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水葫芦谷氨酰胺合成酶基因的克隆及表达

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-11页
CONTENT第11-15页
第一章 绪论第15-25页
   ·植物氮素营养第15-16页
   ·谷氨酰胺合成酶的研究现状第16-21页
     ·植物谷氨酰胺合成酶的种类及定位第16-17页
     ·植物的GS表达第17-18页
     ·GS对植物生长和发育的影响第18-19页
     ·外因对GS的调节第19-21页
       ·氮营养对GS的调节第19页
       ·糖类与氨基酸对GS的调节第19页
       ·镉对植物GS的调节第19-20页
       ·有机抑制剂对植物GS的调节第20页
       ·干旱对GS的调节第20-21页
       ·植物激素对GS的调节第21页
   ·水葫芦概况第21-23页
     ·水葫芦概述第21-22页
     ·国内外关于水葫芦在水体修复中的研究进展第22-23页
   ·研究目的、意义及研究内容第23-25页
     ·研究目的、意义第23-24页
     ·研究内容第24-25页
第二章 水葫芦三种谷氨酰胺合成酶基因全长的克隆第25-53页
   ·引言第25页
   ·材料与试剂第25-29页
     ·植物材料第25-26页
     ·菌种第26页
     ·酶与试剂盒第26页
     ·化学试剂第26页
     ·培养基第26页
     ·引物第26-28页
     ·DNA测序第28页
     ·仪器设备第28-29页
   ·主要试验方法第29-40页
     ·RNA的提取第29页
       ·准备工作第29页
       ·具体步骤第29页
     ·EcGS1 cDNA的克隆第29-39页
       ·用RT-PCR的方法获得EcGS1保守片段第29-32页
       ·大肠杆菌感受态细胞制备第32页
       ·连接转化、测序第32-33页
       ·EcGS1基因5’RACE第33-37页
       ·EcGS1基因3’RACE第37-39页
       ·EcGS1基因cDNA全长克隆第39页
     ·EcGS1基因序列分析第39-40页
   ·结果分析第40-51页
     ·RNA电泳图第40页
     ·EcGS1保守片段扩增产物电泳图第40-41页
     ·EcGS1 5’RACE产物克隆及测序第41-42页
     ·EcGS1 3’RACE产物克隆及测序第42-44页
     ·EcGS1基因cDNA全长获得第44-45页
     ·EcGS1基因序列分析第45-51页
       ·EcGS1基因所编码蛋白的氨基酸序列、保守结构域及亚细胞定位第45-46页
       ·EcGS1基因编码的氨基酸序列与其他物种相似性比较及进化树第46-51页
   ·讨论第51-53页
第三章 不同氮素条件下水葫芦根和叶中三种谷氨酰胺合成酶基因的转录第53-63页
   ·引言第53页
   ·材料与方法第53-57页
     ·实验材料第53-54页
       ·植物材料第53页
       ·试剂第53页
       ·引物第53-54页
       ·主要仪器第54页
     ·实验方法第54-57页
       ·Actin基因片段的克隆第54-55页
       ·荧光定量PCR第55-57页
   ·结果分析第57-62页
     ·Actin基因保守片段第57-58页
     ·荧光定量结果分析第58-62页
       ·不同氮素条件下水葫芦根部EcGS1a、EcGS1b和EcGS1c基因的转录第58-60页
       ·不同氮素条件下水葫芦叶中EcGS1a、EcGS1b和EcGS1c基因的转录第60-62页
   ·讨论第62-63页
第四章 不同氮素条件下水葫芦叶和根中谷氨酰胺合成酶活性研究第63-69页
   ·引言第63页
   ·材料与方法第63-65页
     ·材料第63-64页
       ·植物材料第63页
       ·试剂第63-64页
       ·主要仪器第64页
     ·实验方法第64-65页
       ·GS的提取操作第64页
       ·GS活性的检测第64-65页
       ·数据处理第65页
   ·实验结果与分析第65-67页
     ·不同氮素条件下水葫芦根部GS活性的比较第65-66页
     ·不同氮素条件下水葫芦叶GS活性的比较第66-67页
   ·讨论第67-69页
结论第69-70页
参考文献第70-77页
攻读硕士学位期间发表的论文第77-79页
致谢第79-80页
附录第80-82页
 附录1 GS1保守序列片段a BLAST比对第80页
 附录2 GS1保守序列片段b BLAST比对第80-81页
 附录3 GS1保守序列片段c BLAST比对第81-82页
 附录4 Actin保守序列片段BLAST比对第82页

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