| 导师简介 | 第1页 |
| 课题组成员 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 主要符号表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 1 IFITM5 基因 | 第13-15页 |
| ·家族成员 | 第13页 |
| ·功能及调控机制 | 第13-14页 |
| ·IFITM5 与Ⅴ型成骨不全 | 第14-15页 |
| 2 microRNA 与成骨细胞 | 第15-18页 |
| ·microRNA 生物学起源 | 第15-16页 |
| ·靶基因的预测和验证 | 第16页 |
| ·microRNA 与成骨细胞 | 第16-18页 |
| 第一章 靶向调控 IFITM5 基因的 microRNA 筛选 | 第18-36页 |
| 1 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·细胞 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18-20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-29页 |
| ·microRNA 生物信息学预测 | 第20-21页 |
| ·Saos-2 细胞培养与转染 | 第21页 |
| ·T-IFITM5-3'UTR 重组载体的构建 | 第21-24页 |
| ·pmirGLO-IFITM5-W-3'UTR 重组载体的构建 | 第24-25页 |
| ·pmirGLO-IFITM5-Mut-3'UTR 重组载体的构建 | 第25-26页 |
| ·荧光素酶活性的检测 | 第26-27页 |
| ·Western blotting 检测 IFITM5 蛋白表达 | 第27-29页 |
| 2 结果 | 第29-33页 |
| ·生物信息学预测结果 | 第29页 |
| ·扩增结果 | 第29-30页 |
| ·重组载体的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·pmirGLO-IFITM5-W-3'UTR 酶切验证 | 第30页 |
| ·pmirGLO-IFITM5-Mut-3'UTR 酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组载体的测序鉴定 | 第31页 |
| ·荧光素酶活性的检测 | 第31-33页 |
| ·Western blotting 检测 IFITM5 蛋白表达 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| 第二章 miR-762 对 Saos-2 细胞矿化的功能研究 | 第36-44页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·细胞 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-40页 |
| ·Saos-2 细胞培养与转染 | 第37页 |
| ·miR-762 定量检测 | 第37-38页 |
| ·茜素红染色 | 第38-39页 |
| ·ALP、OCN、Runx2 定量检测 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-42页 |
| ·Saos-2 细胞转染前后 miR-762 的表达变化 | 第40-41页 |
| ·茜素红染色法检测 Saos-2 细胞的矿化程度 | 第41页 |
| ·Real-time PCR 检测各组 Runx2、ALP、OCN 的 mRNA 的表达 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 综述 | 第53-62页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 在校期间发表论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
