| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-26页 |
| ·环形泰勒虫病原学 | 第13-16页 |
| ·环形泰勒虫的分类地位 | 第13页 |
| ·环形泰勒虫的生活史 | 第13-15页 |
| ·环形泰勒虫的致病机理 | 第15-16页 |
| ·环形泰勒虫抗原性基因的研究进展 | 第16-18页 |
| ·环形泰勒虫子孢子表面抗原蛋白（SPAG-1） | 第16页 |
| ·裂殖子表面抗原（Tams） | 第16-17页 |
| ·环形泰勒虫裂殖体表面抗原（TaSP） | 第17页 |
| ·环形泰勒虫分泌到宿主细胞质中的蛋白（TaSE） | 第17-18页 |
| ·热休克蛋白 70（HSP70） | 第18页 |
| ·环形泰勒虫病 | 第18-20页 |
| ·感染环形泰勒虫的牛淋巴细胞系的分离 | 第20-21页 |
| ·环形泰勒虫的入侵机制 | 第21-22页 |
| ·环形泰勒虫转化牛淋巴细胞机制的研究 | 第22-23页 |
| ·环形泰勒虫微线体-棒状体相关蛋白的研究概况 | 第23-24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第2章 环形泰勒虫 p104 基因全长序列的 hiTAIL-PCR 扩增 | 第26-35页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·虫种来源及复苏 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第27页 |
| ·hiTAIL-PCR 扩增 | 第27-28页 |
| ·目标序列的鉴定和测序分析 | 第28-30页 |
| ·生物信息学分析 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·PCR 扩增情况 | 第30页 |
| ·测序结果分析 | 第30-31页 |
| ·蛋白信号肽和糖基化位点的预测 | 第31页 |
| ·蛋白跨膜区的预测 | 第31-32页 |
| ·棒状体蛋白疏水性的预测 | 第32页 |
| ·棒状体蛋白抗原肽的预测 | 第32-33页 |
| ·棒状体蛋白抗原肽的预测 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第3章 环形泰勒虫 p104 蛋白的原核表达和亚细胞定位分析 | 第35-47页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·细胞株及实验动物 | 第35页 |
| ·主要实验试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-41页 |
| ·TaIM 细胞系的培养和该细胞系 cDNA 的反转录 | 第36-37页 |
| ·P104 蛋白表达质粒的构建和验证 | 第37-38页 |
| ·P104 蛋白的表达和兔抗 p104 多克隆抗体的制备 | 第38-39页 |
| ·抗 p104 多克隆抗体的 Western-blot 分析 | 第39-40页 |
| ·间接免疫荧光最佳工作条件的摸索 | 第40页 |
| ·亚细胞定位 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·环形泰勒虫总 RNA 的提取和第一条链 cDNA 合成 | 第41页 |
| ·P104 表达载体的克隆和验证 | 第41页 |
| ·P104 蛋白的诱导表达和抗 p104 多克隆抗体的制备 | 第41-42页 |
| ·Western-bolt 结果 | 第42-43页 |
| ·间接免疫荧光最佳工作条件的确定 | 第43页 |
| ·激光共聚焦分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第4章 TaIM 细胞系酵母双杂交文库的构建 | 第47-55页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·主要的试剂和材料 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·TaIM 细胞系 mRNA 的纯化 | 第48页 |
| ·第一条链 cDNA 的合成和长距离 PCR 扩增 | 第48-49页 |
| ·酵母感受态细胞的制作和文库的构建 | 第49-51页 |
| ·酵母双杂交文库的评价 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-53页 |
| ·样品总 RNA 的提取和 mRNA 的纯化 | 第51页 |
| ·双链 cDNA 的合成和小片段的去除 | 第51-52页 |
| ·文库质量鉴定 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 P104 诱饵质粒的构建 | 第55-61页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·虫种及主要试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·P104 诱饵质粒的构建和鉴定 | 第56页 |
| ·酵母感受态细胞的制备和转化 | 第56-57页 |
| ·诱饵菌株的 Western blot 验证 | 第57页 |
| ·重组诱饵质粒的自激活性和毒性检测 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-59页 |
| ·P104 重组诱饵质粒得得构建及鉴定 | 第58页 |
| ·诱饵菌株表达蛋白的 Western blot 检测 | 第58-59页 |
| ·重组诱饵质粒的毒性和自激活性检测 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第6章 酵母双杂交筛选与 P104 蛋白相互作用的蛋白 | 第61-70页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·主要试剂 | 第61-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| ·酵母双杂交对照试验 | 第62页 |
| ·酵母诱饵菌株的准备 | 第62页 |
| ·酵母文库的准备 | 第62-63页 |
| ·酵母文库与诱饵酵母的杂交 | 第63页 |
| ·酵母双杂交结合效率的计算 | 第63页 |
| ·文库质粒的拯救和阳性克隆的验证 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-66页 |
| ·酵母杂交杂交对照试验 | 第64-65页 |
| ·酵母杂交杂交效率的计算 | 第65页 |
| ·酵母文库与诱饵酵母的准备 | 第65页 |
| ·酵母杂交阳性克隆的共转化验证 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-70页 |
| 第7章 全文结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 作者简介 | 第82页 |
