| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1. 前言 | 第13-26页 |
| 1.1 表观遗传学 | 第13页 |
| 1.2 DNA甲基化 | 第13-18页 |
| 1.2.1 DNA甲基化概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 DNA甲基化与CpG岛 | 第14页 |
| 1.2.3 DNA甲基转移酶 | 第14-15页 |
| 1.2.4 DNA甲基化与肿瘤 | 第15-16页 |
| 1.2.5 DNA甲基转移酶抑制剂 | 第16-18页 |
| 1.2.5.1 核苷类 | 第16-17页 |
| 1.2.5.2 非核苷类 | 第17-18页 |
| 1.3 DNA甲基化检测技术 | 第18-21页 |
| 1.3.1 高效液相色谱法 | 第18-19页 |
| 1.3.2 限制性内切酶技术检测 | 第19页 |
| 1.3.3 亚硫酸盐修饰法 | 第19-21页 |
| 1.3.3.1 亚硫酸氢钠基因组测序法 | 第19页 |
| 1.3.3.2 结合亚硫酸氢钠和限制性分析法 | 第19-20页 |
| 1.3.3.3 甲基化敏感的单链核苷酸引物延伸法 | 第20页 |
| 1.3.3.4 荧光定量法 | 第20-21页 |
| 1.3.4 电化学方法 | 第21页 |
| 1.4 电化学生物传感器 | 第21-23页 |
| 1.4.1 电化学DNA传感器 | 第22-23页 |
| 1.5 本课题的提出以及主要研究内容 | 第23-26页 |
| 2. 材料与方法 | 第26-33页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第26-29页 |
| 2.1.1 仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.2 试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验中所需主要缓冲溶液的配置 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 基于G四联体修饰的MSNs电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第29-31页 |
| 2.2.1.1 纳米介孔二氧化硅的制备 | 第29页 |
| 2.2.1.2 MB的装载 | 第29-30页 |
| 2.2.1.3 电极预处理 | 第30页 |
| 2.2.1.4 电沉积纳米金 | 第30页 |
| 2.2.1.5 DNAS1的固定 | 第30页 |
| 2.2.1.6 DNA杂交 | 第30页 |
| 2.2.1.7 甲基化修饰 | 第30页 |
| 2.2.1.8 HpaII酶切 | 第30页 |
| 2.2.1.9 电化学信号检测 | 第30-31页 |
| 2.2.2 基于G四联体DNA模拟酶电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第31-32页 |
| 2.2.2.1 电极预处理 | 第31页 |
| 2.2.2.2 电沉积纳米金 | 第31页 |
| 2.2.2.3 探针DNA的固定 | 第31页 |
| 2.2.2.4 DNA杂交 | 第31页 |
| 2.2.2.5 甲基化修饰 | 第31页 |
| 2.2.2.6 DpnI酶切 | 第31页 |
| 2.2.2.7 电化学信号检测 | 第31-32页 |
| 2.2.3 基于电化学生物传感器DNA甲基转移酶检测 | 第32-33页 |
| 2.2.3.1 甲基化修饰与Dpn I酶切 | 第32页 |
| 2.2.3.2 电极预处理 | 第32页 |
| 2.2.3.3 电沉积纳米金 | 第32页 |
| 2.2.3.4 DNA的固定 | 第32页 |
| 2.2.3.5 电化学信号检测 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-48页 |
| 3.1 基于G四联体修饰的MSNs电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第33-39页 |
| 3.1.1 MSNs的表征 | 第33-34页 |
| 3.1.2 不同修饰电极的电化学交流阻抗表征 | 第34-35页 |
| 3.1.3 实验可行性分析 | 第35-36页 |
| 3.1.4 条件优化 | 第36-37页 |
| 3.1.5 M. Sss I酶活性的检测 | 第37页 |
| 3.1.6 传感器的特异性 | 第37-38页 |
| 3.1.7 抑制剂对DNA甲基转移酶活性的影响 | 第38-39页 |
| 3.2 基于G四联体DNA模拟酶电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第39-43页 |
| 3.2.1 不同修饰电极的电化学交流阻抗表征 | 第39-40页 |
| 3.2.2 实验可行性分析 | 第40-41页 |
| 3.2.3 条件优化 | 第41-42页 |
| 3.2.4 Dam酶活性的检测 | 第42页 |
| 3.2.5 抑制剂对DNA甲基转移酶活性的影响 | 第42-43页 |
| 3.3 基于发卡DNA电化学生物传感器DNA甲基转移酶检测 | 第43-48页 |
| 3.3.1 实验可行性分析 | 第44页 |
| 3.3.2 条件优化 | 第44-45页 |
| 3.3.3 甲基转移酶活性的检测 | 第45-46页 |
| 3.3.4 传感器的选择性 | 第46-47页 |
| 3.3.5 抑制剂对DNA甲基转移酶活性的影响 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 基于G四联体修饰的MSNs电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第48-49页 |
| 4.2 基于G四联体DNA模拟酶电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第49页 |
| 4.3 基于发卡DNA电化学生物传感器DNA甲基转移酶检测 | 第49-51页 |
| 5. 结论 | 第51-52页 |
| 5.1 基于G四联体修饰的MSNs电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第51页 |
| 5.2 基于G四联体DNA模拟酶电化学传感器DNA甲基转移酶检测 | 第51页 |
| 5.3 基于发卡DNA电化学生物传感器DNA甲基转移酶检测 | 第51-52页 |
| 6. 创新之处 | 第52-53页 |
| 7. 参考文献 | 第53-63页 |
| 8. 致谢 | 第63-64页 |
| 9. 攻读学位期间发表论文情况 | 第64页 |
