| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-21页 |
| 符号说明 | 第21-23页 |
| 文献综述 | 第23-28页 |
| 一.幽门螺杆菌及其毒力因子CagA的研究进展 | 第23-25页 |
| 二.肿瘤抑制基因Runx3的主要研究进展 | 第25-27页 |
| 三.幽门螺杆菌及其球形体的研究进展 | 第27-28页 |
| 第一部分 幽门螺杆菌CagA对Runx3基因表达的调控 | 第28-53页 |
| 1.实验材料 | 第28-34页 |
| ·主要试剂和药品 | 第28-33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.实验方法 | 第34-42页 |
| ·GES-1细胞的培养 | 第34页 |
| ·细胞转染 | 第34页 |
| ·质粒DNA的转化,提取及酶切鉴定 | 第34-37页 |
| ·RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR检测 | 第38-39页 |
| ·Western blot检测 | 第39-42页 |
| 3.实验结果 | 第42-50页 |
| ·WT-CagA/pcDNA3.1与PR-CagA/pcDNA3.1质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·WT-CagA/pcDNA3.1及PR-CagA/peDNA3.1转染GES-1细胞后CagA蛋白的表达 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR分析幽门螺杆菌WT-CagA对Runx3基因转录的调控 | 第44-45页 |
| ·WT-CagA在蛋白水平对Runx3基因表达的调控 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR分析PR-CagA对Runx3基因转录的调控 | 第46-47页 |
| ·PR-CagA在蛋白水平对Runx3基因表达调控 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR分析WT-CagA对CyclinD1及Bim基因转录的调控 | 第48-50页 |
| ·WT-CagA在蛋白水平对CyclinD1基因表达的调控 | 第50页 |
| 4.讨论 | 第50-53页 |
| 第二部分 幽门螺杆菌CagA调节Runx3表达的分子机制研究 | 第53-72页 |
| 1.实验材料 | 第53-54页 |
| ·主要试剂和药品 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| 2.实验方法 | 第54-64页 |
| ·GES-1细胞的培养 | 第54页 |
| ·甲基化特异PCR检测 | 第54-57页 |
| ·Runx3启动子荧光素酶报告质粒载体的构建 | 第57-63页 |
| ·荧光素酶报道基因重组质粒的转染 | 第63页 |
| ·双荧光素酶活性检测 | 第63-64页 |
| 3.实验结果 | 第64-68页 |
| ·甲基化特异PCR结果 | 第64-65页 |
| ·PCR扩增Runx3基因5’上游1150bp启动子片段及其T克隆鉴定 | 第65页 |
| ·pGL_3-1150bp启动子质粒的鉴定及测序 | 第65-66页 |
| ·pGL_3-1150bp启动子转染GES-1细胞及双荧光素酶活性测定 | 第66-68页 |
| 4.讨论 | 第68-71页 |
| 第一、二部分总结 | 第71-72页 |
| 第三部分 幽门螺杆菌及其球形体感染胃粘膜上皮细胞后的基因表达谱的研究 | 第72-94页 |
| 1.实验材料 | 第72页 |
| ·主要试剂和药品 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| 2.实验方法 | 第72-78页 |
| ·GES-1细胞的培养 | 第72页 |
| ·幽门螺杆菌的培养及球形体的诱导 | 第72-73页 |
| ·GES-1细胞与幽门螺杆菌的共培养 | 第73页 |
| ·扫描电镜观察幽门螺杆菌及其球形体与GES-1细胞的粘附 | 第73页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第73页 |
| ·RNA的提取 | 第73-74页 |
| ·cDNA微阵列分析 | 第74-76页 |
| ·RT-PCR检测 | 第76-78页 |
| 3.实验结果 | 第78-90页 |
| ·扫描电镜观察到的幽门螺杆菌与GES-1细胞的粘附情况 | 第78-79页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡结果 | 第79-80页 |
| ·所提取RNA的质量控制 | 第80-81页 |
| ·cDNA微阵列结果 | 第81-84页 |
| ·RT-PCR结果 | 第84-90页 |
| 4.讨论 | 第90-93页 |
| 第三部分总结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 博士在读期间发表的论文目录 | 第104-105页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第105-106页 |
| 外文论文 | 第106-112页 |
