| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号说明及缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 埃博霉素的发现及应用现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 微管稳定剂及埃博霉素的发现 | 第12-13页 |
| 1.1.2 埃博霉素的结构 | 第13页 |
| 1.1.3 埃博霉素产生菌 | 第13-14页 |
| 1.1.4 埃博霉素的应用现状 | 第14-15页 |
| 1.2 糖基化埃博霉素的发现 | 第15-19页 |
| 1.2.1 糖基化大环内酯类化合物的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2.2 纤维堆囊菌So0157-2发酵液中检测到糖基化埃博霉素A | 第16页 |
| 1.2.3 糖基转移酶的结构和分类 | 第16-18页 |
| 1.2.4 糖基转移酶在生命活动中具有关键作用 | 第18-19页 |
| 1.3 纤维堆囊菌So0157-2中潜在的埃博霉素糖基转移酶的发掘 | 第19页 |
| 1.4 外源菌来源的糖基转移酶能够对多种化合物进行糖基化修饰 | 第19-21页 |
| 1.4.1 外源菌中糖基化修饰方法的研究 | 第19-20页 |
| 1.4.2 来源于芽孢杆菌的糖基转移酶能够对多种化合物进行糖基化修饰 | 第20-21页 |
| 1.5 本论文工作开展思路和研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 纤维堆囊菌So0157-2中预测的糖基转移酶的异源表达和酶活检测 | 第22-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 So0157-2中糖基转移酶G38和G48875的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.2.2 表达载体的构建 | 第28-33页 |
| 2.2.3 目的蛋白的表达及纯化 | 第33-37页 |
| 2.2.4 目的蛋白的体外糖基化实验 | 第37页 |
| 2.2.5 液相色谱高分辨质谱联用仪分析检测埃博霉素产物 | 第37-38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 2.3.1 纤维堆囊菌So0157-2中糖基转移酶的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 2.3.2 表达载体的构建 | 第39页 |
| 2.3.3 目的蛋白的表达 | 第39-41页 |
| 2.3.4 目的蛋白的Western-blot检测及纯化 | 第41-42页 |
| 2.3.5 目的蛋白的体外糖基化实验及检测 | 第42-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 地衣芽孢杆菌中糖基转移酶YjiC的表达及酶活检测 | 第44-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第44页 |
| 3.1.2 培养基 | 第44-45页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第45页 |
| 3.1.4 主要仪器设备与耗材 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 糖基转移酶YjiC的生物信息学分析 | 第45页 |
| 3.2.2 表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.2.3 目的蛋白诱导表达与纯化 | 第46页 |
| 3.2.4 糖基转移酶YjiC的体外酶活检测 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-51页 |
| 3.3.1 糖基转移酶YjiC的生物信息学分析 | 第47页 |
| 3.3.2 糖基转移酶YjiC表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.3 糖基转移酶YjiC的表达和纯化 | 第48-50页 |
| 3.3.4 糖基转移酶YjiC的体外酶活检测 | 第50-51页 |
| 3.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 糖基转移酶YjiC的酶学性质 | 第52-58页 |
| 4.1 实验材料 | 第52-54页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第52页 |
| 4.1.2 培养基 | 第52页 |
| 4.1.3 主要实验试剂 | 第52-53页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第53-54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 4.2.1 糖基化反应随时间的变化测定 | 第54页 |
| 4.2.2 糖基转移酶YjiC反应最适温度的测定 | 第54页 |
| 4.2.3 糖基转移酶YjiC反应最适pH的测定 | 第54-55页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第55-57页 |
| 4.3.1 糖基化反应随时间的变化 | 第55页 |
| 4.3.2 温度对糖基转移酶YjiC活性的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.3 pH对糖基转移酶YjiC活性的影响 | 第56-57页 |
| 4.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 总结与展望 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第75页 |
