| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 1. 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 胡杨离子平衡和活性氧平衡的调控机制 | 第15-17页 |
| 1.1.1 胡杨离子平衡调控机制 | 第15-17页 |
| 1.1.2 胡杨活性氧平衡调控机制 | 第17页 |
| 1.2 热激蛋白转录因子及其研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.1 HSF的结构特征 | 第18页 |
| 1.2.2 植物HSF的多样性 | 第18-20页 |
| 1.2.3 植物HSF的相互作用 | 第20页 |
| 1.2.4 植物HSF的特异性 | 第20-21页 |
| 1.3 WRKY转录因子及其研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 WRKY转录因子的结构特征 | 第21-22页 |
| 1.3.2 WRKY家族成员调控植物生物胁迫及其信号转导 | 第22页 |
| 1.3.3 WRKY家族成员调控植物非生物胁迫及其信号转导 | 第22-24页 |
| 1.4 研究思路 | 第24-25页 |
| 2. 胡杨热激蛋白转录因子PeHSF调控活性氧平衡 | 第25-49页 |
| 2.1 HSF的转录活性分析 | 第26-34页 |
| 2.1.1 实验原理 | 第26页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2.2 菌株、质粒与试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.1.3.1 胡杨PeHSF基因的克隆及生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.1.3.2 胡杨PeHSF转录激活功能验证 | 第28-30页 |
| 2.1.4 实验结果 | 第30-34页 |
| 2.1.4.1 胡杨PeHSF蛋白序列分析 | 第30-33页 |
| 2.1.4.2 胡杨PeHSF转录激活活性的验证 | 第33-34页 |
| 2.2 PEHSF耐盐性功能分析 | 第34-40页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.2.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 2.2.1.2 试剂 | 第34页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第34-35页 |
| 2.2.2.1 胡杨PeHSF过表达烟草植株的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.2.2 转基因烟草的T1代耐盐性分析 | 第35页 |
| 2.2.3 实验结果 | 第35-39页 |
| 2.2.3.1 PeHSF转基因烟草的PCR与RT-PCR鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.3.2 PeHSF转基因烟草在盐胁迫下的表型差异 | 第36-38页 |
| 2.2.3.3 PeHSF转基因烟草在盐胁迫下Na~+、K~+、Ca~(2+)浓度的变化 | 第38-39页 |
| 2.2.4 小结 | 第39-40页 |
| 2.3 盐胁迫下PEHSF调控植物活性氧平衡 | 第40-44页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第40页 |
| 2.3.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第40-41页 |
| 2.3.2.1 抗氧化酶活力的测定 | 第40-41页 |
| 2.3.2.2 抗氧化酶基因转录水平测定 | 第41页 |
| 2.3.3 实验结果 | 第41-43页 |
| 2.3.4 小结 | 第43-44页 |
| 2.4 PEHSF响应盐胁迫的信号通路 | 第44-48页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第44页 |
| 2.4.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 2.4.1.2 试剂 | 第44页 |
| 2.4.2 实验方法 | 第44-45页 |
| 2.4.2.1 RT-PCR检测HSF表达模式 | 第44页 |
| 2.4.2.2 检测烟草植株的内源H_2O_2 | 第44-45页 |
| 2.4.3 实验结果 | 第45-47页 |
| 2.4.4 小结 | 第47-48页 |
| 2.5 讨论 | 第48-49页 |
| 3. PeHSF激活PeWRKY1调控胡杨离子平衡 | 第49-95页 |
