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伤寒沙门菌malS-5UTR的鉴定及功能研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-20页
第一章 绪论第20-29页
   ·伤寒沙门菌简介第20-21页
   ·细菌中的非编码RNA第21-26页
     ·非编码RNA的分类及特征第22-24页
     ·ncRNAs的发现第24-26页
   ·本研究的立项依据及意义第26-28页
   ·本课题研究内容第28-29页
第二章 本论文研究的目的、内容、特色、实验方案第29-33页
   ·研究目的第29页
   ·研究内容第29-30页
     ·malS-5'UTR的分子特征研究第29页
     ·malS-5'UTR的表达特性研究第29页
     ·malS-5'UTR的功能研究第29-30页
     ·malS-5'UTR影响侵袭的分子机制研究第30页
   ·本研究的特色和创新之处第30-31页
   ·本研究实验方案的设计第31-33页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的分子特征研究第31页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的表达特性研究第31页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的功能分析第31-33页
第三章 malS-5'UTR的分子特征研究第33-52页
   ·材料与方法第33-34页
     ·菌株和质粒第33-34页
   ·实验方法第34-46页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的RT-PCR、Northern blot验证第34-37页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的分子全长鉴定第37-46页
   ·实验结果第46-50页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的RT-PCR及Northern blot验证结果第46-47页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR的分子全长鉴定第47-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 malS-5'UTR的表达特性研究第52-60页
   ·材料与方法第52-53页
     ·菌株和质粒第52-53页
   ·实验方法第53-56页
     ·qRT-PCR及Northern blot检测malS-5'UTR在不同生长时期的表达水平第53-55页
     ·qRT-PCR及Northern blot检测malS-5'UTR在不同应激条件下的表达水平第55页
     ·qRT-PCR及Northern blot检测malS-5'UTR在不同应激条件下在ΔrpoE及ArpoS中的表达水平第55-56页
   ·实验结果第56-58页
     ·qRT-PCR及Northern blot分析malS-5'UTR在不同生长时期的表达水平第56-57页
     ·qRT-PCR及Northern blot分析malS-5'UTR在不同应激下的表达水平第57-58页
     ·qRT-PCR及Northern blot分析在各种应激下不同σ因子对malS-5'UTR表达的影响第58页
   ·讨论第58-60页
第五章 malS-5'UTR的功能研究第60-87页
   ·材料与方法第61页
     ·菌株和质粒第61页
   ·实验方法第61-72页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR基因缺陷变异株的构建第61-65页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR高表达菌株的构建第65-69页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR在不同条件下生长曲线的测定第69页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR对细菌动力的影响第69页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR基因缺陷株的基因表达谱分析第69-71页
     ·qRT-PCR对芯片结果中部分变化基因进行验证第71页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR基因缺陷株的上皮细胞侵袭实验第71-72页
   ·结果第72-83页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR基因缺陷变异株的构建第72-73页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR高表达菌株的构建第73-76页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR基因缺陷变异株的生长曲线分析第76页
     ·伤寒沙门菌malS-5'UTR基因缺失对动力的影响第76-77页
     ·芯片扫描结果及基因表达谱差异表达分析第77-81页
     ·qRT-PCR验证部分芯片结果第81-82页
     ·伤寒沙门菌对上皮细胞侵袭实验结果第82-83页
   ·讨论第83-87页
第六章 malS-5'UTR影响侵袭的分子机制研究第87-115页
   ·材料与方法第88页
     ·菌株和质粒第88页
   ·实验方法第88-98页
     ·malS-5'UTR对bax mRNA稳定性的qRT-PCR及Northern blot分析第88-89页
     ·染色体bax 3×FLAG融合菌株的构建第89-93页
     ·malS-5'UTR高表达质粒电击转化入S.Typhi bax 3×FLAG融合菌株第93-94页
     ·malS-5'UTR对Bax蛋白表达的Western blot分析第94-95页
     ·伤寒沙门菌bax基因缺陷变异株的构建第95-97页
     ·bax基因缺陷变异株的基因表达谱分析第97页
     ·qRT-PCR对芯片变化结果中部分基因进行验证第97页
     ·伤寒沙门菌bax基因缺失对细菌动力的影响第97页
     ·伤寒沙门菌bax基因缺陷株的上皮细胞侵袭实验第97页
     ·malS-5'UTR高表达导入bax缺陷株后qRT-PCR检测invF的水平第97-98页
     ·malS-5'UTR高表达导入bax缺陷株后的上皮细胞侵袭实验第98页
   ·结果第98-112页
     ·malS-5'UTR对bax mRNA稳定性的qRT-PCR及Northern blot结果第98-99页
     ·malS-5'UTR对Bax蛋白表达的Western blot结果第99-106页
     ·伤寒沙门菌bax基因缺陷变异株的构建第106页
     ·bax基因缺陷变异株的芯片扫描结果及基因表达谱差异表达分析第106-109页
     ·qRT-PCR验证部分芯片结果第109页
     ·伤寒沙门菌bax基因缺失对动力影响的结果第109-110页
     ·伤寒沙门菌bax基因缺失对上皮细胞侵袭实验结果第110-111页
     ·malS-5'UTR高表达导入bax缺陷株后qRT-PCR检测invF的水平第111-112页
     ·malS-5'UTR高表达导入bax缺陷株后对HeLa细胞侵袭能力的影响第112页
   ·讨论第112-115页
第七章 主要结论及展望第115-117页
   ·主要结论第115-116页
   ·展望第116-117页
参考文献第117-127页
附录第127-132页
本研究中所使用的缩略语第132-133页
致谢第133-134页
攻读博士学位期间发表的文章第134页

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