30页
        2.3.2 重组病毒rLaSota-S1的生物学特性检测第30页
        2.3.3 重组病毒rLaSota-S1的遗传稳定性测序第30-31页
        2.3.4 IFA鉴定第31页
        2.3.5 Western Blot实验结果第31-33页
    2.4 讨论第33-36页
第三章 重组病毒rLaSota-S1的免疫效力评价第36-49页
    3.1 材料第36页
    3.2 方法第36-39页
        3.2.1 重组病毒rLaSota-S1一次免疫效力评价第36-39页
            3.2.1.1 血凝抑制试验检测NDV抗体第37页
            3.2.1.2 ELISA检测IBV抗体滴度第37-38页
            3.2.1.3 呼吸道排毒情况检测第38-39页
    3.3 重组病毒rLaSota-S1一次免疫试验结果第39-41页
        3.3.1 NDV攻毒组HI抗体滴度第39-40页
        3.3.2 ELISA检测IBV抗体滴度第40页
        3.3.3 呼吸道排毒情况检测第40页
        3.3.4 NDV及IBV攻毒保护试验第40-41页
    3.4 重组病毒r La Sota-S1加强免疫效力评价第41-43页
        3.4.1 ELISA检测IBV抗体滴度第42页
        3.4.2 外周血T淋巴细胞亚群检测第42-43页
        3.4.3 组织脏器病毒载量的测定第43页
        3.4.4 呼吸道排毒情况检测第43页
    3.5 加强免疫试验第43-46页
        3.5.1 ELISA检测IBV抗体水平第43-44页
        3.5.2 外周血T淋巴细胞亚群比例动态分布检测第44页
        3.5.3 组织脏器病毒载量检测第44-46页
        3.5.4 呼吸道排毒情况检测第46页
        3.5.5 加强免疫组与对照组鸡的死亡率第46页
    3.6 讨论第46-49页
全文结论第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-59页
作者简介第59-60页
导师简介第60-62页

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