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苹果MdDRB1基因及2个相关MircoRNAs编码基因的功能鉴定

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-19页
   ·生长素的相关研究第12页
     ·生长素的重要性第12页
   ·HYL1(DRB1)以及相关miRN As的研究第12-17页
     ·植物中HYL1调控的miRN As的研究第12-13页
     ·果树Mirco RNAs的研究进展第13-14页
     ·HYL1(DRB1)对生长素的响应第14-15页
     ·miR156和miR172的相关研究第15-17页
     ·苹果中HYL1基因的初步分析第17页
   ·本研究的目的和意义第17-19页
2 材料和方法第19-28页
   ·实验材料第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·菌株及载体第19页
     ·酶、试剂盒、引物合成及测序第19页
     ·试剂材料第19-20页
     ·实验仪器第20页
   ·实验方法第20-28页
     ·植物基因组DNA的提取第20-21页
     ·RNAplant Plus 法提取植物总 RNA第21页
     ·反转录cDNA第一链的合成第21-22页
     ·苹果MdDRB1基因克隆与载体构建第22-24页
       ·MdDRB1序列的扩增第22页
       ·MdDRB1表达载体的构建第22-23页
       ·PCR扩增产物的回收第23页
       ·PCR回收产物连接载体第23-24页
     ·大肠杆菌感受态细胞DH5α 转化第24页
     ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化第24-25页
       ·电击法制备农杆菌感受态细胞第24-25页
       ·电击法转化农杆菌第25页
     ·农杆菌介导的番茄转化第25页
     ·农杆菌介导的苹果转化第25页
     ·转基因植株的基因组DNA鉴定第25-26页
     ·转基因植株的RT-PCR分析第26-27页
     ·相关生理指标测定第27-28页
3 结果与分析第28-34页
   ·MdDRB1基因过量表达载体的构建第28页
   ·番茄中MdDRB1过量表达转基因植株的获得第28-30页
   ·生长素相关的小分子RNA及其相应的靶基因的表达第30页
   ·MdDRB1基因过量表达影响番茄对生长素敏感性第30-31页
   ·MdDRB1基因过量表达影响转基因番茄的向光性第31-32页
   ·Md-MIR156h和Md-MIR172e转基因苹果的获得第32-34页
4 讨论第34-37页
   ·MdDRB1影响生长素响应有关的基因表达第34-35页
   ·MdDRB1改变生长素响应第35页
   ·miR156和miR172在苹果中过量表达第35-36页
   ·本课题还需进行的研究第36-37页
5 结论第37-38页
参考文献第38-45页
附录第45-48页
致谢第48-49页
攻读学位期间发表论文情况第49页

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