| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-17页 |
| 符号说明 | 第17-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-35页 |
| ·耐盐相关基因的研究进展 | 第18-31页 |
| ·耐盐相关信号转导基因 | 第19-23页 |
| ·Ca~(2+)信号 | 第19-21页 |
| ·MAPK参与的信号转导途径 | 第21-22页 |
| ·磷脂酶信号转导系统 | 第22-23页 |
| ·其它蛋白激酶参与的信号转导途径 | 第23页 |
| ·离子转运及离子渗透平衡相关基因 | 第23-26页 |
| ·Na~+渗透平衡调节 | 第23-25页 |
| ·K~+渗透平衡调节 | 第25页 |
| ·Ca~(2+)渗透平衡调节 | 第25页 |
| ·盐胁迫条件下的Cl~-离子渗透平衡调节 | 第25-26页 |
| ·渗透保护物质(相溶性溶质)的合成和水通道蛋白 | 第26-27页 |
| ·渗透保护物质 | 第26页 |
| ·胚胎晚期丰富蛋白(LEA) | 第26-27页 |
| ·植物水通道蛋白 | 第27页 |
| ·胁迫相关转录因子及顺式作用元件 | 第27-30页 |
| ·胁迫相关转录因子 | 第27-29页 |
| ·胁迫相关顺式作用元件 | 第29-30页 |
| ·细胞抗氧化及活性氧清除相关基因 | 第30-31页 |
| ·盐芥的研究进展 | 第31-33页 |
| ·盐芥和拟南芥在胁迫条件下转录物组变化的比较 | 第31页 |
| ·离子运输和渗透平衡 | 第31-32页 |
| ·盐胁迫条件下生化反应 | 第32页 |
| ·盐芥正成为耐盐耐旱研究的模式植物 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 盐芥H~+-PPase基因的克隆和功能分析 | 第35-93页 |
| ·H~+-PPase研究进展 | 第35-39页 |
| ·各种阳离子对H~+-PPase活性的影响 | 第35-36页 |
| ·H~+-PPase基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·H~+-PPase基因表达和活性水平的调控 | 第37-39页 |
| ·实验材料和方法 | 第39-64页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·菌株及其质粒载体 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-64页 |
| ·盐芥总RNA的提取 | 第40-41页 |
| ·mRNA的分离 | 第41页 |
| ·盐芥cDNA文库构建 | 第41-47页 |
| ·盐芥小片段基因组文库的构建 | 第47-49页 |
| ·H~+-PPase基因cDNA片段的分离 | 第49-50页 |
| ·盐芥cDNA文库筛选 | 第50-52页 |
| ·盐芥小片段基因组文库筛选 | 第52-53页 |
| ·拟南芥H~+-PPase基因AVP1的克隆 | 第53页 |
| ·Southern blot分析 | 第53-54页 |
| ·Northern blot分析 | 第54-55页 |
| ·Real-time RT-PCR分析H~+-PPase基因的表达模式 | 第55-56页 |
| ·酵母突变体功能互补分析 | 第56-57页 |
| ·各种质粒的重组和鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的农杆菌转化 | 第58页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第58-59页 |
| ·转基因烟草的分子生物学检测 | 第59-60页 |
| ·转基因烟草H~+-PPase酶活性的测定 | 第60-61页 |
| ·转基因烟草的耐盐性测试 | 第61-63页 |
| ·转基因烟草的耐旱性测试 | 第63-64页 |
| ·实验结果 | 第64-90页 |
| ·盐芥RNA的提取和cDNA合成 | 第64-65页 |
| ·盐芥cDNA文库的滴度、重组率及平均插入片段大小 | 第65-66页 |
| ·盐芥基因组文库 | 第66页 |
| ·盐芥H~+-PPase cDNA片段的克隆 | 第66-67页 |
| ·盐芥H~+-PPase cDNA基因的克隆 | 第67页 |
| ·盐芥Tsvp基因的序列分析 | 第67-70页 |
| ·盐芥TsVP基因启动子序列的克隆和生物信息学分析 | 第70-74页 |
| ·盐芥TsVP基因的Southern blot分析 | 第74-75页 |
| ·盐胁迫条件下H~+-PPase基因在拟南芥和盐芥中的表达模式 | 第75-76页 |
| ·TsVP和AVP1在酵母突变体enal中的功能比较 | 第76-78页 |
| ·TsVP和AVP1转基因烟草的获得 | 第78-79页 |
| ·V-ATPase和H~+-PPase的活性检测 | 第79-80页 |
| ·转基因烟草的溶质渗透势 | 第80页 |
| ·转基因烟草耐盐性分析 | 第80-86页 |
| ·TsVP和AVP1转基因烟草叶盘的耐盐性 | 第80-81页 |
