| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-25页 |
| ·番木瓜的营养价值 | 第10-11页 |
| ·番木瓜病害及其检测方法 | 第11-13页 |
| ·番木瓜主要病虫害 | 第11-13页 |
| ·番木瓜病毒病的检测 | 第13页 |
| ·番木瓜抗病育种工作进展 | 第13-16页 |
| ·CP介导的病毒抗性 | 第14-15页 |
| ·RNA干扰介导的PRSV抗性 | 第15-16页 |
| ·复制酶基因介导的抗性 | 第16页 |
| ·真核翻译起始因子4E基因的研究进展 | 第16-20页 |
| ·eIF4E的结构和功能 | 第16-17页 |
| ·eIF4E家族隐性抗性基因 | 第17-19页 |
| ·番木瓜eIF4E家族基因研究进展 | 第19-20页 |
| ·RNA沉默 | 第20-22页 |
| ·RNA沉默现象的发现 | 第20页 |
| ·RNA沉默机制的研究 | 第20-22页 |
| ·RNAi技术在植物抗病毒领域的研究进展 | 第22页 |
| ·原生质体转化体系研究进展 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-40页 |
| ·材料 | 第25-28页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·质粒及菌株 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要试剂配方 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-40页 |
| ·利用多重荧光定量PCR同时鉴定番木瓜三种病毒 | 第28-31页 |
| ·PEG介导番木瓜叶肉原生质体瞬时表达体系的优化 | 第31-33页 |
| ·利用RNAi干扰番木瓜eIF4E家族基因 | 第33-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-56页 |
| ·多重荧光定量PCR病毒检测体系的建立及样品检测 | 第40-46页 |
| ·基于SYBR Green I染液的单一荧光定量PCR | 第40页 |
| ·多重荧光定量PCR检测体系的建立 | 第40-42页 |
| ·多重及单一荧光定量PCR的标准曲线 | 第42-44页 |
| ·多重荧光定量PCR体系的敏感性及特异性分析 | 第44页 |
| ·样品检测 | 第44-46页 |
| ·PEG介导的番木瓜叶肉原生质体体系的优化 | 第46-50页 |
| ·表达载体pGreen-Hcpro的构建结果 | 第46-47页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体的制备 | 第47-48页 |
| ·PEG介导的番木瓜叶肉原生质体瞬时表达 | 第48-50页 |
| ·利用RNA干扰技术干扰PRSV侵染的分子机制研究 | 第50-56页 |
| ·番木瓜eIF4E家族基因表达量及病毒量变化 | 第50-53页 |
| ·pGreen-RNAi质粒的构建结果 | 第53-54页 |
| ·目的干扰载体pGreen-RNAi-4EJiso的构建结果 | 第54-55页 |
| ·荧光定量PCR检测干扰效果 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-61页 |
| ·影响多重荧光定量PCR检测体系的主要因素 | 第56-57页 |
| ·HC-Pro的沉默抑制及促进外源基因表达 | 第57-58页 |
| ·番木瓜eIF4E家族基因及病毒基因在PRSV侵染中的表达 | 第58-59页 |
| ·借助RNAi技术干扰PRSV侵染的研究意义 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| ·多重荧光定量体系的建立 | 第61页 |
| ·番木瓜eIF4E家族基因干扰效应研究 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
