| 目录 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 实验技术路线 | 第10-11页 |
| 第一部分 百日咳杆菌气管定植因子（TcfA）的表达和纯化 | 第11-30页 |
| 1.实验材料 | 第11-15页 |
| 2.实验方法 | 第15-22页 |
| 3.实验结果 | 第22-27页 |
| ·TcfA 基因的扩增 | 第22页 |
| ·pET30a-TcfA 重组质粒的酶切鉴定 | 第22页 |
| ·TcfA 基因的测序结果 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第23页 |
| ·重组蛋白表达形式的鉴定及纯化 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白浓度的测定 | 第24页 |
| ·重组蛋白小鼠多克隆抗体效价的测定 | 第24-26页 |
| ·重组蛋白 Weatern-Blot 鉴定结果 | 第26-27页 |
| 讨论 | 第27-29页 |
| 小结 | 第29-30页 |
| 第二部分 TcfA 蛋白的功能研究 | 第30-51页 |
| 1.实验材料 | 第31-33页 |
| 2.实验方法 | 第33-40页 |
| 3.实验结果 | 第40-48页 |
| ·TcfA 表达于 pET30a-TcfA 重组大肠杆菌膜表面 | 第40页 |
| ·荧光标记的细菌粘附于 Hep-2、HeLa、CHO 细胞 | 第40-41页 |
| ·细菌粘附 Hep-2、HeLa、CHO 细胞（CFU 定量试验） | 第41-42页 |
| ·细菌粘附 ELISA 实验 | 第42-43页 |
| ·TcfA 蛋白免疫荧光 | 第43-44页 |
| ·TcfA 蛋白竞争抑制 pET30a-TcfA 大肠杆菌粘附细胞定量实验 | 第44-45页 |
| ·TcfA 小鼠多抗封闭抑制重组大肠杆菌粘附 HeLa 细胞实验 | 第45-46页 |
| ·RGD 功能的验证 | 第46页 |
| ·pET30a-TcfA 侵袭上皮细胞实验 | 第46-47页 |
| ·FHA-PRN-双缺失 CS 菌株及 CS 菌株的体外粘附力的比较 | 第47-48页 |
| 讨论 | 第48-50页 |
| 小结 | 第50-51页 |
| 第三部分 TcfA 蛋白与 HeLa 细胞表面受体相互作用的探究 | 第51-65页 |
| 1. 实验材料 | 第52-53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-58页 |
| 3. 实验结果 | 第58-61页 |
| ·目的基因的扩增 | 第58页 |
| ·PGEX-4t-1-TcfA 重组质粒的构建和鉴定 | 第58-59页 |
| ·测序 | 第59页 |
| ·GST-TcfA 融合蛋白的表达 | 第59页 |
| ·重组 GST-TcfA 融合蛋白与 HeLa 细胞裂解液相互作用结果 | 第59-60页 |
| ·液质联用（LC-MS）鉴定结果 | 第60-61页 |
| 讨论 | 第61-64页 |
| 小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 文献综述 | 第68-77页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 缩略词表 | 第77-79页 |
| 附录一 | 第79-80页 |
| 附录二 | 第80-81页 |
| 附录三 | 第81-85页 |
| 致谢 | 第85-88页 |
