摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
1 引言 | 第9-18页 |
1.1 多形性胶质母细胞瘤(GBM) | 第9页 |
1.2 转录因子AhR | 第9-14页 |
1.3 AhR在肿瘤中的作用以及研究现状 | 第14-16页 |
1.3.1 AhR在肿瘤增殖和凋亡中的作用 | 第14-15页 |
1.3.2 AhR在肿瘤转移与细胞迁移中的作用 | 第15-16页 |
1.4 micro RNA 335在肿瘤中的作用 | 第16页 |
1.5 FAK蛋白在肿瘤中的作用 | 第16-17页 |
1.6 内源性小分子ITE | 第17页 |
1.7 研究目的意义 | 第17页 |
1.8 研究内容 | 第17-18页 |
2 实验材料和方法 | 第18-31页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.2 试剂 | 第18页 |
2.3 仪器 | 第18-19页 |
2.4 实验方法 | 第19-30页 |
2.4.1 细胞培养 | 第19页 |
2.4.2 细胞增殖实验 | 第19-20页 |
2.4.3 细胞划痕实验检测ITE对U87MG/U251细胞迁移的作用 | 第20页 |
2.4.4 siRNA干扰AhR基因 | 第20-22页 |
2.4.5 Western Blot检测蛋白表达 | 第22-25页 |
2.4.6 荧光定量PCR检测micro RNA 335 | 第25-27页 |
2.4.7 Transwell检测ITE对侵袭的影响 | 第27页 |
2.4.8 ChIP-qPCR检测AhR结合FAK/VAV3启动子 | 第27-30页 |
2.5 统计学方法 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-42页 |
3.1 CCK-8检测ITE对细胞增殖影响结果 | 第31页 |
3.2 细胞划痕实验检测ITE对细胞迁移的影响 | 第31-33页 |
3.3 siRNA敲低AhR | 第33-37页 |
3.3.1 Cy3转染细胞效率 | 第33-34页 |
3.3.2 荧光定量PCR检测siRNA干扰的效率 | 第34-35页 |
3.3.3 Wertern Blot检测siRNA干扰AhR蛋白水平的影响 | 第35-36页 |
3.3.4 ITE结合AhR抑制细胞迁移 | 第36-37页 |
3.4 Transwell检测ITE对U251侵袭影响 | 第37-38页 |
3.5 荧光定量PCR检测ITE对micro RNA 335的影响 | 第38页 |
3.6 ChIP检测ITE对下游基因启动子的结合 | 第38-40页 |
3.6.1 ChIP样品质量控制 | 第39-40页 |
3.6.2 荧光定量PCR定量FAK及VAV3 | 第40页 |
3.7 WB检测ITE调控FAK、PYK2结果 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录 | 第52-55页 |
作者简介 | 第55页 |