摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-20页 |
前言 | 第20-21页 |
第一章 MSCs分离、纯化、培养及鉴定 | 第21-28页 |
1 材料与方法 | 第21-23页 |
·实验动物 | 第21页 |
·主要试剂及配置 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·培养瓶包被 | 第21页 |
·MSCs的取材、分离及纯化 | 第21-22页 |
·MSCs传代培养 | 第22页 |
·分化培养基诱导分化 | 第22页 |
·骨骼肌MSCs的鉴定 | 第22-23页 |
2 结果 | 第23-25页 |
·MSCs形态、生长特性及分化 | 第23页 |
·MSCs免疫细胞化学染色鉴定 | 第23-25页 |
3 讨论 | 第25-27页 |
·MSCs概述 | 第25-26页 |
·MSCs与失神经肌支配后运动终板退变及肌萎缩机制 | 第26-27页 |
4 总结 | 第27-28页 |
第二章 aFGF基因真核表达载体构建、转染MSCs及基因表达功能检测 | 第28-44页 |
1 材料与方法 | 第28-32页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
2 结果 | 第32-39页 |
·aFGF基因获取 | 第32页 |
·质粒酶切和测序鉴定 | 第32页 |
·Lipofectamine~(TM)2000 Reagent转染及G418筛选浓度的选择 | 第32-33页 |
·转染效率测定 | 第33页 |
·目的基因表达检测 | 第33-39页 |
3 讨论 | 第39-43页 |
·基因治疗概述 | 第39页 |
·目的基因选择 | 第39-40页 |
·靶细胞选择 | 第40-41页 |
·载体选择和目的基因导入靶细胞方法 | 第41-42页 |
·目的基因表达和调控 | 第42-43页 |
4 总结 | 第43-44页 |
第三章 动物损伤模型制作及移植携带aFGF基因的MSCs疗效评价 | 第44-58页 |
1 材料与方法 | 第44-46页 |
·材料 | 第44页 |
·方法 | 第44-46页 |
2 结果 | 第46-55页 |
·肉眼形态学检查结果 | 第46页 |
·胫前肌湿重检测结果 | 第46-47页 |
·光镜组织学检查结果 | 第47-48页 |
·神经肌肉接头低频重复电刺激检测结果 | 第48-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
·神经损伤概述 | 第55-56页 |
·神经损伤后运动终板退变及肌萎缩机制 | 第56-57页 |
·转基因MSCs对预防运动终板退变及萎缩效果评价 | 第57页 |
4 总结 | 第57-58页 |
全文总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
中英文缩略词 | 第65-66页 |
综述 | 第66-77页 |
参考文献 | 第73-77页 |
攻读学位期间成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-80页 |