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纤维素酶转录调控因子及纤维素酶应用的研究

摘要第1-12页
Abstract第12-16页
符号说明第16-18页
第一章 绪论第18-40页
   ·木质纤维素组成以及木质纤维素的降解第18-20页
     ·木质纤维素的组成第18-19页
     ·里氏木霉纤维素酶的组成及作用机制第19-20页
   ·纤维素酶诱导物以及木质纤维素如何转化为纤维素酶诱导物第20-22页
     ·纤维素酶诱导物第20-21页
     ·木质纤维素转化为纤维素酶诱导物的机制第21-22页
   ·里氏木霉木质纤维素酶调控第22-37页
     ·里氏木霉纤维素酶转录因子的调控第22-26页
     ·光照对纤维素酶生产的影响第26-36页
     ·其他影响因子第36-37页
   ·利用纤维素酶转化马铃薯渣等低价值材料为高附加值产物第37-40页
第二章 里氏木霉velvet家族对纤维素酶生产的影响第40-86页
   ·引言第40-41页
   ·实验材料与实验试剂的配制第41-47页
     ·实验菌株第41-42页
     ·本实验中所用的引物第42-44页
     ·本实验中培养基的配制第44页
     ·实验培养条件第44-45页
     ·实验常用试剂的配制第45-46页
     ·实验中所用的试剂盒第46页
     ·试验中所用到的常用药品试剂、感受态、DNA聚合酶第46-47页
     ·实验常用仪器第47页
     ·菌种保藏第47页
   ·实验方法第47-58页
     ·质粒小量提取工作第47页
     ·目的DNA的切胶回收第47页
     ·酶切连接实验第47-48页
     ·大肠杆菌转化工作第48页
     ·酵母转化实验第48-49页
     ·敲除盒的构建第49-52页
     ·里氏木霉原生质体转化方法第52-53页
     ·里氏木霉基因组提取第53页
     ·Southern blot实验第53-55页
     ·里氏木霉RNA提取第55页
     ·RNA反转与荧光定量实验第55-56页
     ·里氏木霉生物量、纤维素酶酶活及胞外蛋白的测定第56-57页
     ·酵母双杂交实验第57-58页
   ·结果与讨论第58-83页
     ·里氏木霉中velvet家族蛋白第58-63页
     ·里氏木霉△ve1,△vel2和△vel3菌株的构建第63-67页
     ·里氏木霉△ve1,△vel2和△vel3菌株在光照和黑暗条件下不同碳源平板上表型分析第67-69页
     ·里氏木霉velvet家族在渗透压、细胞壁完整性和疏水性的作用第69-72页
     ·里氏木霉△ve1,△vel2和△vel3菌株在光照和黑暗的条件下孢子生成的影响第72-74页
     ·里氏木霉△ve1,△vel2和△vel3菌株在光照和黑暗的条件下纤维素酶转录水平的变化第74-77页
     ·里氏木霉△ve1,△vel2和△vel3菌株在光照和黑暗的条件下纤维素酶酶活测定第77-80页
     ·里氏木霉Velvet家族蛋白相互作用以及蛋白定位研究第80-83页
   ·本章小结第83-84页
   ·研究展望第84-86页
第三章 里氏木霉碳源代谢阻遏因子Cre1结构及磷酸化研究第86-112页
   ·引言第86页
   ·实验材料与实验试剂的配制第86-90页
     ·实验菌株与质粒第86-87页
     ·实验所用培养基第87页
     ·实验培养条件第87页
     ·实验常用试剂的配制第87-89页
     ·试验中所用试剂盒第89页
     ·试验中所用到的常用药品试剂、DNA聚合酶第89页
     ·实验常用仪器第89-90页
     ·菌种保藏第90页
   ·实验方法第90-95页
     ·质粒小量提取工作第90页
     ·目的DNA的切胶回收第90页
     ·GB-dir方法进行片段连接第90-91页
     ·大肠杆菌转化工作第91页
     ·酵母转化实验第91页
     ·敲除盒的构建第91页
     ·定点突变实验第91-92页
     ·里氏木霉原生质体转化方法第92页
     ·里氏木霉基因组提取第92页
     ·蛋白表达纯化第92-93页
     ·Western blot实验第93-94页
     ·里氏木霉RNA提取第94页
     ·RNA反转与荧光定量实验第94页
     ·酵母双杂交实验第94页
     ·免疫共沉淀实验第94-95页
     ·质谱预处理第95页
   ·结果与讨论第95-109页
     ·里氏木霉Cre1与酪蛋白激酶(CK)Ⅱ相互作用研究第95-97页
     ·里氏木霉Cre1酪蛋白激酶(CK)Ⅱ磷酸化位点研究第97-102页
     ·里氏木霉Cre1蛋白磷酸化位点研究第102-104页
     ·葡萄糖条件下里氏木霉Cre1免疫共沉淀实验第104-105页
     ·里氏木霉Cre1异源表达及结构研究第105-109页
   ·本章小结第109-110页
   ·研究展望第110-112页
第四章 高浓度马铃薯渣降解生产葡萄糖实验第112-128页
   ·引言第112页
   ·实验材料、试剂第112-113页
     ·实验材料与酶液第112-113页
     ·实验试剂第113页
     ·实验仪器第113页
   ·实验方法第113-115页
     ·马铃薯渣的成分分析第113页
     ·淀粉和果胶含量测定第113页
     ·纤维素酶酶活和果胶酶酶活测定第113-114页
     ·纤维素酶和果胶酶降解马铃薯渣第114页
     ·马铃薯渣中各成分间换算公式第114-115页
   ·结果与讨论第115-123页
     ·里氏木霉TX和草酸青霉JUA10-1酶液酶活测定第115页
     ·马铃薯渣成分分析第115-116页
     ·预处理与未处理马铃薯渣降解效果比较第116-118页
     ·单独添加里氏木霉TX,草酸青霉JUA10-1酶液和商品果胶酶降解效果第118-120页
     ·草酸青霉JUA10-1、里氏木霉TX酶液与果胶酶复配降解效果第120-123页
   ·葡萄糖酸生产第123-126页
   ·本章小结第126页
   ·研究展望第126-128页
全文总结与展望第128-130页
参考文献第130-144页
攻读学位期间发表的学术论文第144-146页
会议摘要第146-148页
致谢第148-149页
学位论文评阅及答辩情况表第149页

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