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益生屎肠球菌活菌和热灭活菌调节仔猪小肠黏膜紧密连接蛋白、细胞因子以及相关的Toll样受体的研究

摘要第4-8页
ABSTRACT第8-11页
缩略词表第12-16页
第一章 文献综述第16-28页
    1. 益生菌对肠粘膜先天防御系统调节的研究进展第16-24页
        1.1 益生菌的定义以及在动物生产中常用的益生菌种类第16-17页
        1.2 哺乳动物肠黏膜先天防御系统及其对微生物的先天免疫反应第17-21页
            1.2.1 肠粘膜先天防御系统及其发育的影响因素第17-19页
            1.2.2 肠黏膜先天防御系统对微生物的先天免疫反应第19-21页
        1.3 益生菌对肠黏膜上皮层屏障功能和细胞因子产生的影响第21-24页
            1.3.1 增强上皮层屏障功能第21-22页
            1.3.2 调节细胞因子产生第22-24页
    2. 屎肠球菌对仔猪肠道健康影响的研究进展第24-27页
        2.1 益生屎肠球菌概述第24-25页
        2.2 屎肠球菌调节仔猪的肠道菌群第25页
        2.3 屎肠球菌调节仔猪的免疫功能和抗病力第25-26页
        2.4 屎肠球菌影响仔猪的养分吸收机制第26-27页
    3. 本研究目的和意义第27-28页
第二章 试验研究第28-58页
    1. 材料与方法第28-42页
        1.1 实验材料第28页
        1.2 实验动物与细胞第28页
        1.3 主要仪器和设备第28页
        1.4 主要实验试剂第28-30页
        1.5 动物试验方案第30-32页
            1.5.1 饲养管理第32页
            1.5.2 样品采集第32页
        1.6 细胞试验方案第32-33页
            1.6.1 屎肠球菌活菌对IPEC-J2细胞影响的试验第32-33页
            1.6.2 屎肠球菌死菌对IPEC-J2细胞影响的试验第33页
            1.6.3 屎肠球菌细胞壁对IPEC-J2细胞影响的试验第33页
        1.7 屎肠球菌培养制备相关方法第33-34页
            1.7.1 屎肠球菌的培养与制备第33-34页
            1.7.2 屎肠球菌热灭活方法第34页
            1.7.3 屎肠球菌细胞壁提取方法第34页
        1.8 细胞试验相关测定方法第34-35页
            1.8.1 细胞培养第34页
            1.8.2 活细胞计数第34页
            1.8.3 细胞活性检测第34-35页
            1.8.4 细胞膜完整性第35页
        1.9 黏膜及细胞基因mRNA表达第35-39页
            1.9.1 样品总RNA提取第35-36页
            1.9.2 反转录合成cDNA第36-37页
            1.9.3 引物设计第37-38页
            1.9.4 实时荧光定量PCR第38-39页
        1.10 肠道屏障及相关通路蛋白表达测定第39-41页
            1.10.1 肠道粘膜与细胞总蛋白的提取第39页
            1.10.2 总蛋白浓度的测定第39-40页
            1.10.3 蛋白变性第40页
            1.10.4 Western Blot试验第40-41页
        1.11 细胞因子的测定第41页
        1.12 数据处理与统计分析第41-42页
    2. 结果与分析第42-53页
        2.1 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪体增重及腹泻发生率的影响第42页
        2.2 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪脏器指数的影响第42-43页
        2.3 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对紧密连接蛋白的影响第43-48页
        2.4 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对细胞因子表达和分泌的影响第48-52页
            2.4.1 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪肠黏膜细胞因子表达和分泌的影响第48-50页
            2.4.2 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对IPEC-J2细胞的细胞因子表达和分泌的影响第50-52页
        2.5 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对TLRs基因表达的影响第52-53页
            2.5.1 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪肠黏膜TLRs基因表达的影响第52页
            2.5.2 益生屎肠球菌活菌和热灭活菌对IPEC-J2细胞和IPEC-1细胞TLRs基因表达的影响第52-53页
    3. 讨论第53-57页
        3.1 益生屎肠球菌对仔猪肠黏膜上皮屏障功能的影响第53-55页
        3.2 益生屎肠球菌对仔猪肠黏膜细胞因子表达和分泌的影响第55-56页
        3.3 益生屎肠球菌对仔猪肠黏膜TLRs基因表达的影响第56-57页
    4. 结论第57-58页
参考文献第58-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间发表论文情况第67页

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