| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 中英文缩略词表 | 第17-20页 |
| 第1章 绪论 | 第20-46页 |
| 1 视神经萎缩 | 第20页 |
| 2 视网膜神经节细胞和视神经的易感性 | 第20-23页 |
| 2.1 解剖结构 | 第21-22页 |
| 2.2 生理特性 | 第22-23页 |
| 3 线粒体 | 第23-28页 |
| 3.1 线粒体的起源 | 第23页 |
| 3.2 线粒体的形态和结构 | 第23-24页 |
| 3.3 线粒体基因组 | 第24-25页 |
| 3.4 异质性和阈值效应 | 第25-26页 |
| 3.5 线粒体单体型 | 第26-27页 |
| 3.6 线粒体与氧化磷酸化 | 第27-28页 |
| 3.7 核基因和线粒体基因的相互作用 | 第28页 |
| 4 Leber遗传性视神经病变 | 第28-32页 |
| 4.1 概述 | 第29页 |
| 4.2 mtDNA突变与LHON | 第29-30页 |
| 4.3 mtDNA单体型与LHON | 第30页 |
| 4.4 核修饰基因在LHON发病中的作用 | 第30页 |
| 4.5 动物模型 | 第30-31页 |
| 4.6 LHON发病的分子机制 | 第31-32页 |
| 5 常染色体显性视神经萎缩 | 第32-42页 |
| 5.1 常染色体显性视神经萎缩 | 第32-34页 |
| 5.2 OPA1基因 | 第34-40页 |
| 5.3 动物模型 | 第40-42页 |
| 6 治疗策略 | 第42-44页 |
| 6.1 支持疗法 | 第42页 |
| 6.2 神经营养疗法 | 第42-43页 |
| 6.3 基因治疗 | 第43-44页 |
| 7 遗传咨询 | 第44-45页 |
| 8 展望 | 第45-46页 |
| 第2章 材料方法 | 第46-82页 |
| 1 研究对象 | 第46-47页 |
| 2 研究内容 | 第47页 |
| 3 实验仪器 | 第47-48页 |
| 4 实验方法 | 第48-82页 |
| 4.1 永生淋巴细胞系的建立 | 第48-50页 |
| 4.2 胞质杂合体的构建 | 第50-53页 |
| 4.3 突变位点的鉴定 | 第53-57页 |
| 4.4 细胞计数 | 第57-58页 |
| 4.5 mtDNA拷贝数检测 | 第58页 |
| 4.6 氧消耗速率的测定 | 第58-62页 |
| 4.7 ATP检测 | 第62-63页 |
| 4.8 ROS检测 | 第63-64页 |
| 4.9 线粒体膜电位测定 | 第64-65页 |
| 4.10 Annexin V-FITC/PI双染法检测早期细胞凋亡 | 第65-66页 |
| 4.11 蛋白质免疫印迹 | 第66-73页 |
| 4.12 线粒体的提取 | 第73页 |
| 4.13 酶活力测定 | 第73-76页 |
| 4.14 RNA提取方法(Trizol法) | 第76-77页 |
| 4.15 实例荧光定量PCR(QRT-PCR) | 第77-79页 |
| 4.16 透射电镜样品的制备 | 第79-80页 |
| 4.17 生物信息学分析 | 第80-82页 |
| 第3章 线粒体单体型影响携带m.14484T>C(MT-ND6)中国Leber遗传性视神经病变家系的表型表达 | 第82-95页 |
| 1 研究背景 | 第82-84页 |
| 1.1 MT-ND6基因与LHON | 第82-84页 |
| 1.2 线粒体单体型和LHON | 第84页 |
| 2 材料方法 | 第84页 |
| 3 研究结果 | 第84-92页 |
| 3.1 中国LHON家系m.14484T>C(MT-ND6)突变筛查 | 第84-86页 |
| 3.2 27个携带m.14484T>C家系的临床和遗传学评估 | 第86-88页 |
| 3.3 线粒体基因组分析 | 第88-89页 |
| 3.4 携带m.14484T>C突变mtDNAs的系统进化树和单体型分析 | 第89-91页 |
| 3.5 统计学分析 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-94页 |
| 5 结论 | 第94-95页 |
| 第4章 Leber遗传性视神经病变相关的MT-ND1 m.3635G>A突变的功能研究 | 第95-107页 |
| 1 研究背景 | 第95-96页 |
| 2 材料方法 | 第96页 |
| 3 研究结果 | 第96-104页 |
| 3.1 9个中国LHON家系的遗传和临床评估 | 第96-98页 |
| 3.2 mtDNA分析 | 第98-100页 |
| 3.3 胞质杂合体的构建 | 第100页 |
| 3.4 呼吸链复合体Ⅰ酶活力降低 | 第100-101页 |
| 3.5 ATP产量显著下降 | 第101-102页 |
| 3.6 线粒体膜电位降低 | 第102-103页 |
| 3.7 ROS产生增加 | 第103-104页 |
| 4 讨论 | 第104-106页 |
| 5 结论 | 第106-107页 |
| 第5章 OPA1基因p.P400A突变在常染色体显性视神经萎缩发病中的作用 | 第107-129页 |
| 1 研究背景 | 第107-112页 |
| 1.1 临床评估 | 第107-110页 |
| 1.2. 分子生物学评估 | 第110-112页 |
| 2 材料方法 | 第112页 |
| 3 研究结果 | 第112-124页 |
| 3.1 细胞膜型的构建与鉴定 | 第112页 |
| 3.2 OPA1基因表达水平检测 | 第112-114页 |
| 3.3 线粒体形态改变 | 第114-115页 |
| 3.4 mtDNA拷贝数减少 | 第115页 |
| 3.5 线粒体蛋白表达量下降 | 第115-116页 |
| 3.6 呼吸链复合体酶Ⅳ活力下降 | 第116-117页 |
| 3.7 呼吸功能缺陷 | 第117-119页 |
| 3.8 线粒体ATP产生减少 | 第119-120页 |
| 3.9 线粒体膜电位改变 | 第120-121页 |
| 3.10 ROS产生增加 | 第121-122页 |
| 3.11 细胞凋亡增加 | 第122-123页 |
| 3.12 自噬水平增加 | 第123-124页 |
| 4 讨论 | 第124-128页 |
| 5 结论 | 第128-129页 |
| 第6章 论文创新性 | 第129-130页 |
| 第7章 存在的问题与展望 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-147页 |
| 附录1 27个携带m.14484T>C突变家系mtDNA变异 | 第147-159页 |
| 附录2 9个携带m.3635G>A突变先证者和1个对照(A40)mtDNA变异 | 第159-165页 |
| 附录3 知情同意书 | 第165-166页 |
| 附录4 LHON知识手册 | 第166-167页 |
| 附录5 视神经萎缩病例调查表 | 第167-168页 |
| 附录6 基因检测报告 | 第168-170页 |
| 作者简历 | 第170-171页 |
