| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 纳米技术在疫苗领域的应用 | 第9-12页 |
| 1.1.1 疫苗的发展现状 | 第9页 |
| 1.1.2 常见的纳米颗粒及其特性 | 第9-10页 |
| 1.1.2.1 聚合物类纳米颗粒 | 第9页 |
| 1.1.2.2 无机纳米颗粒 | 第9页 |
| 1.1.2.3 脂质体 | 第9-10页 |
| 1.1.2.4 病毒样颗粒 | 第10页 |
| 1.1.2.5 自组装蛋白 | 第10页 |
| 1.1.2.6 乳剂型纳米颗粒 | 第10页 |
| 1.1.3 纳米粒子和抗原的相互作用 | 第10-11页 |
| 1.1.4 纳米复合型抗原与免疫系统的相互作用 | 第11-12页 |
| 1.2 铁蛋白特性及应用 | 第12-14页 |
| 1.2.1 铁蛋白 | 第12页 |
| 1.2.2 铁蛋白特性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 铁蛋白在生物医学领域的应用 | 第13-14页 |
| 1.3 猪圆环病毒2型的概述 | 第14-15页 |
| 1.3.1 PCV2相关疾病的流行情况及危害 | 第14页 |
| 1.3.2 PCV2疫苗的现状 | 第14-15页 |
| 1.4 大肠杆菌表达系统 | 第15-18页 |
| 1.4.1 复制子 | 第15-16页 |
| 1.4.2 抗性标记 | 第16页 |
| 1.4.3 启动子 | 第16页 |
| 1.4.4 pET表达系统 | 第16-17页 |
| 1.4.5 融合标签 | 第17-18页 |
| 1.5 展望 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-27页 |
| 3.1 试验材料 | 第20-22页 |
| 3.1.1 质粒与菌株 | 第20页 |
| 3.1.2 主要试剂材料 | 第20页 |
| 3.1.3 试验相关仪器设备 | 第20-21页 |
| 3.1.4 试验试剂及配制方法 | 第21-22页 |
| 3.2 试验方法 | 第22-27页 |
| 3.2.1 pET-EDA-F-Cap全质粒扩增 | 第22-23页 |
| 3.2.1.1 引物设计 | 第22页 |
| 3.2.1.2 PCR扩增 | 第22-23页 |
| 3.2.1.3 pET-EDA-F-Cap扩增产物DpnⅠ酶切 | 第23页 |
| 3.2.2 F-Cap目的片段的扩增 | 第23-24页 |
| 3.2.3 扩增后目的基因双酶切 | 第24页 |
| 3.2.4 质粒载体的双酶切处理 | 第24-25页 |
| 3.2.5 pET-tag-F-Cap重组质粒的构建 | 第25页 |
| 3.2.6 重组质粒的鉴定 | 第25页 |
| 3.2.6.1 双酶切鉴定 | 第25页 |
| 3.2.6.2 测序鉴定 | 第25页 |
| 3.2.7 重组质粒表达及重组蛋白鉴定 | 第25-26页 |
| 3.2.7.1 重组质粒的原核表达 | 第25-26页 |
| 3.2.7.2 重组蛋白SDS-PAGE电泳胶鉴定 | 第26页 |
| 3.2.7.3 重组蛋白的可溶性分析 | 第26页 |
| 3.2.8 F-Cap重组蛋白的纯化及F-Cap重组蛋白的结构分析 | 第26-27页 |
| 3.2.8.1 Tag-F-Cap重组蛋白和F-Cap重组蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 3.2.8.2 F-Cap重组蛋白的结构分析 | 第27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-32页 |
| 4.1 琼脂糖凝胶电泳分析结果 | 第27-29页 |
| 4.1.1 pET-EDA-F-Cap的全质粒扩增结果 | 第27页 |
| 4.1.2 F-Cap基因扩增结果 | 第27-28页 |
| 4.1.3 pET-tag-F-Cap重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| 4.1.3.1 双酶切鉴定 | 第28-29页 |
| 4.1.3.2 测序鉴定 | 第29页 |
| 4.2 SDS-PAGE胶电泳鉴定结果与分析 | 第29-32页 |
| 4.2.1 重组质粒的原核表达、鉴定及可溶性分析 | 第29-31页 |
| 4.2.2 可溶性蛋白的纯化和酶切后二次纯化 | 第31-32页 |
| 4.3 透射电镜观察重组蛋白F-Cap的结构 | 第32页 |
| 5 讨论与结论 | 第32-34页 |
| 5.1 讨论 | 第32-33页 |
| 5.2 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 英文摘要 | 第41-42页 |
