| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1. 硫苷研究进展 | 第14-18页 |
| ·硫苷分类及结构 | 第14页 |
| ·硫苷生物合成关键调节基因 | 第14-17页 |
| ·氨基酸侧链延长 | 第15-16页 |
| ·硫苷核心结构形成 | 第16页 |
| ·葡萄糖配基侧链次级修饰 | 第16-17页 |
| ·硫苷功能 | 第17-18页 |
| ·影响植物的风味 | 第17页 |
| ·生物防御功能 | 第17页 |
| ·保健功能 | 第17-18页 |
| 2. 黑芥子酶研究进展 | 第18-20页 |
| ·黑芥子酶的分布 | 第18页 |
| ·黑芥子酶与其同工酶 | 第18-19页 |
| ·黑芥子酶活性 | 第19页 |
| ·黑芥子酶基因克隆 | 第19-20页 |
| ·黑芥子酶应用 | 第20页 |
| 3. 本研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 萝卜RsBCAT4、RsUGT74B1和RsGS-OX1基因的克隆与表达特性分析 | 第22-42页 |
| 摘要 | 第22-23页 |
| 1. 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·所需试剂 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-25页 |
| ·总DNA提取 | 第23页 |
| ·总RNA提取 | 第23-24页 |
| ·RNA纯化 | 第24页 |
| ·RNA检测 | 第24页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增 | 第25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·萝卜硫苷合成代谢过程中关键基因特异扩增 | 第25页 |
| ·克隆及序列分析 | 第25-26页 |
| ·硫苷合成代谢过程中相关基因的半定量RT-PCR表达分析 | 第26页 |
| ·硫苷合成代谢过程中相关基因qRT-PCR分析 | 第26页 |
| 2. 结果与分析 | 第26-38页 |
| ·扩增和克隆结果 | 第26-27页 |
| ·萝卜RsBCAT4、RsUGT74B1、RsGS-OX1基因克隆 | 第27-36页 |
| ·萝卜RsBCAT4基因克隆及序列分析 | 第27-31页 |
| ·萝卜RsUGT74B1基因克隆及序列分析 | 第31-34页 |
| ·萝卜RsGS-OX1基因cDNA克隆及序列分析 | 第34-36页 |
| ·萝卜RsBCAT4、RsUGT74B1及RsGS-OX1基因表达分析 | 第36-38页 |
| 3. 讨论 | 第38-42页 |
| ·RsBCAT4基因的结构及表达特性分析 | 第39页 |
| ·RsUGT74B1基因的结构及表达特性分析 | 第39-40页 |
| ·RsGS-OX1基因的结构及表达特性分析 | 第40-42页 |
| 第三章 萝卜硫苷合成代谢关键基因启动子克隆及调控元件分析 | 第42-56页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-45页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·RsCYP79F1、RsCYP83A1、RsSUR1、RsSOT18基因克隆 | 第43-44页 |
| ·接头序列及接头引物 | 第44页 |
| ·基因特异性引物 | 第44-45页 |
| ·基因组步移文库构建 | 第45页 |
| ·PCR反应 | 第45页 |
| ·启动子生物信息学分析 | 第45页 |
| 2. 结果与分析 | 第45-53页 |
| ·RsCYP79F1基因克隆与序列分析 | 第45-47页 |
| ·RsCYP83A1基因克隆与序列分析 | 第47-49页 |
| ·RsSUR1基因克隆与序列分析 | 第49-51页 |
| ·RsSOT18基因克隆与序列分析 | 第51-53页 |
| 3. 讨论 | 第53-56页 |
| ·RsCYP79F1基因结构及启动子序列分析 | 第54页 |
| ·RsCYP83A1基因结构及启动子序列分析 | 第54页 |
| ·RsSUR1基因结构及启动子序列分析 | 第54-55页 |
| ·RsSOT18基因结构及启动子序列分析 | 第55-56页 |
| 第四章 萝卜黑芥子酶基因克隆及非生物胁迫下表达特征分析 | 第56-74页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1. 材料与方法 | 第57-58页 |
| ·实验材料与主要试剂 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·RsMyr1及RsMyr2基因的克隆 | 第57页 |
| ·RsMyr2基因表达分析 | 第57-58页 |
| ·RsMyr2基因启动子的克隆 | 第58页 |
| ·基因全长的获得及原核表达载体的构建 | 第58页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第58页 |
| ·GRsMyr2过表达载体的构建 | 第58页 |
| 2. 结果与分析 | 第58-70页 |
| ·萝卜RsMyr1和RsMyr2基因的扩增和克隆结果 | 第58-59页 |
| ·萝卜RsMyr1基因的克隆及序列分析 | 第59-61页 |
| ·萝卜RsMyr2基因的克隆及序列分析 | 第61-65页 |
| ·萝卜RsMyr2基因表达分析 | 第65-66页 |
| ·萝卜RsMyr2基因启动子克隆及序列分析 | 第66-69页 |
| ·萝卜RsMyr1和RsMyr2基因的原核表达 | 第69页 |
| ·GRsMyr2基因过表达载体构建 | 第69-70页 |
| 3. 讨论 | 第70-74页 |
| ·RsMyr1及RsMyr2基因序列分析 | 第71页 |
| ·RsMyr2基因启动子序列分析 | 第71页 |
| ·RsMyr1及RsMyr2基因原核表达分析 | 第71-72页 |
| ·RsMyr2基因表达分析 | 第72-74页 |
| 全文结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
