摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
1.1 植物抗旱性研究进展 | 第10-12页 |
1.1.1 植物抗旱性生理生化研究进展 | 第10-12页 |
1.1.2 植物抗旱基因研究进展 | 第12页 |
1.2 向日葵基因克隆及遗传转化研究进展 | 第12-13页 |
1.2.1 向日葵基因克隆及其研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 向日葵抗逆基因转导 | 第13页 |
1.3 cDNA-AFLP技术 | 第13-15页 |
1.3.1 cDNA-AFLP技术原理 | 第14页 |
1.3.2 cDNA-AFLP技术步骤 | 第14页 |
1.3.3 cDNA-AFLP技术的应用 | 第14-15页 |
1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第15-18页 |
1.4.1 本研究的目的意义 | 第15-16页 |
1.4.2 技术路线 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-34页 |
2.1 试验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 试验试剂 | 第18页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.4 引物和接头序列 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19-34页 |
2.2.1 向日葵种子萌发期形态及生理生化指标的测定 | 第19-23页 |
2.2.2 隶属函数法对向日葵种子萌发期进行抗旱性综合评价 | 第23页 |
2.2.3 总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.4 cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.5 AFLP | 第25-29页 |
2.2.6 差异片段回收及二次PCR | 第29页 |
2.2.7 PCR产物的纯化 | 第29页 |
2.2.8 反向Southern blot | 第29-32页 |
2.2.9 差异片段的克隆 | 第32-33页 |
2.2.10 测序 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-49页 |
3.1 向日葵种子萌发期的抗旱性鉴定 | 第34-39页 |
3.1.1 干旱胁迫对向日葵种子萌发特性的影响 | 第34-35页 |
3.1.2 干旱胁迫对向日葵种子萌发期生理特性的影响 | 第35页 |
3.1.3 相关性分析 | 第35页 |
3.1.4 向日葵萌发期抗旱性综合性评价 | 第35页 |
3.1.5 12项指标与隶属函数综合评价值的相关分析 | 第35-39页 |
3.2 总RNA的提取 | 第39页 |
3.3 差异显示 | 第39-41页 |
3.4 二次扩增检测 | 第41-42页 |
3.5 反向Southern blot | 第42-43页 |
3.5.1 探针效率检测 | 第42页 |
3.5.2 反向Southern blot检测 | 第42-43页 |
3.6 PCR产物纯化检测 | 第43页 |
3.7 差异片段的克隆 | 第43-44页 |
3.7.1 阳性克隆筛选 | 第43-44页 |
3.7.2 菌液PCR | 第44页 |
3.8 测序结果与分析 | 第44-49页 |
3.8.1 测序结果 | 第44-47页 |
3.8.2 同源GenBank数据库比对结果 | 第47-49页 |
4 讨论与小结 | 第49-54页 |
4.1 实验材料的选取 | 第49页 |
4.2 向日葵种子萌发期形态及生理生化响应 | 第49-50页 |
4.3 cDNA-AFLP分离向日葵抗旱相关基因的可行性 | 第50页 |
4.4 差异片段的生物学意义 | 第50-54页 |
4.4.1 泛素羧基末端水解酶与植物抗旱性的关系 | 第51页 |
4.4.2 钙依赖性蛋白激酶与植物抗旱性的关系 | 第51-52页 |
4.4.3 蛋白激酶与植物抗旱性的关系 | 第52页 |
4.4.4 核糖体蛋白s6e与植物抗旱性的关系 | 第52-53页 |
4.4.5 甲基化CpG结合域蛋白与植物抗旱性的关系 | 第53页 |
4.4.6 生长素反应因子与植物抗旱性的关系 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64-68页 |
作者简介 | 第68页 |