甜菜夜蛾RNAi害虫控制的潜在靶标基因筛选和风险评估
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词中英文对照 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 甜菜夜蛾是农业生产上的重要害虫 | 第13-15页 |
| ·生活习性 | 第13-14页 |
| ·生活史 | 第14页 |
| ·分布与危害 | 第14-15页 |
| ·目前的防治策略 | 第15页 |
| 2 RNA干扰及其应用 | 第15-22页 |
| ·RNAi的研究历程 | 第16-17页 |
| ·RNAi的机理 | 第17-19页 |
| ·昆虫中RNAi的方法 | 第19-21页 |
| ·RNAi在昆虫学中的应用 | 第21-22页 |
| 3 siRNA的脱靶效应 | 第22-26页 |
| ·脱靶效应 | 第22-23页 |
| ·引发脱靶效应的因素 | 第23-24页 |
| ·脱靶效应的预测 | 第24-25页 |
| ·最小化脱靶效应的方法 | 第25-26页 |
| 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 甜菜夜蛾RNAi害虫控制靶标基因全长克隆 | 第27-41页 |
| 摘要 | 第27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-34页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第27-28页 |
| ·供试昆虫的饲养 | 第28-29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·总RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·cDNA的合成 | 第31页 |
| ·RACE cDNA的合成 | 第31-32页 |
| ·PCR反应 | 第32页 |
| ·分子克隆 | 第32-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-39页 |
| ·9条甜菜夜蛾RNAi害虫控制的潜在靶标基因 | 第34-37页 |
| ·基因片段验证分析 | 第37页 |
| ·基因的全长克隆分析 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 甜菜夜蛾害虫控制潜在靶标基因的RNA干扰 | 第41-53页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第41-42页 |
| ·供试昆虫的饲养 | 第42页 |
| ·活体注射 | 第42-43页 |
| ·总RNA提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA的合成 | 第44页 |
| ·qRT-PCR引物设计 | 第44页 |
| ·qRT-PCR检测RNAi的效率 | 第44-45页 |
| ·死亡和发育情况观察 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·siRNA导入观察 | 第45页 |
| ·RNAi后mRNA表达情况 | 第45-47页 |
| ·RNAi后死亡率 | 第47-48页 |
| ·RNAi后生长发育情况 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-53页 |
| 第四章 甜菜夜蛾RNAi脱靶效应分析 | 第53-73页 |
| 摘要 | 第53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-57页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第53-54页 |
| ·供试昆虫的饲养 | 第54页 |
| ·RNAi | 第54页 |
| ·总RNA提取 | 第54页 |
| ·cDNA的合成 | 第54页 |
| ·非靶标基因的确定 | 第54-55页 |
| ·qRT-PCR引物设计 | 第55-56页 |
| ·DGE检测和分析 | 第56页 |
| ·qRT-PCR验证和分析 | 第56页 |
| ·qRT-PCR和DGE检测综合分析 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-70页 |
| ·RNAi结果 | 第57页 |
| ·DGE检测结果 | 第57-62页 |
| ·qRT-PCR检测结果 | 第62-65页 |
| ·DGE和qRT-PCR检测结果综合分析 | 第65-70页 |
| 3 讨论 | 第70-73页 |
| 第五章 甜菜夜蛾siRNA对家蚕的影响分析 | 第73-83页 |
| 摘要 | 第73页 |
| 1 材料与方法 | 第73-77页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第73-74页 |
| ·供试昆虫来源及饲养 | 第74页 |
| ·家蚕RNAi | 第74页 |
| ·非靶标基因的确定 | 第74-75页 |
| ·总RNA提取 | 第75页 |
| ·cDNA的合成 | 第75页 |
| ·qRT-PCR引物设计 | 第75-77页 |
| ·qRT-PCR检测和分析 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-80页 |
| ·非靶标基因统计 | 第77页 |
| ·家蚕RNAi方法的建立 | 第77-78页 |
| ·qRT-PCR检测结果 | 第78-80页 |
| 3 讨论 | 第80-83页 |
| 全文总结 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 攻读硕士学位期间学术论文发表情况 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
