中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
·引言 | 第10页 |
·早孕因子的研究进展 | 第10-25页 |
·早孕因子:热休克蛋白10的同系物 | 第11-12页 |
·早孕因子的性质和它的激活因子 | 第12-13页 |
·早孕因子和它的目标受体 | 第13-14页 |
·免疫反应中的热休克蛋白10 | 第14-16页 |
·早孕因子的生物学鉴定方法:玫瑰花环抑制试验 | 第16-17页 |
·早孕因子在腹腔注射的时间进程 | 第17-18页 |
·早孕因子诱导基因限制淋巴因子 | 第18-19页 |
·早孕因子是胚胎一个基本的存活因子 | 第19-20页 |
·早孕因子是增生细胞和肿瘤细胞的存活因子和生长因子 | 第20-22页 |
·早孕因子的免疫学特性 | 第22-24页 |
·早孕因子和自身免疫性疾病 | 第24-25页 |
·早孕因子在临床中的应用 | 第25-26页 |
·胚胎监控 | 第25页 |
·超早孕检测 | 第25页 |
·肿瘤细胞的早期诊断 | 第25-26页 |
第二章 人早孕因子基因的克隆 | 第26-34页 |
·材料与方法 | 第26-30页 |
·质粒、菌种和试剂 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26页 |
·主要液体试剂 | 第26-27页 |
·人早孕因子基因的克隆 | 第27-30页 |
·结果 | 第30-32页 |
·EPF基因的克隆 | 第30-31页 |
·重组表达质粒的PCR和酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
·EPF基因cDNA序列 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第三章 人早孕因子基因的表达及纯化 | 第34-62页 |
·材料与方法 | 第34-49页 |
·质粒、菌种和试剂 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34-35页 |
·主要试剂 | 第35-39页 |
·主要试剂盒 | 第39页 |
·EPF基因的扩增 | 第39页 |
·重组质粒的构建 | 第39-43页 |
·重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
·重组质粒的提取和在表达菌株BL21的转化 | 第44页 |
·重组质粒pGEX6p-EPF和pET28-EPF的原核表达 | 第44-47页 |
·重组质粒pGEX6p-EPF最佳诱导条件的优化 | 第47页 |
·重组蛋白pGEX6p-EPF表达产物可溶性分析 | 第47-48页 |
·目的蛋白的纯化 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-58页 |
·EPF基因片段的PCR扩增结果 | 第49页 |
·重组表达质粒的PCR和酶切鉴定结果 | 第49-50页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第50-52页 |
·重组蛋白pGEX6p-EPF表达的时间优化 | 第52-53页 |
·诱导剂浓度对重组蛋白表达量的影响 | 第53-54页 |
·重组蛋白的可溶性表达 | 第54-56页 |
·Western blot检测结果 | 第56-57页 |
·玫瑰花环抑制实验结果分析 | 第57页 |
·表达蛋白的纯化 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-62页 |
·表达系统的选择 | 第59页 |
·关于表达载体的选择 | 第59-60页 |
·包涵体形成分析 | 第60页 |
·重组蛋白可溶性表达优化 | 第60-61页 |
·重组蛋白的纯化 | 第61-62页 |
第四章 早孕因子促生长细胞模型的初步建立 | 第62-69页 |
·材料与方法 | 第62-65页 |
·细胞和试剂 | 第62页 |
·主要仪器 | 第62页 |
·主要溶液配制 | 第62-63页 |
·各种细胞传代培养方法 | 第63-64页 |
·细胞计数法 | 第64-65页 |
·EPF促生长细胞模型的建立方法 | 第65页 |
·结果 | 第65-68页 |
·重组蛋白在Marc145细胞促生长作用 | 第65-66页 |
·重组蛋白在NS0细胞中的促生长作用 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
第五章 研究总结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
附录A:英文缩略词表(Abbreviations) | 第77-78页 |
作者简历 | 第78页 |
获得的奖励及主要荣誉 | 第78页 |
硕士在读期间撰写和已发表的论文 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |