| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-16页 |
| 参考文献 | 第11-16页 |
| 第一部分 探讨舒林酸是否具有抗肺纤维化作用 | 第16-30页 |
| Part1 舒林酸在BLM诱导大鼠肺纤维化损伤中的作用 | 第16-25页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| 1.1 实验动物 | 第16页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第16页 |
| 1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第16-17页 |
| 2 实验方法 | 第17-22页 |
| 2.1 动物模型分组与模型制备 | 第17-18页 |
| 2.2 动物模型取材 | 第18页 |
| 2.3 石蜡切片制备 | 第18页 |
| 2.4 HE染色 | 第18-19页 |
| 2.5 Masson染色 | 第19页 |
| 2.6 羟脯氨酸检测 | 第19-20页 |
| 2.7 Western blotting检测E-cadherin、α-SMA的表达变化 | 第20-22页 |
| 3 统计分析 | 第22页 |
| 4 实验结果 | 第22-25页 |
| 4.1 HE染色观察大鼠肺组织形态改变 | 第22页 |
| 4.2 Masson染色观察大鼠肺组织的胶原表达 | 第22-23页 |
| 4.3 大鼠肺组织胶原的定量表达 | 第23页 |
| 4.4 大鼠肺组织HYP含量检测 | 第23-24页 |
| 4.5 Western blotting检测sulindac对大鼠肺组织E-cadherin、a-SMA表达影响 | 第24-25页 |
| Part2 舒林酸逆转A549细胞的EMT过程 | 第25-30页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| 1.1 细胞系 | 第25页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.1 A549细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第26页 |
| 2.2 细胞加药实验 | 第26-27页 |
| 3 统计分析 | 第27页 |
| 4 实验结果 | 第27-30页 |
| 4.1 Western blotting检测TGF-β1诱导的A549细胞E-cadherin、a-SMA表达变化 | 第27页 |
| 4.2 A549细胞sulindac干预后细胞形态学观察 | 第27-28页 |
| 4.3 Western blotting检测A549细胞sulindac干预后E-cadherin、α-SMA表达变化 | 第28-30页 |
| 第二部分 探讨舒林酸抗肺纤维化的可能机制 | 第30-53页 |
| Part1 舒林酸对肺纤维化中IFN-γ表达的影响 | 第30-36页 |
| 1 实验材料 | 第30页 |
| 1.1 实验动物 | 第30页 |
| 1.2 细胞系 | 第30页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第30页 |
| 1.4 主要仪器 | 第30页 |
| 1.5 常用试剂配制 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.1 动物模型分组与模型制备 | 第31页 |
| 2.2 动物模型取材 | 第31页 |
| 2.3 石蜡切片制备 | 第31页 |
| 2.4 免疫组化 | 第31-32页 |
| 2.5 Western blotting检测IFN-γ因子的表达变化 | 第32页 |
| 2.6 A549细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第32页 |
| 2.7 细胞加药实验 | 第32页 |
| 2.8 酶联免疫吸附实验 | 第32页 |
| 3 统计分析 | 第32页 |
| 4 实验结果 | 第32-36页 |
| 4.1 IHC观察sulindac对大鼠肺组织IFN-γ表达影响 | 第32-33页 |
| 4.2 IHC检测sulindac对大鼠肺组织IFN-γ表达影响的IOD分析 | 第33-34页 |
| 4.3 Western Blotting检测sulindac对大鼠肺组织IFN-γ表达影响 | 第34页 |
| 4.4 ELISA检测sulindac对A549细胞IFN-γ表达的影响 | 第34-36页 |
| Part2 舒林酸对IFN-γ诱导的STAT3信号通路的抑制 | 第36-40页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| 1.1 实验动物 | 第36页 |
| 1.2 细胞系 | 第36页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第36页 |
| 1.4 主要仪器 | 第36页 |
| 1.5 常用试剂配制 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.1 动物模型分组与模型制备 | 第36页 |
| 2.2 动物模型取材 | 第36页 |
| 2.3 A549细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第36-37页 |
| 2.4 细胞加药实验 | 第37页 |
| 2.5 Western blotting检测stat3、P-stat3的表达变化 | 第37页 |
| 3 统计分析 | 第37页 |
