摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-31页 |
1. 二斑叶螨概述 | 第11-13页 |
1.1 二斑叶螨的发生与危害 | 第11页 |
1.2 二斑叶螨的滞育 | 第11-13页 |
1.3 二斑叶螨的防治 | 第13页 |
2. 组学研究的进展及意义 | 第13-15页 |
3. RNA干扰的研究进展 | 第15-21页 |
3.1 RNA干扰的发展历史 | 第15-16页 |
3.2 RNA干扰的分子机制 | 第16-21页 |
4. 类胡萝卜素概述 | 第21-31页 |
4.1 类胡萝卜素的种类及结构 | 第21-22页 |
4.2 类胡萝卜素的性质 | 第22页 |
4.3 类胡萝卜素的提取方法 | 第22-23页 |
4.4 类胡萝卜素的分析测定 | 第23-24页 |
4.5 类胡萝卜素的合成代谢 | 第24-29页 |
4.6 类胡萝卜素在动物中的功能 | 第29-31页 |
第二章 二斑叶螨中类胡萝卜素合成相关基因的克隆及体色变化阶段的相对表达量 | 第31-61页 |
1. 材料与方法 | 第32-44页 |
1.1 供试材料 | 第32-33页 |
1.2 二斑叶螨单雌系的构建 | 第33页 |
1.3 二斑叶螨(Tu)D与ND成虫各龄期体色变化的观察与记录 | 第33页 |
1.4 类胡萝卜素合成基因的cDNA全长扩增 | 第33-40页 |
1.5 类胡萝卜素合成基因的实时荧光定量RT-PCR | 第40-44页 |
2. 结果 | 第44-56页 |
2.1 D与ND成虫各龄期状态 | 第44页 |
2.2 类胡萝卜素相关基因的克隆及分析 | 第44-52页 |
2.3 类胡萝卜素合成相关基因生长阶段的时空表达 | 第52-56页 |
3. 讨论 | 第56-61页 |
第三章 二斑叶螨RNAI方法的建立及对PSLC和PDS基因的RNA干扰 | 第61-81页 |
1. 材料和方法 | 第63-69页 |
1.1 供试材料 | 第63页 |
1.2 引物设计 | 第63-64页 |
1.3 dsRNA合成 | 第64-67页 |
1.4 显微注射 | 第67页 |
1.5 注射后叶螨的存活率评估 | 第67-68页 |
1.6 注射后体色的观察与统计 | 第68页 |
1.7 注射后基因表达水平的定量验证 | 第68页 |
1.8 类胡萝卜素的提取 | 第68-69页 |
1.9 注射前后类胡萝卜素相对含量的检测 | 第69页 |
2. 结果 | 第69-77页 |
2.1 dsRNA递送方式的选择 | 第69-70页 |
2.2 注射龄期的选择 | 第70-72页 |
2.3 注射浓度的选择 | 第72-73页 |
2.4 注射后干扰效率的检测及干扰特异性检测 | 第73-74页 |
2.5 注射后叶螨的表型变化 | 第74-75页 |
2.6 注射二斑叶螨中总类胡萝卜素的相对含量 | 第75-77页 |
3. 讨论 | 第77-81页 |
第四章 二斑叶螨中类胡萝卜素合成通路及其上游通路的调控 | 第81-93页 |
1. 材料与方法 | 第82-83页 |
1.1 供试材料 | 第82页 |
1.2 目的基因的筛选及引物的设计与合成 | 第82-83页 |
1.3 总RNA的提取及质量检测 | 第83页 |
1.4 基因组DNA的去除及反转录 | 第83页 |
1.5 普通RT-PCR检测验证序列 | 第83页 |
1.6 相对定量PCR | 第83页 |
1.7 结果的统计与分析 | 第83页 |
2. 结果 | 第83-91页 |
2.1 目的基因的筛选 | 第83-84页 |
2.2 不同色型二斑叶螨中相关基因的相对表达量 | 第84-91页 |
3. 讨论 | 第91-93页 |
全文总结 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-109页 |
学位论文发表情况 | 第109-111页 |
致谢 | 第111页 |