符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-27页 |
1.1 家蚕的食性 | 第13-20页 |
1.1.1 家蚕食性的生理基础 | 第13页 |
1.1.2 家蚕对人工饲料的摄食性及适应性 | 第13-14页 |
1.1.3 家蚕食性的遗传方式 | 第14-15页 |
1.1.4 昆虫化学感受的分子机理 | 第15-20页 |
1.1.4.1 昆虫气味结合蛋白 | 第16-17页 |
1.1.4.2 昆虫气味受体 | 第17页 |
1.1.4.3 昆虫化学感受蛋白 | 第17-18页 |
1.1.4.4 昆虫气味降解酶 | 第18-19页 |
1.1.4.5 昆虫感觉神经元膜蛋白 | 第19-20页 |
1.2 分子标记极其在家蚕研究中的应用进展 | 第20-24页 |
1.2.1 常用的分子标记技术 | 第20-22页 |
1.2.1.1 RFLP分子标记技术 | 第20-21页 |
1.2.1.2 STS分子标记技术 | 第21页 |
1.2.1.3 RAPD分子标记技术 | 第21页 |
1.2.1.4 SSR分子标记技术 | 第21-22页 |
1.2.1.5 AFLP分子标记技术 | 第22页 |
1.2.2 分子标记在家蚕研究中的应用 | 第22-24页 |
1.3 昆虫PKG基因与食性的关系研究进展 | 第24-26页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-37页 |
2.1 试验材料 | 第27-30页 |
2.1.1 供试家蚕品种(品系)及人工饲料 | 第27-28页 |
2.1.1.1 供试家蚕品种(品系) | 第27页 |
2.1.1.2 人工饲料配方及调制 | 第27-28页 |
2.1.2 主要试剂、缓冲液及其配制 | 第28-29页 |
2.1.2.1 主要试剂 | 第28页 |
2.1.2.2 常用试剂及缓冲液的配制 | 第28-29页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第29-30页 |
2.2 试验方法 | 第30-37页 |
2.2.1 家蚕品种(品系)及其对人工饲料的摄食性鉴定 | 第30页 |
2.2.2 家蚕基因组DNA提取与检测 | 第30-31页 |
2.2.3 SSR分子标记PCR | 第31-32页 |
2.2.3.1 SSR引物设计 | 第31-32页 |
2.2.3.2 SSR-PCR反应体系及条件设置 | 第32页 |
2.2.3.3 SSR-PCR结果获得与分析 | 第32页 |
2.2.4 家蚕幼虫饥饿处理 | 第32页 |
2.2.5 家蚕幼虫嗅觉刺激方法 | 第32-33页 |
2.2.6 家蚕组织总RNA提取及c DNA第一链合成 | 第33-34页 |
2.2.6.1 RNA提取及检测 | 第33页 |
2.2.6.2 c DNA第一链合成 | 第33-34页 |
2.2.7 RT-q PCR | 第34-35页 |
2.2.7.1 RT-q PCR引物设计 | 第34页 |
2.2.7.2 RT-q PCR反应体系及条件设置 | 第34页 |
2.2.7.3 RT-q PCR标准曲线的制作 | 第34-35页 |
2.2.7.4 A3及pkg1基因表达量的荧光定量分析 | 第35页 |
2.2.8 PKG激活试验 | 第35-36页 |
2.2.8.18-Br-c GMP激活PKG试验 | 第35-36页 |
2.2.8.2 c GMP激活PKG试验 | 第36页 |
2.2.9 数据统计与分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-48页 |
3.1 家蚕不同品种(品系)对人工饲料的摄食性鉴定 | 第37页 |
3.2 家蚕不同食性品种(品系)SSR分子标记分析 | 第37-40页 |
3.3 对人工饲料不同摄食性家蚕品种pkg1基因的表达特征 | 第40-48页 |
3.3.1 pkg1在家蚕不同食性品种(品系)中的表达差异 | 第40页 |
3.3.2 饥饿处理对不同食性家蚕品种(品系)pkg1表达的影响 | 第40-41页 |
3.3.3 气味刺激对不同食性家蚕品种(品系)pkg1表达的影响 | 第41-43页 |
3.3.3.1 气味刺激对中广04和鲁七pkg1表达的影响 | 第41-42页 |
3.3.3.2 气味刺激对菁松A高食性品系和菁松A低食性品系pkg1表达的影响 | 第42-43页 |
3.3.4 pkg1基因的组织表达谱 | 第43-44页 |
3.3.5 pkg1基因在不同家蚕品种(品系)头部不同发育时期的表达变化 | 第44页 |
3.3.6 PKG蛋白激活对家蚕食性影响的研究 | 第44-48页 |
3.3.6.1 添食 8-Br-c GMP对家蚕食性的影响 | 第44-45页 |
3.3.6.2 注射 8-Br-c GMP对家蚕食性的影响 | 第45-47页 |
3.3.6.3 注射c GMP对家蚕食性的影响 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
4.1 家蚕食性相关的SSR分子标记 | 第48页 |
4.2 pkg1基因的选择及实验材料的选择 | 第48-49页 |
4.3 pkg1基因与食性的关系 | 第49-50页 |
4.4 今后有待进一步研究的课题 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第66页 |