| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第10-24页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1 番木瓜病毒 | 第11-16页 |
| ·番木瓜环斑病毒 | 第12-13页 |
| ·番木瓜畸形花叶病毒 | 第13-15页 |
| ·番木瓜花叶病毒 | 第15-16页 |
| 2 番木瓜病毒检测技术 | 第16-21页 |
| ·生物学检测法 | 第16页 |
| ·电子显微镜检测法 | 第16-18页 |
| ·电镜超薄切片法 | 第17页 |
| ·电镜负染检测法 | 第17页 |
| ·免疫电镜检测法 | 第17-18页 |
| ·免疫学检测法 | 第18-19页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第18页 |
| ·快速免疫滤纸法（Rapid immuno-filter paper assay, RIPA) | 第18-19页 |
| ·免疫扩散检测法 | 第19页 |
| ·分子生物学检测法 | 第19-21页 |
| ·核酸杂交技术 | 第19-20页 |
| ·双链RNA电泳技术 | 第20页 |
| ·聚合酶链式反应技术 | 第20-21页 |
| 3 番木瓜病毒的防治 | 第21-22页 |
| ·常规检疫 | 第21页 |
| ·农业防治 | 第21页 |
| ·交叉保护 | 第21-22页 |
| ·基因工程 | 第22页 |
| 4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 5 技术路线 | 第23-24页 |
| 下篇 研究内容 | 第24-51页 |
| 第一章 材料与方法 | 第24-38页 |
| 1 试验材料 | 第24-27页 |
| ·基因来源 | 第24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·主要试剂和试验材料 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·载体和图谱 | 第25-26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·扩增引物 | 第26页 |
| ·检测引物 | 第26页 |
| ·主要培养基及试剂 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-38页 |
| ·PRSV CP、PLDMV CP和PaMV CP基因扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR产物回收 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的双酶切及纯化 | 第29页 |
| ·构建表达载体 | 第29-30页 |
| ·表达载体转化到感受态细胞 | 第30页 |
| ·菌液PCR及测序测定 | 第30-31页 |
| ·菌液的保存和质粒提取 | 第31-32页 |
| ·双酶切及测序鉴定 | 第32页 |
| ·转化表达菌 | 第32页 |
| ·CP蛋白的诱导表达 | 第32页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE分析 | 第32-33页 |
| ·诱导蛋白的可溶性分析、纯化及复性 | 第33-34页 |
| ·纯化蛋白浓度的测定 | 第34页 |
| ·抗血清的制备 | 第34页 |
| ·ID-ELISA法测定抗血清效价 | 第34-35页 |
| ·Western blot鉴定 | 第35页 |
| ·感病样品的RT-PCR鉴定 | 第35-37页 |
| ·总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·反转录合成cDNA | 第36页 |
| ·PCR检测PLDMV、PRSV和PaMV | 第36-37页 |
| ·交叉反应的检测 | 第37页 |
| ·田间样品的ELISA检测 | 第37页 |
| ·ID-ELISA检测结果的抽查验证 | 第37-38页 |
| 第二章 结果分析 | 第38-47页 |
| 1 PRSV CP、PLDMV CP和PAMV CP基因的扩增 | 第38页 |
| 2 菌液PCR和测序鉴定 | 第38-39页 |
| 3 重组质粒的双酶切鉴定 | 第39页 |
| 4 重组蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
| 5 蛋白的可溶性分析 | 第40-41页 |
| 6 蛋白的纯化及定量 | 第41-42页 |
| 7 抗血清的制备和效价的测定 | 第42页 |
| 8 WESTERN BLOT结果分析 | 第42-43页 |
| 9 感病样品的RT-PCR检测 | 第43-44页 |
| 10 交叉反应的检测 | 第44页 |
| 11 田间样品的检测 | 第44-45页 |
| 12 ID-EUSA检测结果的验证 | 第45-47页 |
| 第三章 讨论 | 第47-50页 |
| 1 番木瓜病毒的分布情况 | 第47页 |
| 2 不同检测方法的分析 | 第47-48页 |
| 3 基因工程获制备抗血清 | 第48-49页 |
| ·外壳蛋白制备抗血清 | 第48页 |
| ·病毒颗粒与表达蛋白制备抗血清的差异 | 第48-49页 |
| 4 ID-ELISA检测方法的建立 | 第49页 |
| 5 抗血清的应用前景 | 第49-50页 |
| 第四章 主要结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 缩写词及英汉对照 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
