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利迪链霉菌A02高产纳他霉素工程菌的选育

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
缩略语表第7-11页
1 前言第11-21页
   ·纳他霉素概述第11-13页
     ·发现命名第11页
     ·结构性质第11-12页
     ·分离提取第12页
     ·应用第12-13页
   ·透明颤菌血红蛋白基因第13-15页
     ·透明颤菌血红蛋白第13-14页
     ·透明颤菌血红蛋白的表达与调控第14页
     ·透明颤菌血红蛋白基因的应用第14-15页
   ·链霉菌次级代谢调控第15-19页
     ·途径特异性调控和多效调控第15-16页
     ·全局调控第16-17页
     ·phoR-phoP 双组分调控系统第17-19页
   ·本课题的研究思路第19-21页
2 材料与方法第21-35页
   ·材料第21-23页
     ·菌株和质粒第21-22页
     ·主要仪器和试剂第22页
     ·培养基和溶液第22-23页
   ·方法第23-35页
     ·链霉菌培养条件第23页
     ·vgb 基因表达载体的构建第23-26页
     ·phop 基因敲除载体的构建第26-30页
     ·大肠杆菌与利迪链霉菌 A02 的接合转移第30-31页
     ·工程菌的筛选第31-32页
     ·HPLC 测定纳他霉素的含量第32页
     ·几丁质酶活的测定第32-33页
     ·工程菌 AV02 摇瓶发酵条件优化第33-35页
3 实验结果第35-59页
   ·vgb 基因在 S.lydicus A02 中表达及对菌体生长代谢的影响第35-43页
     ·vgb基因的克隆及表达载体构建第35-36页
     ·工程菌 AV02 的筛选及验证第36-38页
     ·工程菌 AV02 对菌体生长代谢的影响第38-43页
   ·工程菌 AV02 摇瓶发酵条件优化第43-50页
     ·不同培养时间菌种活力对纳他霉素合成影响第43页
     ·种子培养时间对纳他霉素合成影响第43-44页
     ·温度对纳他霉素合成影响第44-45页
     ·初始 pH 对纳他霉素合成影响第45-46页
     ·装液量对菌株纳他霉素合成影响第46页
     ·摇床转速对菌株纳他霉素合成影响第46-47页
     ·摇瓶接种量对纳他霉素合成影响第47-48页
     ·发酵时间对纳他霉素合成影响第48页
     ·无机盐种类及浓度对纳他霉素合成影响第48-50页
   ·S.lydicus A02 phop 基因的敲除及对菌体生长代谢的影响第50-59页
     ·利迪链霉菌 A02 phoP-phoR 双组分调节系统基因的克隆第50-51页
     ·phoP 基因敲除载体的构建第51-56页
     ·利迪链霉菌 Δphop-A02 敲除突变株的获得第56-58页
     ·工程菌 Δphop-A02 对菌株生长代谢的影响第58-59页
4 分析与讨论第59-61页
5 结论第61-63页
参考文献第63-71页
附录第71-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表的学术论文第75-76页

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