| 4 实验结果 | 第37-40页 |
| 4.1 Western Blotting检测sulindac对大鼠肺组织stat3、P-stat3表达影响 | 第37页 |
| 4.2 Western Blotting检测IFN-γ干预的A549细胞stat3、P-stat3表达改变 | 第37-38页 |
| 4.3 Western Blotting检测IFN-γ、AG490干预的A549细胞stat3、P-stat3表达改变 | 第38页 |
| 4.4 Western Blotting检测sulindac、AG490干预的A549细胞stat3、P-stat3表达改变 | 第38-40页 |
| Part3 miR-21对A549细胞的EMT的影响 | 第40-44页 |
| 1 实验材料 | 第40页 |
| 1.1 细胞系 | 第40页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第40页 |
| 1.3 主要仪器 | 第40页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-41页 |
| 2.1 A549细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第40页 |
| 2.2 miRNA化学合成 | 第40页 |
| 2.3 细胞转染实验 | 第40-41页 |
| 2.4 Western blotting检测E-cadherin、a-SMA的表达变化 | 第41页 |
| 3 统计分析 | 第41页 |
| 4 实验结果 | 第41-44页 |
| 4.1 A549细胞miR-21转染后细胞形态学观察 | 第41-42页 |
| 4.2 Western blotting检测A549细胞miR-21转染后E-cadherin、α-SMA表达变化 | 第42-44页 |
| Part4 舒林酸减弱STAT3信号通路相关miR-21的表达 | 第44-49页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| 1.1 实验动物 | 第44页 |
| 1.2 细胞系 | 第44页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第44页 |
| 1.4 主要仪器 | 第44页 |
| 1.5 常用试剂配制 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-46页 |
| 2.1 动物模型分组与模型制备 | 第44页 |
| 2.2 动物模型取材 | 第44页 |
| 2.3 A549细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第44页 |
| 2.4 细胞加药实验 | 第44-45页 |
| 2.5 组织及细胞RNA提取 | 第45页 |
| 2.6 miR-21的加尾及反转录 | 第45-46页 |
| 2.7 PCR反应 | 第46页 |
| 3 统计分析 | 第46页 |
| 4 实验结果 | 第46-49页 |
| 4.1 QRT-PCR检测sulindac对大鼠肺组织miR-21表达影响 | 第46-47页 |
| 4.2 QRT-PCR检测IFN-γ、AG490干预的A549细胞miR-21表达改变 | 第47页 |
| 4.3 QRT-PCR检测sulindac、AG490干预的A549细胞miR-21表达改变 | 第47-49页 |
| Part5 舒林酸抑制miR-21诱导的EMT | 第49-53页 |
| 1 实验材料 | 第49页 |
| 1.1 细胞系 | 第49页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第49页 |
| 1.3 主要仪器 | 第49页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-50页 |
| 2.1 A549细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第49页 |
| 2.2 细胞加药实验 | 第49页 |
| 2.3 Western blotting检测E-cadherin、a-SMA的表达变化 | 第49-50页 |
| 2.4 Immunofluorescence检测E-cadherin、a-SMA的表达变化 | 第50页 |
| 3 统计分析 | 第50页 |
| 4 实验结果 | 第50-53页 |
| 4.1 A549细胞sulindac及miR-21干预后细胞形态学观察 | 第50页 |
| 4.2 Western blotting检测A549细胞sulindac及miR-21干预后E-cadherin、α-SMA表达变化 | 第50-51页 |
| 4.3 Immunofluorescence检测A549细胞sulindac及miR-21干预后E-cadherin、α-SMA表达变化 | 第51-53页 |
| 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 文献综述 γ干扰素在特发性肺纤维化中的相关研究进展 | 第57-65页 |
| 1 IFN-γ概述 | 第58页 |
| 2 IFN-γ与IPF相关信号通路 | 第58-59页 |
| 3 IFN-γ与IPF相关miRNA表达 | 第59-60页 |
| 4 IFN-γ与IPF过程中血管再生 | 第60页 |
| 5 IFN-γ与Th1/Th2型细胞因子平衡 | 第60-61页 |
| 6 IFN-γ治疗IPF的探索 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 研究生期间发表的文章 | 第66页 |
