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苜蓿中华根瘤菌中ActS/ActR双组份系统酸调节基因的功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
前言第8-18页
材料与方法第18-35页
   ·材料和试剂第18-21页
     ·本实验所使用的菌株和质粒第18-19页
     ·PCR引物第19-20页
     ·RT-PCR引物第20-21页
     ·培养基和抗生素第21页
     ·主要试剂第21页
   ·方法第21-35页
     ·质粒制备及纯化第21-23页
     ·DNA片段的纯化回收第23页
     ·细菌基因组的提取第23-24页
     ·工具酶的使用第24页
     ·三亲本接合转移实验第24-25页
     ·噬菌体转导实验第25-26页
     ·点突变重组质粒的构建第26-29页
     ·插入突变重组质粒的构建第29页
     ·在actSH219A点突变的背景下构建actS/actR的双突变第29-30页
     ·细菌双杂交实验第30页
     ·菌落转移滤波器分析(Colony-lift Filter Assay)第30-31页
     ·酸敏感实验第31页
     ·过氧化物敏感性实验第31页
     ·共生固氮实验与竞争结瘤实验第31-32页
     ·细菌RNA的提取方法第32-35页
结果第35-44页
   ·细菌双杂实验第35-36页
   ·酸敏感实验第36-37页
   ·过氧化物敏感性实验第37-39页
   ·共生固氮实验第39-42页
   ·actR19的竞争结瘤能力分析第42-43页
   ·双组份系统ActS/ActR相关突变体基因表达的分析第43-44页
讨论第44-45页
结论与创新点第45-46页
发表论文第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-53页

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