摘要 | 第1-8页 |
Summary | 第8-10页 |
英文缩写符号及中英文对照表 | 第10-12页 |
Ⅰ 文献综述 | 第12-26页 |
1 国内外马铃薯生产现状 | 第13-14页 |
·国内外马铃薯发展状况 | 第13页 |
·马铃薯在国民经济中的作用 | 第13-14页 |
2 马铃薯糖苷生物碱含量及影响因素 | 第14-16页 |
·马铃薯糖苷生物碱含量及食用安全性 | 第14页 |
·糖苷生物碱的分布 | 第14-15页 |
·影响块茎SGAs含量的因素 | 第15-16页 |
3 糖苷生物碱的化学结构及生物学功能 | 第16-19页 |
·糖苷生物碱的化学结构 | 第16-17页 |
·糖苷生物碱的生物学功能 | 第17-18页 |
·糖苷生物碱的生物合成途径 | 第18-19页 |
4 植物细胞信号转导和光信号 | 第19-22页 |
·植物细胞信号转导 | 第19-21页 |
·光信号 | 第21-22页 |
5 马铃薯糖苷生物碱的分子调控 | 第22-26页 |
·糖苷生物碱合成的分子生物学研究 | 第22-24页 |
·糖苷生物碱合成的调控研究 | 第24-26页 |
Ⅱ 研究目的和意义 | 第26-28页 |
Ⅲ 研究技术路线 | 第28-29页 |
Ⅳ 试验材料与方法 | 第29-52页 |
1 试验材料 | 第29-30页 |
·菌种和质粒 | 第29页 |
·植物材料 | 第29页 |
·工具酶和试剂 | 第29页 |
·培养基 | 第29-30页 |
2 方法 | 第30-52页 |
·马铃薯试管薯的诱导 | 第30页 |
·不同光质对马铃薯的处理 | 第30页 |
·糖苷生物碱的测定 | 第30-31页 |
·光信号分子的检测 | 第31-33页 |
·SGAs合成相关基因的表达分析 | 第33-35页 |
·核酸的提取 | 第35-37页 |
·感受态细胞的制备及转化 | 第37-39页 |
·SGT3 基因克隆 | 第39-41页 |
·基因生物信息学分析 | 第41页 |
·靶标基因敏感位点的筛选、亚克隆及干扰载体构建 | 第41-48页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第48页 |
·根癌农杆菌介导法对烟草的遗传转化 | 第48-49页 |
·根癌农杆菌介导法对马铃薯遗传转化 | 第49-52页 |
Ⅴ 结果与分析 | 第52-93页 |
1 不同光质对马铃薯块茎糖苷生物碱合成的诱导效应 | 第52-56页 |
·不同光质对马铃薯块茎糖苷生物碱合成的诱导效果 | 第52-53页 |
·不同马铃薯基因型块茎糖苷生物碱合成对光诱导的响应 | 第53-54页 |
·不同皮色马铃薯基因型块茎糖苷生物碱积累与光质之间的关系 | 第54-56页 |
2 光信号诱导马铃薯块茎糖苷生物碱积累的机制 | 第56-62页 |
·不同光质处理的马铃薯块茎中G蛋白含量变化 | 第56-57页 |
·不同光质处理的马铃薯块茎CaM含量变化 | 第57-59页 |
·不同光质处理的马铃薯块茎cAMP含量变化 | 第59-62页 |
3 糖苷生物碱合成途径相关基因表达分析 | 第62-71页 |
·总RNA的提取效果 | 第62页 |
·RT-PCR检测中基因的选择 | 第62页 |
·SGAs合成途径相关基因表达水平 | 第62-71页 |
4 马铃薯鼠李糖基转移酶基因的克隆及编码蛋白 | 第71-80页 |
·鼠李糖基转移酶基因的克隆 | 第71-73页 |
·鼠李糖基转移酶基因序列分析 | 第73-74页 |
·SGT3疏水性/亲水性特征 | 第74-76页 |
·SGT3信号肽及亚细胞定位 | 第76-77页 |
·SGT3序列跨膜区 | 第77-78页 |
·SGT3二级结构及三级结构 | 第78-80页 |
5 SGT3基因载体构建 | 第80-85页 |
·SGT3基因非保守区目标区段RNA干扰载体构建 | 第80-81页 |
·SGT3基因保守区目标区段RNA干扰载体构建 | 第81-82页 |
·SGT3保守区加非保守区目标区段RNA干扰载体构建 | 第82-84页 |
·SGT3基因过表达载体构建 | 第84-85页 |
6 农杆菌工程菌的获得 | 第85-87页 |
·pCARI1转化农杆菌 | 第85页 |
·pBCRI2和pCSRI2转化农杆菌 | 第85-86页 |
·pBCRI3和pCSRI3转化农杆菌 | 第86页 |
·pBCT3和pCST3转化农杆菌 | 第86-87页 |
7 烟草的遗传转化及草丁膦抗性分析 | 第87-88页 |
·转基因烟草的获得 | 第87-88页 |
·转基因植株对草丁膦的抗性 | 第88页 |
8 马铃薯遗传转化及转基因植株 | 第88-93页 |
·转化受体材料马铃薯试管薯的获得 | 第88页 |
·农杆菌菌液浓度和浸染时间对转化效率的影响 | 第88-89页 |
·外植体预培养及共培养时间对转化效率的影响 | 第89-90页 |
·外植体愈伤、分化组织诱导及植株再生 | 第90-93页 |
Ⅵ 讨论 | 第93-102页 |
1 光质与马铃薯糖苷生物碱积累的关系 | 第93页 |
2 马铃薯块茎皮色与糖苷生物碱积累的关系 | 第93-94页 |
3 光信号与糖苷生物碱积累的关系 | 第94-95页 |
4 糖苷生物碱合成代谢相关基因及光敏色素基因的表达特点 | 第95-97页 |
5 糖苷生物碱代谢调控靶标基因选择 | 第97-98页 |
6 糖苷生物碱分子调控策略 | 第98-99页 |
7 内参基因的选择 | 第99-100页 |
8 抗性标记基因的选择 | 第100页 |
9 影响马铃薯遗传转化的因素 | 第100-102页 |
Ⅶ 结论 | 第102-104页 |
Ⅷ 研究的创新点 | 第104-105页 |
Ⅸ 图版说明 | 第105-107页 |
导师简介 | 第107-108页 |
作者简介 | 第108-109页 |
致谢 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-118页 |