| ·盐胁迫条件下烟草叶肉原生质体活力测试 | 第81-82页 |
| ·TsVP和AVP1转基因烟草在盐胁迫条件下生物量的变化 | 第82-83页 |
| ·转基因烟草叶盘有较快的Na~+吸收速率 | 第83页 |
| ·烟草组织中的离子含量和细胞膜损伤程度 | 第83-86页 |
| ·TsVP转基因烟草的耐旱性分析 | 第86-90页 |
| ·烟草种子萌发实验 | 第86页 |
| ·干旱胁迫条件下烟草的形态变化和相对水含量 | 第86-87页 |
| ·可溶性总糖、游离氨基酸和溶质渗透势变化 | 第87-89页 |
| ·干旱胁迫对叶片细胞膜损伤和MDA含量的影响 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-93页 |
| 第三章 盐芥Na~+依赖性磷转运体的克隆及酵母中的异源表达 | 第93-123页 |
| ·植物磷转运体的研究进展 | 第93-96页 |
| ·Pht1基因家族 | 第93-94页 |
| ·Pht2基因家族 | 第94页 |
| ·线粒体中的Pht3基因家族 | 第94页 |
| ·植物细胞内质体中的磷转运体基因 | 第94-95页 |
| ·植物中的Na~+/Pi转运体 | 第95-96页 |
| ·材料和方法 | 第96-104页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因的克隆 | 第96-98页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因片段的克隆 | 第96页 |
| ·RACE方法克隆盐芥Na~+依赖性磷转运体基因全长序列 | 第96-98页 |
| ·全长cDNA序列的获得和生物信息学分析 | 第98页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体启动子序列的克隆 | 第98页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因的表达模式分析 | 第98-99页 |
| ·Na~+依赖性磷转运体基因酵母表达载体的构建 | 第99页 |
| ·Na~+依赖性磷转运体在酵母和拟南芥中亚细胞定位载体的构建 | 第99-100页 |
| ·拟南芥中亚细胞定位载体的构建 | 第99页 |
| ·酵母中亚细胞定位载体的构建 | 第99-100页 |
| ·Na~+依赖性磷转运体启动子序列的生物信息学分析和系列缺失植物表达载体的构建 | 第100-101页 |
| ·盐芥和拟南芥的转化和筛选 | 第101页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第101页 |
| ·转基因拟南芥植株的筛选 | 第101页 |
| ·酵母遗传转化及转基因酵母的PCR筛选 | 第101-102页 |
| ·Na~+依赖性磷转运体在酵母中异源表达的磷吸收实验 | 第102-104页 |
| ·酵母YPD低磷培养基的配制 | 第102-103页 |
| ·酵母在低磷培养基上的培养 | 第103页 |
| ·酵母生长速率和酸性磷酸酶活性的测定 | 第103-104页 |
| ·酵母无机磷酸盐吸收实验 | 第104页 |
| ·实验结果 | 第104-120页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因的克隆 | 第104-105页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因的生物信息学分析 | 第105-107页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体蛋白结构的生物信息学分析 | 第107-108页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因启动子序列的克隆及生物信息学分析 | 第108-111页 |
| ·启动子系列缺失突变体:GUS植物表达载体的构建 | 第111-113页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因的表达模式 | 第113-114页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体的植物细胞亚细胞定位 | 第114-115页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体基因在酵母中的表达 | 第115-120页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第115页 |
| ·酵母在低磷培养条件下的生长速率和酸性磷酸酶活性 | 第115-117页 |
| ·pH对盐芥Na~+依赖性磷转运体活性的影响 | 第117-119页 |
| ·盐芥Na~+依赖性磷转运体Km的测定 | 第119-120页 |
| ·讨论 | 第120-123页 |
| 第四章 总结和展望 | 第123-128页 |
| 参考文献 | 第128-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第143页 |
