摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第一章 前 言 | 第15-56页 |
1. 贝类组织细胞的特征及其体外培养的研究进展 | 第20-43页 |
·贝类胚胎和幼虫细胞的特征及其体外培养进展 | 第21-28页 |
·贝类胚胎发育的特征 | 第21-22页 |
·贝类幼虫细胞的分化特征和基因表达特征 | 第22-23页 |
·环境因素对胚胎和幼虫发育的影响 | 第23-24页 |
·贝类胚胎和幼虫细胞的体外培养研究成果 | 第24-28页 |
·细胞解离条件的摸索 | 第25页 |
·除菌方式 | 第25-26页 |
·培养基优化 | 第26-27页 |
·促贴壁因子 | 第27页 |
·体外细胞存活能力和分裂能力 | 第27页 |
·细胞分化研究 | 第27-28页 |
·贝类血淋巴细胞的特征及其体外培养进展 | 第28-31页 |
·贝类血淋巴细胞的分布 | 第28页 |
·贝类血淋巴细胞的分类和形态特征 | 第28-29页 |
·贝类血淋巴细胞的功能和主要成分 | 第29-30页 |
·贝类血淋巴细胞的体外培养研究进展 | 第30-31页 |
·贝类鳃细胞的特征及其体外培养进展 | 第31-33页 |
·贝类鳃丝和鳃细胞的组织学特征 | 第31页 |
·贝类鳃细胞的体外培养进展 | 第31-33页 |
·贝类心脏细胞的特征及其体外培养进展 | 第33-34页 |
·贝类心脏的生物学特征 | 第33页 |
·贝类心脏细胞的体外培养进展 | 第33-34页 |
·贝类外套膜细胞的特征及其体外培养进展 | 第34-36页 |
·贝类外套膜的生物学特征 | 第34页 |
·贝类外套膜细胞的体外培养进展 | 第34-36页 |
·贝类生殖腺细胞的特征及其体外培养进展 | 第36-37页 |
·贝类生殖腺的生物学特征简述 | 第36页 |
·贝类生殖腺细胞的体外培养进展 | 第36-37页 |
·贝类其他组织细胞的体外培养进展 | 第37-43页 |
·贝类消化腺细胞体外培养进展 | 第37页 |
·贝类足细胞的体外培养进展 | 第37页 |
·贝类神经细胞的体外培养进展 | 第37页 |
·贝类肿瘤细胞的生物学特征和体外培养进展 | 第37-43页 |
2. 其他海洋无脊椎动物细胞培养研究概况 | 第43-49页 |
·海绵动物(Spongia) | 第44-45页 |
·腔肠动物门(Cnidaria) | 第45-46页 |
·节肢动物门-甲壳纲(Crustace) | 第46-47页 |
·棘皮动物门(Echinodermata) | 第47-49页 |
3. 体外转化构建细胞系的研究概述 | 第49-54页 |
·物理方法诱导 | 第49-50页 |
·化学方法诱导 | 第50-51页 |
·生物方法诱导 | 第51-54页 |
·细胞融合 | 第51-52页 |
·病毒感染 | 第52页 |
·致癌基因的转导 | 第52-54页 |
4. 本论文的研究意义和目的 | 第54-56页 |
第二章 栉孔扇贝担轮幼虫细胞连续培养体系的建立及特征 | 第56-85页 |
1. 材料和方法 | 第56-64页 |
·材料 | 第56-59页 |
·实验方法 | 第59-64页 |
·栉孔扇贝担轮幼虫细胞的原代培养 | 第59-61页 |
·人工诱导雌雄配子排放 | 第59-60页 |
·人工授精 | 第60页 |
·幼虫的清洗 | 第60-61页 |
·担轮幼虫细胞的解离 | 第61页 |
·栉孔扇贝担轮幼虫细胞的接种 | 第61页 |
·细胞培养体系的优化 | 第61-62页 |
·细胞的传代培养、冻存与复苏 | 第62页 |
·体外培养的栉孔扇贝担轮细胞的特征分析 | 第62-64页 |
·细胞鉴定 | 第62页 |