| 3.1 PEWRKY1与PCWRKY1表达模式比较 | 第51-58页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.1.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 3.1.1.2 菌株、质粒与试剂 | 第51页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 3.1.2.1 胡杨PeWRKY1灰杨PcWRKY1序列克隆及生物信息学分析 | 第51-52页 |
| 3.1.2.2 胡杨PeWRKY1灰杨PcWRKY1表达模式分析 | 第52-53页 |
| 3.1.3 实验结果 | 第53-58页 |
| 3.1.3.1 PeWRKY1和PcWRKY1生物信息学分析 | 第53-56页 |
| 3.1.3.2 PeWRKY1和PcWRKY1表达模式比较 | 第56-58页 |
| 3.2 PEWRKY1耐盐性功能分析 | 第58-65页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.2.1.1 植物材料 | 第58页 |
| 3.2.1.2 菌株、质粒与试剂 | 第58页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第58-59页 |
| 3.2.2.1 转基因烟草在盐胁迫下的表型 | 第58页 |
| 3.2.2.2 转基因烟草在盐胁迫下生理指标测定 | 第58-59页 |
| 3.2.3 实验结果 | 第59-64页 |
| 3.2.3.1 耐盐性表型分析 | 第59-61页 |
| 3.2.3.2 PeWRKY1转基因烟草在盐胁迫下的光合参数变化 | 第61页 |
| 3.2.3.3 PeWRKY1转基因植株在盐胁迫下根尖K~+、Na~+离子流的变化 | 第61-64页 |
| 3.2.4 讨论 | 第64-65页 |
| 3.3 PEWRKY1和PCWRKY1启动子分析 | 第65-72页 |
| 3.3.1 实验材料 | 第65页 |
| 3.3.1.1 植物材料 | 第65页 |
| 3.3.1.2 实验试剂与菌种 | 第65页 |
| 3.3.1.3 实验仪器 | 第65页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第65-67页 |
| 3.3.2.1 胡杨PeWRKY1和灰杨PcWRKY1启动子的克隆及生物信息学分析 | 第65页 |
| 3.3.2.2 胡杨PeWRKY1和灰杨PcWRKY1启动子表达载体的构建 | 第65-66页 |
| 3.3.2.3 PeWRKY1和PcWRKY1启动子表达差异分析 | 第66-67页 |
| 3.3.3 实验结果 | 第67-71页 |
| 3.3.3.1 PeWRKY1和PcWRKY1启动子序列生物信息学分析 | 第67-69页 |
| 3.3.3.2 PeWRKY1和PcWRKY1启动子表达差异性分析 | 第69-71页 |
| 3.3.4 小结 | 第71-72页 |
| 3.4 PEHSF和PEWRKY1亚细胞定位 | 第72-77页 |
| 3.4.1 实验材料 | 第72页 |
| 3.4.1.1 植物材料 | 第72页 |
| 3.4.1.2 载体与菌株 | 第72页 |
| 3.4.1.3 实验试剂 | 第72页 |
| 3.4.2 实验方法 | 第72-75页 |
| 3.4.2.1 定位载体的构建 | 第72-73页 |
| 3.4.2.2 基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第73-74页 |
| 3.4.2.3 PEG转化原生质体 | 第74-75页 |
| 3.4.3 实验结果 | 第75-77页 |
| 3.5 胡杨PEHSF与PEWRKY1启动子(PEWRKY1-PRO)HSE序列的相互作用 | 第77-95页 |
| 3.5.1 酵母杂交 | 第77-84页 |
| 3.5.1.1 实验原理 | 第77-78页 |
| 3.5.1.2 实验材料 | 第78-79页 |
| 3.5.1.3 实验方法 | 第79-80页 |
| 3.5.1.4 实验结果 | 第80-83页 |
| 3.5.1.5 小结 | 第83-84页 |
| 3.5.2 TRV病毒诱导基因沉默 | 第84-95页 |
| 3.5.2.1 病毒诱导基因沉默原理 | 第84-85页 |
| 3.5.2.2 实验材料 | 第85-86页 |
| 3.5.2.3 实验方法 | 第86-88页 |
| 3.5.2.4 实验结果 | 第88-94页 |
| 3.5.2.5 小结 | 第94-95页 |
| 4. 结论 | 第95-97页 |
| 5. 展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-111页 |
| 个人简介 | 第111-113页 |
| 博士在读期间成果清单 | 第113-115页 |
| 导师简介 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
