| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·糙皮侧耳概述 | 第9页 |
| ·糙皮侧耳的生活史 | 第9-10页 |
| ·糙皮侧耳生长发育阶段所需的外界条件 | 第10-11页 |
| ·温度条件 | 第10页 |
| ·营养条件 | 第10页 |
| ·水分和空气相对湿度 | 第10-11页 |
| ·空气 | 第11页 |
| ·酸碱度 | 第11页 |
| ·光线 | 第11页 |
| ·常用的差异表达基因的研究方法 | 第11-14页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第12页 |
| ·代表性差异分析 | 第12-13页 |
| ·基因表达系列分析技术 | 第13页 |
| ·cDNA微阵列技术 | 第13页 |
| ·抑制性消减杂交技术 | 第13-14页 |
| ·抑制性消减杂交技术(SSH)简介 | 第14-16页 |
| ·抑制性消减杂交技术的主要技术流程 | 第14-15页 |
| ·抑制性消减杂交技术的优势及局限性 | 第15页 |
| ·抑制性消减杂交技术的应用 | 第15-16页 |
| ·食用真菌中差异表达基因的研究现状 | 第16-18页 |
| ·糙皮侧耳中差异表达基因的研究现状 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| ·研究的依据和目的 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21页 |
| 3 材料和方法 | 第21-37页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·主要试剂、引物及仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·实验中主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-37页 |
| ·提取糙皮侧耳总RNA的准备工作 | 第23-24页 |
| ·实验材料的准备 | 第24页 |
| ·提取糙皮侧耳双核菌丝和原基总的RNA | 第24-25页 |
| ·消减文库的构建 | 第25-35页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第25-26页 |
| ·长距离PCR(Long-distance PCR)扩增cDNA第二条链 | 第26-27页 |
| ·柱层析法纯化PCR反应产物 | 第27-28页 |
| ·酶切 | 第28页 |
| ·酶切后的cDNA纯化 | 第28-29页 |
| ·接头连接 | 第29-30页 |
| ·接头效率检测 | 第30-31页 |
| ·第一次杂交 | 第31页 |
| ·第二次杂交 | 第31-32页 |
| ·选择性PCR扩增 | 第32-34页 |
| ·SSH二次PCR产物的纯化 | 第34页 |
| ·抑制消减效率的检测 | 第34-35页 |
| ·消减cDNA文库的筛选 | 第35-37页 |
| ·二次PCR产物纯化后与PMD-19载体连接 | 第35页 |
| ·感受态细胞的制备方法(CaCl2法) | 第35页 |
| ·转化 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的挑选与扩增 | 第36页 |
| ·消减文库单克隆的测序及生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·总RNA质量的检测 | 第37页 |
| ·双链cDNA的合成最佳循环数的确定 | 第37-38页 |
| ·RsaI酶切 | 第38-39页 |
| ·接头连接效率分析 | 第39页 |
| ·第一次、第二次PCR产物分析 | 第39-41页 |
| ·第一次PCR产物分析 | 第39-40页 |
| ·第二次PCR产物分析 | 第40-41页 |
| ·消减效率的检测 | 第41-42页 |
| ·消减文库插入片段检测 | 第42-43页 |
| ·测序分析检测cDNA文库构建效果 | 第43页 |
| 5 结论与讨论 | 第43-46页 |
| ·主要结论 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·后续工作设想 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 英文摘要 | 第50-51页 |