| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 一 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 RNA干扰 | 第11-14页 |
| 1.1.1 RNA干扰技术的发现与发展 | 第11-12页 |
| 1.1.2 RNA干扰作用机制 | 第12-14页 |
| 1.2 RNA干扰在昆虫生物防治中的应用 | 第14-15页 |
| 1.3 高通量小RNA测序 | 第15-17页 |
| 二 材料与方法 | 第17-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验昆虫 | 第17页 |
| 2.1.2 喂饲植物 | 第17页 |
| 2.1.3 所用试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-32页 |
| 2.2.1 分子生物学实验方法 | 第18-28页 |
| 2.2.2 人工饲喂方法 | 第28-30页 |
| 2.2.3 生物信息学方法 | 第30-32页 |
| 三 实验结果与分析 | 第32-43页 |
| 3.1 玉米粘虫吸收dsRNA和siRNA的实验验证 | 第32-36页 |
| 3.1.1 亮蓝染色验证肠道组织对人工饲料的吸收 | 第32-33页 |
| 3.1.2 DIG-dsRNA检测验证肠道组织dsRNA的吸收 | 第33页 |
| 3.1.3 Cy3标记法验证肠道组织对dsRNA和siRNA的吸收 | 第33-36页 |
| 3.2 小RNA测序所涉及的dsRNA/siRNA喂饲实验的设计 | 第36页 |
| 3.3 dsRNA和siRNA喂饲后的表型分析 | 第36-37页 |
| 3.4 小RNA测序结果的生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 3.5 小RNA测序结果的Northern blot验证及分析 | 第40-41页 |
| 3.6 不同dsRNA/siRNA喂饲组中靶标Actin基因表达量的qPCR检测 | 第41-42页 |
| 3.7 dsRNA导入后一些内源miRNA的丰度降低 | 第42-43页 |
| 四 讨论与结论 | 第43-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录Ⅰ 常用实验溶液配制方法 | 第50-51页 |
| 附录Ⅱ 引物序列 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
