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人早孕因子表达与促细胞生长模型的初步建立

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第一章 文献综述第10-26页
   ·引言第10页
   ·早孕因子的研究进展第10-25页
     ·早孕因子:热休克蛋白10的同系物第11-12页
     ·早孕因子的性质和它的激活因子第12-13页
     ·早孕因子和它的目标受体第13-14页
     ·免疫反应中的热休克蛋白10第14-16页
     ·早孕因子的生物学鉴定方法:玫瑰花环抑制试验第16-17页
     ·早孕因子在腹腔注射的时间进程第17-18页
     ·早孕因子诱导基因限制淋巴因子第18-19页
     ·早孕因子是胚胎一个基本的存活因子第19-20页
     ·早孕因子是增生细胞和肿瘤细胞的存活因子和生长因子第20-22页
     ·早孕因子的免疫学特性第22-24页
     ·早孕因子和自身免疫性疾病第24-25页
   ·早孕因子在临床中的应用第25-26页
     ·胚胎监控第25页
     ·超早孕检测第25页
     ·肿瘤细胞的早期诊断第25-26页
第二章 人早孕因子基因的克隆第26-34页
   ·材料与方法第26-30页
     ·质粒、菌种和试剂第26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·主要液体试剂第26-27页
     ·人早孕因子基因的克隆第27-30页
   ·结果第30-32页
     ·EPF基因的克隆第30-31页
     ·重组表达质粒的PCR和酶切鉴定结果第31-32页
     ·EPF基因cDNA序列第32页
   ·讨论第32-34页
第三章 人早孕因子基因的表达及纯化第34-62页
   ·材料与方法第34-49页
     ·质粒、菌种和试剂第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·主要试剂第35-39页
     ·主要试剂盒第39页
     ·EPF基因的扩增第39页
     ·重组质粒的构建第39-43页
     ·重组质粒的鉴定第43-44页
     ·重组质粒的提取和在表达菌株BL21的转化第44页
     ·重组质粒pGEX6p-EPF和pET28-EPF的原核表达第44-47页
     ·重组质粒pGEX6p-EPF最佳诱导条件的优化第47页
     ·重组蛋白pGEX6p-EPF表达产物可溶性分析第47-48页
     ·目的蛋白的纯化第48-49页
   ·结果第49-58页
     ·EPF基因片段的PCR扩增结果第49页
     ·重组表达质粒的PCR和酶切鉴定结果第49-50页
     ·重组质粒的诱导表达第50-52页
     ·重组蛋白pGEX6p-EPF表达的时间优化第52-53页
     ·诱导剂浓度对重组蛋白表达量的影响第53-54页
     ·重组蛋白的可溶性表达第54-56页
     ·Western blot检测结果第56-57页
     ·玫瑰花环抑制实验结果分析第57页
     ·表达蛋白的纯化第57-58页
   ·讨论第58-62页
     ·表达系统的选择第59页
     ·关于表达载体的选择第59-60页
     ·包涵体形成分析第60页
     ·重组蛋白可溶性表达优化第60-61页
     ·重组蛋白的纯化第61-62页
第四章 早孕因子促生长细胞模型的初步建立第62-69页
   ·材料与方法第62-65页
     ·细胞和试剂第62页
     ·主要仪器第62页
     ·主要溶液配制第62-63页
     ·各种细胞传代培养方法第63-64页
     ·细胞计数法第64-65页
     ·EPF促生长细胞模型的建立方法第65页
   ·结果第65-68页
     ·重组蛋白在Marc145细胞促生长作用第65-66页
     ·重组蛋白在NS0细胞中的促生长作用第66-68页
   ·讨论第68-69页
第五章 研究总结第69-70页
参考文献第70-77页
附录A:英文缩略词表(Abbreviations)第77-78页
作者简历第78页
获得的奖励及主要荣誉第78页
硕士在读期间撰写和已发表的论文第78-79页
致谢第79页

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