| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌研究概述 | 第13-16页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌的发生与危害 | 第13-14页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌的生物学特征 | 第14-15页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌致病机理 | 第15-16页 |
| ·植物病原真菌 Ras 蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| ·基因功能的研究方法 | 第17-21页 |
| ·生物信息学分析方法 | 第18页 |
| ·基因功能验证方法 | 第18-19页 |
| ·转录组学分析方法 | 第19-21页 |
| ·本项目研究的主要意义 | 第21-23页 |
| 第二章 Clg2p 基因的敲除与突变体的验证 | 第23-45页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第23页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·主要试剂配方 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-34页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌 Clg2p 基因的克隆 | 第24-28页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌 Clg2p 基因两翼片段的克隆 | 第28-29页 |
| ·玉米弯孢叶斑病菌 Clg2p 基因拷贝数的分析 | 第29-30页 |
| ·SOE-PCR 构建敲除载体的示意图 | 第30页 |
| ·构建敲除载体 | 第30-32页 |
| ·PEG 介导的原生质转化 | 第32-33页 |
| ·Clg2p 基因敲除突变体的筛选 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-42页 |
| ·PCR 扩增 Clg2p 基因 | 第34-35页 |
| ·基因序列的生物信息学比对 | 第35-36页 |
| ·同源片段的拷贝数分析 | 第36-37页 |
| ·Clg2p 基因的侧翼序列 | 第37-38页 |
| ·敲除载体的验证 | 第38-39页 |
| ·获得转化子 | 第39-40页 |
| ·敲除突变体的验证 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 Clg2p 基因敲除突变体的生物学与致病性分析 | 第45-61页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·菌落形态的观察 | 第45页 |
| ·生长速度的测定 | 第45页 |
| ·孢子形态的统计 | 第45-46页 |
| ·产孢性状的观测 | 第46页 |
| ·孢子萌发率的统计 | 第46页 |
| ·附着胞的观察 | 第46页 |
| ·色素性状观察 | 第46页 |
| ·Clg2p 基因突变体的致病性检测 | 第46-47页 |
| ·细胞壁降解酶活性的分析 | 第47-48页 |
| ·细胞壁完整性检测 | 第48页 |
| ·荧光定量 PCR 技术分析 Clg2p 基因在不同时期的表达情况 | 第48-49页 |
| ·不同碳源和氮源对 Clg2p 基因突变体生长速率的影响 | 第49页 |
| ·过氧化氢压力筛选测定 | 第49页 |
| ·山梨醇影响测定 | 第49页 |
| ·尿酸酶活性分析 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-59页 |
| ·Clg2p 基因对菌落形态的影响 | 第50-51页 |
| ·Clg2p 基因对生长速度的影响 | 第51页 |
| ·Clg2p 基因对孢子形态的影响 | 第51-52页 |
| ·Clg2p 基因对产孢性状的影响 | 第52页 |
| ·Clg2p 基因对孢子萌发率的影响 | 第52-53页 |
| ·Clg2p 基因对附着胞情况的影响 | 第53页 |
| ·Clg2p 对色素情况的影响 | 第53-54页 |
| ·Clg2p 基因对致病性的影响 | 第54-55页 |
| ·Clg2p 基因对细胞壁降解酶活性的影响 | 第55-57页 |
| ·Clg2p 基因对细胞壁完整性的影响 | 第57页 |
| ·Clg2p 基因在不同时期的表达情况 | 第57-58页 |
| ·Clg2p 基因对不同碳、氮源吸收的影响 | 第58页 |
| ·Clg2p 基因对过氧化氢压力的影响 | 第58页 |
| ·Clg2p 基因对山梨醇的影响 | 第58-59页 |
| ·Clg2p 基因对尿酸酶活性的影响 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 比较转录组分析 | 第61-77页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·供试菌株 | 第61页 |
| ·试剂 | 第61页 |
| ·试验方法 | 第61-64页 |
| ·样本的制备 | 第61页 |
| ·基因组 RNA 的提取、检测 | 第61页 |
| ·文库的构建 | 第61页 |
| ·高通量测序 | 第61-62页 |
| ·质量控制及产量统计 | 第62页 |
| ·序列拼接 | 第62页 |
| ·基因表达差异分析 | 第62-63页 |
| ·差异表达基因的 GO 和 KEGG 功能注释 | 第63页 |
| ·差异表达基因的 GO 和 KEGG 功能富集分析 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-75页 |
| ·质控分析 | 第64页 |
| ·测序产量统计及质量检测 | 第64页 |
| ·序列拼接 | 第64-65页 |
| ·筛选差异表达基因 | 第65-67页 |
| ·差异表达基因的 GO 分析 | 第67-69页 |
| ·差异表达基因的 GO 显著富集分析 | 第69-73页 |
| ·差异表达基因的 KEGG Pathway 分析 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 第五章 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 个人简历 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88页 |
