| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 1.1 动脉粥样硬化简介 | 第14-15页 |
| 1.2 动脉粥样硬化的脂源学说 | 第15-17页 |
| 1.2.1 脂质,胆固醇和动脉粥样硬化 | 第15-16页 |
| 1.2.2 LDL受体和清道夫受体通路 | 第16-17页 |
| 1.3 动脉粥样硬化的脂质氧化学说 | 第17-20页 |
| 1.3.1 氧化还原反应,活性氧族,脂质过氧化 | 第17-18页 |
| 1.3.2 LDL氧化 | 第18-20页 |
| 1.3.2.1 LDL在体外氧化 | 第18页 |
| 1.3.2.2 细胞介导的LDL氧化 | 第18-20页 |
| 1.4 ox-LDL是动脉粥样硬化形成的罪魁祸首 | 第20页 |
| 1.5 抗氧化剂与动脉粥样硬化 | 第20-23页 |
| 1.5.1 抗氧化剂与抗氧化系统 | 第20-21页 |
| 1.5.2 抗氧化剂在体外和细胞系中发挥的作用 | 第21页 |
| 1.5.3 抗氧化剂在临床上抗氧化疗效不佳 | 第21-23页 |
| 1.5.3.1 观测研究 | 第21-22页 |
| 1.5.3.2 随机一级干预和二级干预临床试验 | 第22-23页 |
| 1.6 LDL氧化环境的提出 | 第23页 |
| 1.7 脂质筏的结构与性质 | 第23-24页 |
| 1.8 非标记定量蛋白质组学 | 第24-25页 |
| 1.9 论文的结构 | 第25-26页 |
| 第二章 巨噬细胞脂质筏的分离纯化 | 第26-37页 |
| 2.1 研究背景 | 第26-28页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第28-30页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.2.2 试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.3 主要配置的溶液 | 第29页 |
| 2.2.4 仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第30页 |
| 2.3.2 免疫荧光实验 | 第30页 |
| 2.3.3 荧光漂白恢复技术 | 第30-31页 |
| 2.3.4 用非去垢剂的方法分离脂质筏 | 第31页 |
| 2.3.5 免疫印迹 | 第31页 |
| 2.3.6 蛋白浓度及胆固醇浓度测定 | 第31-32页 |
| 2.4 实验结果 | 第32-36页 |
| 2.4.1 LDL诱导巨噬细胞脂质筏成簇 | 第32页 |
| 2.4.2 LDL诱导巨噬细胞后细胞膜流动性降低 | 第32-33页 |
| 2.4.3 脂质筏的标志蛋白的定位 | 第33-34页 |
| 2.4.4 各分层中蛋白和胆固醇的含量 | 第34-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 巨噬细胞脂质筏非标记定量蛋白质组学分析 | 第37-51页 |
| 3.1 研究背景 | 第37-38页 |
| 3.1.1 脂质筏生物学 | 第37页 |
| 3.1.2 脂质筏蛋白质组学 | 第37-38页 |
| 3.1.3 本章研究目标 | 第38页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第38-40页 |
| 3.2.1 样本 | 第38页 |
| 3.2.2 试剂 | 第38页 |
| 3.2.3 主要配置的溶液 | 第38-39页 |
| 3.2.4 仪器 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3.1 样本制备 | 第40页 |
| 3.3.2 1D LC-MS/MS | 第40-41页 |
| 3.3.3 数据分析 | 第41页 |
| 3.3.4 聚类分析 | 第41-42页 |
| 3.4 实验结果 | 第42-49页 |
| 3.4.1 蛋白浓度的测定 | 第42页 |
| 3.4.2 SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
| 3.4.3 非标记定量蛋白质组学数据慨况分析 | 第43-44页 |
| 3.4.4 LDL不同时间点的刺激脂质筏中有动态变化的蛋白组筛-选 | 第44-45页 |
| 3.4.5 LDL不同时间点的刺激脂质筏中有动态变化的蛋白功能分类 | 第45-47页 |
| 3.4.6 LDL不同时间点的刺激脂质筏中有动态变化的蛋白相互作用分析 | 第47-49页 |
| 3.5 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 基于脂质筏蛋白质组学的LDL氧化相关因子的筛选及功能研究 | 第51-69页 |
| 4.1 引言 | 第51-52页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第52-55页 |
| 4.2.1 样本 | 第52页 |
| 4.2.2 试剂 | 第52-53页 |
| 4.2.3 主要配置的溶液 | 第53-54页 |
| 4.2.4 仪器 | 第54-55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.3.1 免疫印迹 | 第55页 |
| 4.3.2 双双免疫荧光 | 第55页 |
| 4.3.3 siRNA转染 | 第55页 |
| 4.3.4 qPCR检测siRNA干扰效果 | 第55-57页 |
| 4.3.5 扫描电子显微镜 | 第57页 |
| 4.3.6 MDA测定 | 第57页 |
| 4.4 实验结果 | 第57-66页 |
| 4.4.1 参与生物粘附的蛋白 | 第57-58页 |
| 4.4.2 参与氧化应激的蛋白 | 第58页 |
| 4.4.3 参与脂质代谢的蛋白 | 第58-59页 |
| 4.4.4 参与蛋白转位的蛋白 | 第59-60页 |
| 4.4.5 与酶结合的蛋白 | 第60页 |
| 4.4.6 LDL促进ERP29向脂质筏转位 | 第60-61页 |
| 4.4.7 脂质筏参与巨噬细胞介导的LDL氧化 | 第61-63页 |
| 4.4.8 巨噬细胞Raw264.7氧化LDL的能力是ERp29依赖的 | 第63-66页 |
| 4.5 讨论 | 第66-69页 |
| 第五章 总结与展望 | 第69-71页 |
| 5.1 主要结论 | 第69页 |
| 5.2 本研究的创新点 | 第69-70页 |
| 5.3 研究展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读博士学位期间的主要科研成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附表 | 第80-103页 |