·细胞化学染色 | 第62-63页 |
·流式细胞仪检测 | 第63页 |
·担轮幼虫体外培养细胞的整体原位杂交 | 第63-64页 |
·担轮幼虫个体或体外培养细胞的免疫组化 | 第64页 |
2. 实验结果 | 第64-80页 |
·担轮幼虫细胞解离方法的筛选 | 第64-66页 |
·担轮幼虫细胞体外培养的培养基优化 | 第66-69页 |
·FBS 最适宜添加浓度的确定 | 第66页 |
·栉孔扇贝血清最适添加浓度的确定 | 第66-67页 |
·栉孔扇贝卵黄提取液最适添加浓度的确定 | 第67页 |
·生长因子对体外培养栉孔扇贝担轮幼虫细胞的影响 | 第67-69页 |
·担轮幼虫继代培养细胞的特征比较 | 第69-74页 |
·栉孔扇贝传代细胞冻存复苏后的生长状态 | 第74页 |
·传代细胞的功能基因表达 | 第74-76页 |
·piwi 基因的原位表达 | 第74-75页 |
·phb2 基因的原位表达 | 第75-76页 |
·传代细胞的分化特征 | 第76-80页 |
·肌细胞的分化 | 第76-78页 |
·神经细胞的分化 | 第78-80页 |
3. 讨论 | 第80-85页 |
·栉孔扇贝担轮幼虫细胞体外培养方法的建立 | 第80-82页 |
·担轮幼虫的细胞类型以及体外培养潜力 | 第82-84页 |
·担轮幼虫细胞在体内外的特征比较 | 第84页 |
·栉孔扇贝担轮幼虫细胞体外培养体系的应用价值 | 第84-85页 |
第三章 栉孔扇贝成体组织细胞体外培养体系的建立和特征 | 第85-110页 |
1. 材料和方法 | 第85-91页 |
·材料 | 第85-86页 |
·实验方法 | 第86-91页 |
·栉孔扇贝的无菌处理 | 第86页 |
·栉孔扇贝成体组织细胞的原代培养 | 第86-87页 |
·培养体系的优化 | 第87页 |
·栉孔扇贝成体组织细胞的继代培养 | 第87-88页 |
·栉孔扇贝成体组织细胞的体外诱导转化 | 第88-91页 |
·构建 SV40LT 与报告基因 EGFP 共表达质粒 | 第88-89页 |
·pSV40LT-IRES-EGFP 重组真核表达质粒转化人的 293FT 细胞 | 第89页 |
·重组慢病毒颗粒的包装 | 第89页 |
·病毒滴度的检测 | 第89-90页 |
·重组慢病毒感染栉孔扇贝成体组织体外培养细胞 | 第90-91页 |
2. 实验结果 | 第91-103页 |
·体外培养细胞培养条件的优化 | 第91-93页 |
·体外培养细胞的形态学特征 | 第93-98页 |
·体外原代培养细胞的迁移和贴壁特性 | 第98-99页 |
·血淋巴细胞和鳃细胞的传代培养 | 第99-100页 |
·栉孔扇贝成体组织细胞的体外转化 | 第100-103页 |
·pSV40LT-IRES-EGFP 质粒的构建 | 第100-101页 |
·pSV40LT-IRES-EGFP 质粒的表达 | 第101-102页 |
·SV40LT-IRES-EGFP 慢病毒颗粒的包装 | 第102页 |
·重组慢病毒的滴度检测 | 第102-103页 |
·使用重组慢病毒感染体外培养的原代栉孔扇贝血淋巴 | 第103页 |
·多种转基因方法效果比较 | 第103页 |
3. 讨论 | 第103-110页 |
·栉孔扇贝成体组织细胞的体外培养方法 | 第103-107页 |
·栉孔扇贝成体组织细胞培养体系的应用价值 | 第107-108页 |
·利用栉孔扇贝体外培养细胞进行转基因研究的可行性 | 第108-110页 |
总结 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-129页 |
致谢 | 第129-131页 |
个人简介 | 第131-132页 |
学术成果 | 第132-133页 |