中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-22页 |
一、逆境胁迫及其对植物的影响 | 第12-18页 |
1. 干旱胁迫及其对植物的影响 | 第12-13页 |
2. 盐胁迫及其对植物的影响 | 第13-14页 |
3. 氧化胁迫及其对植物的影响 | 第14-18页 |
·活性氧的产生机制 | 第14页 |
·活性氧的毒害作用 | 第14-15页 |
·植物体内活性氧的清除 | 第15-18页 |
二、关于APX的简介 | 第18-20页 |
1. APX的分布 | 第18页 |
2. APX的酶学特征和作用机理 | 第18-19页 |
3. APX的诱导表达 | 第19页 |
4. APX基因的研究进展 | 第19-20页 |
三、论文的目的及意义 | 第20-22页 |
第二部分 转反义APX基因毛白杨的获得及鉴定 | 第22-32页 |
一、实验材料 | 第22-24页 |
1. 植物材料 | 第22页 |
2. 质粒、菌株 | 第22页 |
3. 实验仪器 | 第22-23页 |
4. 酶和各种生化试剂 | 第23页 |
5. 实验培养基 | 第23-24页 |
·菌株培养基 | 第23页 |
·植物培养基 | 第23-24页 |
二、实验方法 | 第24-28页 |
1. 转基因毛白杨的初步获得 | 第24-25页 |
·感染用农杆菌菌液的准备 | 第24页 |
·感染用野生型毛白杨叶片的准备及转化 | 第24页 |
·转化外植体的后期培养和试管苗的获得 | 第24-25页 |
2. 转基因毛白杨DNA水平的检测 | 第25-28页 |
·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
·毛白杨基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
·转基因毛白杨基因组DNA的PCR检测 | 第27-28页 |
3. 转基因毛白杨的GUS检测 | 第28页 |
·GUS染色液主要试剂 | 第28页 |
·染色步骤 | 第28页 |
三、结果及分析 | 第28-30页 |
1. 毛白杨的转化及转基因毛白杨的获得 | 第28-29页 |
2. 转基因毛白杨的PCR检测 | 第29-30页 |
3. 转基因毛白杨的GUS检测 | 第30页 |
四、讨论 | 第30-32页 |
第三部分 转反义APX基因杨树对非生物胁迫的抗性分析 | 第32-57页 |
一、实验材料 | 第32页 |
二、实验方法 | 第32-39页 |
1. 胁迫处理方法 | 第32-33页 |
·盐胁迫处理 | 第32页 |
·干旱胁迫处理 | 第32-33页 |
·氧化胁迫处理 | 第33页 |
2. 生理指标的测定方法 | 第33-39页 |
·APX酶活的测定 | 第33-34页 |
·GR酶活的测定 | 第34页 |
·蛋白含量的测定 | 第34-35页 |
·叶绿素含量的测定 | 第35-36页 |
·AsA含量的测定 | 第36-37页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第37页 |
·相对电导率的测定 | 第37-38页 |
·H2O2含量的测定 | 第38页 |
·毛白杨组培苗的表型观察 | 第38-39页 |
3. 数据处理 | 第39页 |
三、结果与分析 | 第39-53页 |
1. 反义表达APX-IV基因毛白杨和野生型毛白杨的表型差异 | 第39页 |
·生根时间和生根数量的比较 | 第39页 |
·生长周期的差异 | 第39页 |
2. 反义表达APX-IV基因毛白杨在盐胁迫下的反应 | 第39-46页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株表型差异的比较 | 第39-40页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株APX酶活性的变化 | 第40-41页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株GR酶活性的变化 | 第41-42页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株叶绿素含量的变化 | 第42-44页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株AsA含量的变化 | 第44页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株质膜透性的变化 | 第44-45页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株MDA含量的变化 | 第45-46页 |
·盐胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株过H2O2含量的变化 | 第46页 |
3. 反义表达APX-IV基因毛白杨在干旱胁迫下的反应 | 第46-50页 |
·干旱胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株表型差异的比较 | 第46-47页 |
·干旱胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株APX酶活性的变化 | 第47-48页 |
·干旱胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株GR酶活性的变化 | 第48-49页 |
·干旱胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株AsA含量的变化 | 第49页 |
·干旱胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株MDA含量的变化 | 第49-50页 |
4. 反义表达APX-IV基因毛白杨在氧化胁迫下的反应 | 第50-53页 |
·氧化胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株表型差异的比较 | 第50-51页 |
·氧化胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株APX酶活性的变化 | 第51页 |
·氧化胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株GR酶活性的变化 | 第51-52页 |
·氧化胁迫下反义表达 APX植株和野生型植株蛋白含量的变化 | 第52-53页 |
·氧化胁迫下反义表达APX植株和野生型植株总叶绿素含量的变化 | 第53页 |
四、讨论 | 第53-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
致谢 | 第64页 |