| 摘要 | 第3-9页 |
| ABSTRACT | 第9-16页 |
| 中英文缩略词表 | 第21-23页 |
| 第一章 人THP-1 源性巨噬细胞P2X_7受体在高糖高脂状态下免疫炎症刺激中的作用 | 第23-50页 |
| 引言 | 第23-25页 |
| 材料与方法 | 第25-37页 |
| 1.1 材料 | 第25-30页 |
| 1.1.1 研究对象 | 第25页 |
| 1.1.2 实验细胞 | 第25页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第25-27页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第27-28页 |
| 1.1.5 溶液配制 | 第28-30页 |
| 1.2 实验方法 | 第30-37页 |
| 1.2.1 血液标本的采集及分离 | 第30页 |
| 1.2.2 临床血液项目的检测 | 第30-31页 |
| 1.2.3 外周血单核细胞P2X_7受体的测定 | 第31页 |
| 1.2.4 THP-1 细胞培养与分化诱导 | 第31页 |
| 1.2.5 MTS细胞增殖试验检测方法 | 第31-32页 |
| 1.2.6 小干扰RNA(siRNA)干扰实验 | 第32-33页 |
| 1.2.7 逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR） | 第33-34页 |
| 1.2.8 蛋白印迹方法 | 第34-36页 |
| 1.2.9 细胞内活性氧及钙浓度的测定 | 第36页 |
| 1.2.10 细胞因子的检测 | 第36-37页 |
| 1.2.11 统计学方法 | 第37页 |
| 结果 | 第37-47页 |
| 1.3.1 临床血液项目的检测结果 | 第37-38页 |
| 1.3.2 外周血单核细胞P2X_7受体的检测 | 第38-39页 |
| 1.3.3 THP-1 细胞培养与分化诱导 | 第39-40页 |
| 1.3.4 MTS试验结果 | 第40-41页 |
| 1.3.5 高糖高脂处理对THP-1 巨噬细胞P2X_7受体表达的影响 | 第41页 |
| 1.3.6 P2X_7受体的小干扰RNA转染试验 | 第41-43页 |
| 1.3.7 P2X_7R siRNA处理对高糖高脂诱导下THP-1 巨噬细胞细胞内活性氧及钙浓度变化的影响 | 第43-44页 |
| 1.3.8 P2X_7R siRNA处理对高糖高脂诱导的THP-1 巨噬细胞IL-1β、TNF-α及IL-10 变化的影响 | 第44-46页 |
| 1.3.9 P2X_7R siRNA处理对高糖高脂诱导的THP-1巨噬细胞ERK信号通路变化的影响 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-50页 |
| 第二章 uc.48+基因小干扰RNA对高糖高脂诱导下RAW264.7 的作用研究 | 第50-74页 |
| 引言 | 第50-52页 |
| 材料与方法 | 第52-61页 |
| 2.1 材料 | 第52-56页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第52页 |
| 2.1.2 实验细胞 | 第52页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第52-53页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第53-55页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第55-56页 |
| 2.2 实验方法 | 第56-61页 |
| 2.2.1 血液标本的采集及分离 | 第56页 |
| 2.2.2 血清细胞因子的测定 | 第56-57页 |
| 2.2.3 逆转录-聚合酶链式反应（RT－PCR）检测血清uc.48+的表达 | 第57-58页 |
| 2.2.4 细胞培养与转染 | 第58-60页 |
| 2.2.5 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第60页 |
| 2.2.6 蛋白印迹方法 | 第60页 |
| 2.2.7 细胞增殖及细胞凋亡检测 | 第60-61页 |
| 2.2.8 细胞内钙浓度及活性氧测定 | 第61页 |
| 2.2.9 细胞因子的检测 | 第61页 |
| 2.2.10 统计学方法 | 第61页 |
| 结果 | 第61-72页 |
| 2.3.1 血清细胞因子的测定结果 | 第61-62页 |
| 2.3.2 血清uc.48+的表达变化 | 第62-63页 |
| 2.3.3 uc.48+ siRNA处理降低高糖高脂诱导RAW264.7 细胞上调表达的uc.48+ | 第63-64页 |
| 2.3.4 uc.48+ siRNA处理降低高糖高脂诱导RAW264.7 细胞上调表达的P2X_7受体m RNA | 第64-65页 |
| 2.3.5 uc.48+ siRNA处理降低高糖高脂诱导RAW264.7 细胞上调表达的P2X_7受体蛋白 | 第65-66页 |
| 2.3.6 uc.48+ siRNA处理对高糖高脂诱导RAW264.7 细胞增殖及凋亡的影响 | 第66-67页 |
| 2.3.7 uc.48+ siRNA处理对高糖高脂诱导RAW264.7 细胞内钙浓度及活性氧的影响 | 第67-69页 |
| 2.3.8 uc.48+ siRNA处理对高糖高脂诱导RAW264.7 细胞IL-1β、TNF-α及IL-10 的影响 | 第69-71页 |
| 2.3.9 uc.48+ siRNA处理对高糖高脂诱导RAW264.7 细胞ERK1/2 信号通路变化的影响 | 第71-72页 |
| 讨论 | 第72-74页 |
| 第三章 uc.48+小干扰RNA对2型糖尿病小鼠病理变化的作用研究 | 第74-99页 |
| 引言 | 第74-75页 |
| 材料与方法 | 第75-83页 |
| 3.1 材料 | 第75-78页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第75页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第75-77页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第77-78页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第78页 |
| 3.2 实验方法 | 第78-83页 |
| 3.2.1 建立2型糖尿病小鼠模型 | 第78-79页 |
| 3.2.2 动物分组及uc.48+小干扰RNA腹腔皮下注射 | 第79-80页 |
| 3.2.3 血糖及血脂检测 | 第80页 |
| 3.2.4 小鼠痛觉行为学检测 | 第80-81页 |
| 3.2.5 小鼠血压及心率检测 | 第81页 |
| 3.2.6 腹腔巨噬细胞的获取 | 第81-82页 |
| 3.2.7 腹腔巨噬细胞P2X_7受体通道的形成 | 第82页 |
| 3.2.8 逆转录-聚合酶链式反应 | 第82页 |
| 3.2.9 蛋白印迹方法 | 第82-83页 |
| 3.2.10 血清细胞因子检测 | 第83页 |
| 3.2.11 统计学方法 | 第83页 |
| 结果 | 第83-96页 |
| 3.3.1 血糖和血脂检测结果 | 第83-84页 |
| 3.3.2 痛行为检测结果 | 第84-86页 |
| 3.3.3 心率及血压检测结果 | 第86-88页 |
| 3.3.4 血清细胞因子检测结果 | 第88-90页 |
| 3.3.5 腹腔巨噬细胞试验 | 第90-96页 |
| 讨论 | 第96-99页 |
| 第四章 结论 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-109页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第109-110页 |
| 综述一 | 第110-117页 |
| 参考文献 | 第115-117页 |
| 综述二 | 第117-125页 |
| 参考文献 | 第123-125页 |
