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猪肌纤维类型关键基因筛选及miR-423-5p的功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 文献综述第14-26页
   ·骨骼肌研究进展第14-18页
     ·骨骼肌发育第14-16页
     ·肌纤维类型第16-18页
     ·肌纤维类型与肉质第18页
   ·转录组测序研究进展第18-21页
     ·RNA-seq原理第19页
     ·RNA-seq测序平台第19-20页
     ·RNA-seq的生物信息学分析第20-21页
     ·RNA-seq在猪育种中的应用第21页
   ·miRNA研究进展第21-24页
     ·miRNA的生成第22页
     ·miRNA作用机制第22-23页
     ·miRNA在骨骼肌发育中的作用第23-24页
     ·miRNA在肌纤维类型中的作用第24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
第二章 猪不同肌纤维转录组文库构建和高通量测序第26-34页
   ·材料及方法第26-28页
     ·实验动物及样品采集第26页
     ·仪器和设备第26页
     ·试剂第26页
     ·实验方法第26-28页
   ·结果与分析第28-32页
     ·测序质量评估第28-30页
     ·参考序列比对第30-32页
   ·讨论第32-33页
   ·小结第33-34页
第三章 猪不同肌肉组织文库差异基因筛选及注释第34-41页
   ·材料与方法第34-36页
     ·基因比对分析第34页
     ·差异基因筛选与注释第34-35页
     ·基因结构优化第35页
     ·新转录本预测和注释第35页
     ·可变剪切第35页
     ·SNP分析第35-36页
   ·结果与分析第36-39页
     ·基因比对统计第36页
     ·差异基因筛选第36-37页
     ·基因结构优化第37页
     ·新转录本预测和注释第37页
     ·可变剪切分析第37-38页
     ·SNP分析第38-39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
第四章 猪不同肌肉组织转录组数据深度挖掘第41-53页
   ·材料与方法第41-42页
     ·GO功能显著性富集分析第41-42页
     ·Pathway显著性富集分析第42页
     ·蛋白互作网络构建第42页
   ·结果与分析第42-51页
     ·猪不同类型肌肉组织的GO功能分析第42-43页
     ·不同肌肉组织中的差异基因通路分析第43-44页
     ·肌肉相关基因的鉴定和筛选第44-46页
     ·蛋白互作网络构建第46-47页
     ·猪不同肌肉组织差异基因在肌纤维相关的Pathway分析第47-51页
   ·讨论第51页
   ·小结第51-53页
第五章 基因SUFU在成肌细胞增殖分化中的作用第53-59页
   ·材料和方法第53-54页
     ·实验动物及细胞第53页
     ·实验试剂第53页
     ·小鼠组织样品采集第53页
     ·C2C12成肌细胞培养及转染第53-54页
     ·组织或细胞总RNA提取第54页
     ·RT-qPCR检测SUFU及相关标志基因表达第54页
     ·数据分析第54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·SUFU基因在小鼠中的组织表达谱第54-55页
     ·SUFU基因在成肌细胞增殖和分化过程中的时序表达第55页
     ·SUFU基因的siRNA干扰效率检测第55-56页
     ·干扰SUFU对成肌细胞增殖的作用第56页
     ·干扰SUFU对成肌细胞分化的作用第56-57页
   ·讨论第57-58页
   ·小结第58-59页
第六章 过表达miR4235P抑制C2C12成肌细胞增殖第59-66页
   ·材料与方法第59-61页
     ·实验试剂和仪器第59页
     ·实验动物及细胞第59页
     ·细胞培养及转染第59-60页
     ·细胞总RNA提取第60页
     ·实时定量PCR检测第60页
     ·蛋白免疫印记第60页
     ·EdU检测第60页
     ·流式细胞分析第60页
     ·CCK-8 检测第60-61页
     ·数据分析第61页
   ·结果与分析第61-64页
     ·mi R4235p的组织表达谱第61页
     ·mi R4235p在C2C12成肌细胞增殖中的时序表达第61-62页
     ·转染miR4235p的Agomir后超表达效率检测第62页
     ·过表达miR4235p抑制细胞周期基因的mRNA和蛋白表达水平第62-63页
     ·过表达miR4235p抑制细胞增殖第63-64页
   ·讨论第64-65页
   ·小结第65-66页
第七章 过表达miR4235P抑制C2C12成肌细胞分化第66-72页
   ·材料与方法第66-67页
     ·实验试剂和仪器第66页
     ·细胞培养及转染第66页
     ·实时定量PCR第66页
     ·蛋白免疫印记第66页
     ·免疫荧光检测肌管形成第66-67页
     ·数据统计分析第67页
   ·结果与分析第67-70页
     ·mi R4235p在C2C12成肌细胞分化中的时序表达第67页
     ·转染miR4235p后超表达效率检测第67-68页
     ·超表达miR4235p抑制成肌分化标志基因的mRNA和蛋白表达第68-69页
     ·超表达miR4235p抑制肌管的形成第69-70页
   ·讨论第70-71页
   ·小结第71-72页
结论第72-73页
创新点第73-74页
进一步研究内容第74-75页
参考文献第75-81页
附录第81-89页
致谢第89-90页
作者简介第90页

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