| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·番木瓜环斑病毒(PAPAYA RINGSPOT VIRUS)的研究进展 | 第11-12页 |
| ·番木瓜环斑病的症状和危害 | 第11-12页 |
| ·番木瓜环斑病毒病毒基因组特征 | 第12页 |
| ·运动蛋白基因和复制酶基因研究进展 | 第12-15页 |
| ·运动蛋白基因的研究进展 | 第12-14页 |
| ·植物运动蛋白的类型和功能 | 第13页 |
| ·运动蛋白介导的植物抗病性 | 第13-14页 |
| ·PRSV编码的运动蛋白的特点 | 第14页 |
| ·复制酶基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·复制酶基因的结构和特点 | 第14页 |
| ·复制酶基因介导的抗性研究 | 第14-15页 |
| ·番木瓜环斑病毒复制酶的应用 | 第15页 |
| ·RNAI(RNA INTERFERENCE)技术介导的抗病毒基因工程 | 第15-18页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第16-17页 |
| ·RNAi技术的特点 | 第17-18页 |
| ·RNAI技术在植物抗病性中的应用 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·细菌菌株、质粒和病毒样品 | 第20页 |
| ·仪器与试剂 | 第20-21页 |
| ·仪器 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·主要细菌培养基 | 第21页 |
| ·主要植物培养基 | 第21-22页 |
| ·PCR使用的引物 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·番木瓜的遗传转化 | 第23-24页 |
| ·番木瓜茎尖无菌系的建立 | 第23页 |
| ·番木瓜茎尖诱导愈伤 | 第23页 |
| ·番木瓜胚状体的诱导 | 第23-24页 |
| ·番木瓜胚状体的转化 | 第24页 |
| ·黄瓜的遗传转化 | 第24-26页 |
| ·黄瓜无菌苗的准备 | 第24-25页 |
| ·黄瓜再生体系外植体的选择与确定 | 第25-26页 |
| ·根癌农杆菌介导的黄瓜的遗传转化与抗性芽筛选培养 | 第26页 |
| ·黄瓜抗性芽的伸长培养、生根培养、炼苗及移栽 | 第26页 |
| ·PRSV粗提纯与番木瓜原生质体转化 | 第26-30页 |
| ·番木瓜环斑病毒(PRSV)的粗提纯 | 第26-27页 |
| ·番木瓜环斑病毒(PRSV)的粗制剂病毒浓度的计算 | 第27页 |
| ·番木瓜原生质体的提取 | 第27页 |
| ·细胞记数板测定原生质体的密度 | 第27页 |
| ·原生质体转化 | 第27-28页 |
| ·TransZol Up试剂盒提取番木瓜原生质体RNA | 第28-29页 |
| ·RT-PCR | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-35页 |
| ·番木瓜胚状体的遗传转化 | 第30-31页 |
| ·番木瓜茎尖无菌系的建立与茎尖愈伤组织的诱导 | 第30页 |
| ·番木瓜胚状体的诱导 | 第30-31页 |
| ·番木瓜胚状体的转化 | 第31页 |
| ·黄瓜的遗传转化 | 第31-32页 |
| ·黄瓜外植体的选择对黄瓜不定芽再生的影响 | 第31页 |
| ·不同植物生长调节剂与AgN03配比对黄瓜不定芽再生的影响 | 第31页 |
| ·黄瓜抗性芽的筛选培养 | 第31-32页 |
| ·黄瓜抗性芽的伸长培养、生根培养、炼苗及移栽 | 第32页 |
| ·PRSV粗提纯与原生质体转化 | 第32-35页 |
| ·番木瓜环斑病毒(PRSV)的粗提存 | 第32-33页 |
| ·番木瓜原生质体的提取 | 第33页 |
| ·质粒、病毒粒子共转化原生质体的分子检测 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第35-36页 |
| ·外植体对遗传转化的影响 | 第35-36页 |
| ·农杆菌的浓度与侵染时间对转化及转化后外植体再生的影响 | 第36页 |
| ·番木瓜原生质体转化 | 第36-38页 |
| ·原生质体与PRSV的提取 | 第36-37页 |
| ·番木瓜原生质体的共转化与检测 | 第37页 |
| ·原生质体瞬时表达体系在植物抗病研究中的应用 | 第37-38页 |
| ·前景与展望 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 附录1 常用溶液与培养基配制 | 第44-45页 |
| 附录2 大肠杆菌感受态制备及转化方法 | 第45页 |
| 附录3 农杆菌感受态制备及转化方法 | 第45-46页 |
| 附录4 大肠杆菌质粒DNA提取方法 | 第46-47页 |
| 图版与说明 | 第47-50页 |
