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农杆菌介导柑橘遗传转化体系的优化

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
縮略词表第8-13页
第一章 前言第13-21页
 1 柑橘遗传转化体系研究进展第13-14页
   ·柑橘再生体系研究第13-14页
   ·农杆菌介导的遗传转化体系研究第14页
 2 影响柑橘遗传转化的因素第14-20页
   ·农杆菌菌株第14-16页
     ·农杆菌菌株的选择第15页
     ·农杆菌对外植体的侵染力第15-16页
   ·受体材料对转化效率的影响第16-18页
     ·基因型第16页
     ·外植体类型第16-17页
     ·外植体的发育阶段第17页
     ·外植体光照与暗培养时间第17页
     ·外植体伤口渗出物第17-18页
   ·培养条件第18-20页
     ·培养基第18页
     ·共培养时间和方式第18页
     ·共培养基的pH值第18页
     ·共培温度第18-19页
     ·提高转化能力物质的加入第19-20页
   ·其他提高转化率的方法第20页
 3 本研究的目的与意义第20-21页
第二章 金柑高效再生及遗传转化体系的建立第21-46页
 1 材料与方法第21-28页
   ·材料准备第21页
   ·金柑再生体系研究第21-23页
     ·再生培养基筛选第22页
     ·实生苗生长过程中光照模式的研究第22页
     ·不定芽生根培养基的确定第22-23页
     ·不定芽通过嫁接再生成苗第23页
   ·金柑遗传转化技术体系的建立第23-26页
     ·农杆菌菌株与载体第23-24页
     ·农杆菌侵染第24页
     ·农杆菌生长曲线绘制第24页
     ·乙酰丁香酮的添加第24页
     ·共培时外植体放置方式第24页
     ·农杆菌侵染条件研究第24-25页
     ·农杆菌与外植体共培养条件研究第25页
     ·不同农杆菌重悬液比较第25-26页
   ·组织化学染色第26页
   ·GUS阳性植株嫁接成苗第26页
   ·转基因植株的分子检测第26-27页
     ·PCR分子检测第26-27页
     ·分子检测技术的优化第27页
   ·数据统计及分析第27-28页
 2 结果与分析第28-43页
   ·金柑高效再生体系的建立第28-30页
     ·不同再生培养基对金柑不定芽生长的影响第28页
     ·不同光照和暗培养时间对再生的影响第28页
     ·不同培养基对金柑生根的影响第28-30页
   ·金柑高效遗传转化技术体系的建立第30-39页
     ·EHA105农杆菌生长曲线制备第30-31页
     ·抗生素敏感性试验第31-32页
     ·AS不同加入时间对转化的影响第32-33页
     ·外植体共培养时不同放置方式对转化的影响第33页
     ·光照模式对抗性芽再生及转化的影响第33-34页
     ·不同重悬液对转化的影响第34-35页
     ·农杆菌的侵染条件对转化的影响第35-37页
     ·农杆菌与外植体共培养条件对转化的影响第37-39页
   ·转基因株系的获得第39-43页
     ·农杆菌GUS染色第39-40页
     ·抗性芽GUS组织染色第40-41页
     ·部分GUS阳性株系进行PCR初步检测第41页
     ·分子检测方法的优化第41-42页
     ·转基因株系的表达分析第42-43页
 3 讨论第43-45页
 4 小结第45-46页
第三章 甜橙遗传转化技术体系的优化第46-56页
 1 材料与方法第46-49页
   ·植物材料第46页
   ·菌株与载体第46-47页
   ·培养条件第47页
     ·再生培养条件第47页
     ·农杆菌转化糖第47页
   ·不同光照时间对不定芽再生和转化的影响第47页
   ·不同共培养条件对转化的影响第47-48页
   ·抗性芽通过生根再生成苗第48页
   ·抗性芽通过试管嫁接再生成苗第48页
   ·GUS组织染色第48页
   ·PCR分子检测第48页
   ·数据统计及分析第48-49页
 2 结果与分析第49-54页
   ·实生苗生长过程中光照模式对其节间茎段再生及转化的影响第49-50页
   ·共培养条件的正交试验结果分析第50-52页
   ·GUS染色结果第52页
   ·抗性芽通过生根再生成苗第52-53页
   ·PCR检测结果第53-54页
 3 讨论第54-55页
 4 小结第55-56页
第四章 柠檬遗传转化体系的初步优化第56-62页
 1 材料与方法第56-58页
   ·植物材料第56页
   ·农杆菌菌株及载体第56-57页
   ·柠檬再生培养基筛选第57页
   ·抗生素浓度筛选第57页
   ·除草剂浓度筛选第57页
   ·农杆菌转化柠檬第57-58页
   ·抗性芽荧光检测第58页
   ·数据统计及分析第58页
 2 结果与分析第58-60页
   ·柠檬再生培养基筛选第58页
   ·卡那霉素浓度筛选第58-59页
   ·除草剂浓度筛选第59-60页
   ·柠檬抗性芽的检测第60页
 3 讨论第60-61页
 4 小结第61-62页
全文总结第62-63页
本研究创新之处第63-64页
下一步工作计划第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73-74页
个人简历第74页

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